[發明專利]一種雞毒支原體和雞滑液囊支原體二聯滅活疫苗

在審

• 申請號: 201610236276.9
• 申請日: 2016-04-15
• 公開（公告）號: CN105770881A
• 公開（公告）日: 2016-07-20
• 發明（設計）人: 馬爽;范根成;宋新宇;竇小龍;趙鵬;程增青;郭莉莉;孫健;胡瀟
• 申請（專利權）人: 青島易邦生物工程有限公司
• 主分類號: A61K39/02
• 分類號: A61K39/02;A61P31/04;C12N1/20;C12R1/35
• 代理公司: 北京科億知識產權代理事務所(普通合伙) 11350
• 代理人: 湯東鳳

技術領域

本發明屬于獸用生物制品技術領域，具體涉及一種雞毒支原體和雞滑液囊 支原體二聯滅活疫苗。

背景技術

雞毒支原體(MycoplasmaGallisepticum，MG)是雞的慢性呼吸道病(Chronic RespiratoryDisease，CRD)的病原體，其特征為呼吸啰音、咳嗽、流漿液性鼻液， 氣囊炎，嚴重時張口呼吸。通常與病毒、細菌協同感染，導致呼吸道癥狀加劇， 使死亡率增高。MG感染在國內禽群中相當普遍，感染后雞死亡率一般很低， 主要表現為產蛋率、孵化率降低，出欄期延長和飼料利用率降低，對該病的預 防和控制程序也額外增加了成本，同時造成禽產品中藥物殘留，給養禽業造成 嚴重的經濟損失。

雞滑液囊支原體(Mycoplasmasynoviae，MS)又稱雞傳染性滑膜炎，是由 雞滑液囊支原體引起雞和火雞等的一種急性或慢性傳染病。雞傳染性滑膜炎是 Olson等(1964)首先報道的。本病以侵害關節滑液，腱鞘膜為主，其特征為 關節、腱鞘和足掌腫脹等。雞群感染該病可導致明顯的跛行、生長發育遲緩及 胴體降級等，本病可垂直傳播，導致種雞發病期間所產種蛋孵出的雛雞發病。 雞滑液囊支原體感染已遍及全球，呈世界性分布，主要侵害商品肉雞、蛋雞和 種雞，本病一年四季均可發生，但以冬春季節易發。雞滑液囊支原體感染一般 多見于4～16周齡的雞，發病率一般為5％～15％，死亡率約為1％～10％。由 于本病發展緩慢，病程長，一旦在雞群中感染，根除很困難，因此在雞群中長 期蔓延，導致飼料利用率低、生長發育遲緩、淘汰率增高、產蛋量下降等。雞 群如存在兩種病原時，易發生混合感染，加劇病情，死亡率增高，造成嚴重的 經濟損失。

發明內容

本發明的目的是提供一種雞毒支原體和雞滑液囊支原體二聯滅活疫苗，用 于預防由雞毒支原體和雞滑液囊支原體引起的感染，從而彌補現有技術的不足。

本發明提供的雞毒支原體和雞滑液囊支原體二聯滅活疫苗，其包含有抗原 和疫苗佐劑，其中抗原為雞毒支原體CR株和雞滑液囊支原體YBF-MS1株；

雞滑液囊支原體YBF-MS1株(MycoplasmasynoviaeYBF-MS1)，2016年3 月3日保藏于位于武漢大學的中國典型培養物保藏中心，保藏號為：CCTCC NO:M2016080。

雞毒支原體CR株購自中國獸醫藥品監察所，編號為CVCC3616；

本發明的二聯滅活疫苗，其制備方法如下：

1)將雞毒支原體、雞滑液囊支原體分別按10％的量接種于改良CM培養基 中，于37℃,150r/min振蕩培養24～30小時后收獲菌液，作為一級種子液；逐 步做種子擴大培養，獲得菌液；

2)用連續流離心的方法將雞毒支原體和雞滑液囊支原體培養菌液分別作5 倍濃縮值每毫升活菌含量不低于5×10⁹CCU；

3)將濃縮后的菌液無菌導入滅活罐內加入10％甲醛溶液至終濃度為0.2％， 開動攪拌電機慢速攪拌，使其充分混合；37℃攪拌滅活12～16小時，滅活后的 菌液置2～8℃保存；

4)將雞毒支原體和雞滑液囊支原體滅活后的菌液混合，加入終濃度為5％ 吐溫-80，充分混勻即為水相；取注射用白油95份，硬脂酸鋁1份在油相制備 罐中混合均勻并加熱至80℃后，再加入司本-805份，至溫度達到115℃時維持 40分鐘，冷卻后作為油相備用；將水相溶液與油相溶液按照體積比1:1.5～1:2 乳化，即為雞毒支原體、雞滑液囊支原體二聯滅活疫苗。

所述的改良CM培養基，其組分濃度為PPLO肉湯21.0g/L、葡萄糖5.0g/L、 滅活馬血清200～300ml/L、25％酵母浸出液200～300ml/L、1％酚紅溶液 1.0ml/L、1％輔酶I溶液20～30ml/L、1％L-半胱氨酸溶液20～30ml/L，pH值 調至7.6～7.8。

本發明將雞毒支原體和雞滑液囊支原體兩種優勢菌株聯合制備二聯滅活疫 苗，其中雞滑液囊支原體YBF-MS1株為新分離篩選的毒力強、免疫原性好的 優勢菌株，對雞傳染性滑膜炎具有很好的預防效果。本發明疫苗安全性和效力 均良好，能有效的預防雞毒支原體和雞滑液囊支原體感染。

具體實施方式