[發明專利]一種黃樟離體植株再生的方法

有效

• 申請號: 201610228167.2
• 申請日: 2016-04-12
• 公開（公告）號: CN105900834B
• 公開（公告）日: 2017-12-08
• 發明（設計）人: 鄧小梅;白紅娟;奚如春;魯好君;趙帥;陳曉陽
• 申請（專利權）人: 華南農業大學
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 廣州市華學知識產權代理有限公司44245
• 代理人: 裘暉

1.一種黃樟離體植株再生的方法，其特征在于包含如下步驟：

(1)外植體采集：取黃樟樹干基部萌枝，作為外植體，然后消毒；

(2)腋芽誘導：將步驟(1)消毒后的外植體接種到誘導培養基進行誘導培養，得到腋芽；

(3)增殖培養：將步驟(2)培養得到的腋芽轉接到增殖培養基上進行增殖培養，得到增殖苗；

(4)生根培養：從步驟(3)培養得到的增殖苗中切取頂芽轉接到生根培養基上進行生根培養，得到組培生根苗；

(5)煉苗與移栽：將步驟(4)培養得到的組培生根苗移到溫室煉苗移栽，得到容器苗；

(6)移栽幼苗管理；

步驟(2)中所述的誘導培養基包含MH基本培養基以及6-BA0.1～1.0mg/L、NAA0.01～0.1mg/L、蔗糖25～40g/L和卡拉膠7～8g/L，誘導培養基的pH為5.8～6.0；

步驟(3)中所述的增殖培養基包含MH基本培養基以及6-BA 0.5～2mg/L、KT 0.3～1mg/L、NAA 0.05～0.2mg/L、蔗糖25～40g/L和瓊脂5～6g/L，增殖培養基的pH為5.8～6.0；

步驟(4)中所述的生根培養基包含1/2MH基本培養基以及NAA 0.1～0.5mg/L、蔗糖15～20g/L、瓊脂5～6g/L，生根培養基的pH為5.8～6.0；

所述的MH基本培養基包含如下組分：

720mg/L NH₄NO₃、1800mg/L KNO₃、340mg/L CaCl₂·2H₂O、200mg/L Ca(NO₃)₂、370mg/L MgSO₄·7H₂O、170mg/L KH₂PO₄、22.3mg/L MnSO₄·4H₂O、8.6mg/L ZnSO₄·7H₂O、6.2mg/L H₃BO₃、0.83mg/L KI、0.25mg/L Na₂MoO₄·2H₂O、0.025mg/L CuSO₄·5H₂O、0.025mg/L CoCl₂、27.8mg/L FeSO₄·7H₂O、37.3mg/L Na₂·EDTA·H₂O、100mg/L Myo-Insitol、2.0mg/L Glycine、0.1mg/L Thiamine·HCl、0.5mg/L Nicotinic·acid、0.5mg/L Pyridoxine·HCl，MH基本培養基的pH為5.8。

2.根據權利要求1所述的黃樟離體植株再生的方法，其特征在于：

步驟(1)中所述的外植體采集的時間為9～11月。

3.根據權利要求1所述的黃樟離體植株再生的方法，其特征在于：

步驟(1)中所述的外植體為：半木質化萌枝去葉后切成帶1～2個葉腋的莖段。

4.根據權利要求1所述的黃樟離體植株再生的方法，其特征在于：

步驟(2)中所述的誘導培養的條件為溫度為25±2℃，光照時間為8～12h/d；

步驟(3)中所述的增殖培養的條件為25±2℃，光照時間為8～12h/d；

步驟(4)中所述的生根培養的條件為25±2℃，光照時間為8～12h/d。

5.根據權利要求1所述的黃樟離體植株再生的方法，其特征在于：

步驟(5)所述的煉苗移栽的方式為：將組培生根苗移到溫室中適應外界環境5～7d，然后將組培瓶蓋從半開到全開煉苗1～2d，將組培苗取出，洗凈粘于根上的培養基，移栽到混合基質中，移栽完后淋透定根水。

6.根據權利要求1所述的黃樟離體植株再生的方法，其特征在于：

步驟(6)中所述的移栽幼苗管理的方式為：移栽后第一周采用蓋塑料膜保濕，隨后揭開薄膜，保持基質濕潤，空氣相對濕度在95％以上，控制培養溫度15～30℃，蔭棚用70％的遮光網遮光；在移栽后當天采用質量體積百分比濃度0.1％的百菌清或多菌靈溶液噴施小苗，之后每隔7～10天噴霧一次；移栽后待幼苗生長穩定，長出新芽和新根后，噴施質量體積百分比濃度1～2‰的復合肥。