[發明專利]一種高性能的人血液免疫球蛋白M檢測試劑盒

在審

• 申請號: 201610227864.6
• 申請日: 2016-04-13
• 公開（公告）號: CN105785045A
• 公開（公告）日: 2016-07-20
• 發明（設計）人: 駱春梅;王釗
• 申請（專利權）人: 柏榮診斷產品（上海）有限公司
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68
• 代理公司: 成都頂峰專利事務所(普通合伙) 51224
• 代理人: 趙正寅

技術領域

本發明涉及的是生物技術領域，具體涉及的是一種高性能的人血液免疫球蛋白M 檢測試劑盒。

背景技術

IgM占血清免疫球蛋白總量的5％-10％，血清濃度約1mg/ml。單體IgM以膜結合型 (mIgM)表達于細胞表面，構成B細胞抗原受體(BCR)。分泌型IgM為五聚體，是分子量最大的 Ig，沉降系數為19S，稱為巨球蛋白，一般不能通過血管壁，主要存在于血液中。五聚體IgM含 10個Fab段，有很強的抗原結合能力；含5個Fc段，比IgG更易激活補體。天然的血型抗體為 IgM，血型不符的輸血可致嚴重溶血反應。IgM是個體發育過程中最早合成和分泌的抗體，在 胚胎發育晚期的胎兒即能產生IgM，故臍帶血IgM升高提示胎兒有宮內感染(如風疹病毒或 巨細胞病毒等感染)。IgM也是初次體液免疫應答中最早出現的抗體，是機體抗感染的“先頭 部隊”；血清中檢出IgM提示新近發生感染，可用于感染的早期診斷。膜表面IgM是B細胞抗原 受體的主要成分。只表達mIgM是未成熟B細胞的標志。

在感染過程中IgM首先出現，但持續時間不長，是近期感染的標志。IgM的正常參考 值為0.40～2.60g/L。

臨床意義

增高：巨球蛋白血癥、病毒性肝炎急性期、結締組織疾病、惡性腫瘤、傳染性單核細 胞增多癥、傷寒、梅毒、黑熱病、瘧疾、絲蟲病、支原體肺炎、風疹等。

減低：免疫缺陷病、IgA、IgG型的多發性骨髓瘤、何杰金病、慢性淋巴細胞性白血 病、先天愚型、蛋白丟失性胃病、網狀內皮細胞增生性疾病、尿毒癥。

目前市面上檢測血液免疫球蛋白M的試劑盒普通存在著線性范圍較低，抗原過剩 不夠的現象。

發明內容

為了改善上述存在問題，本發明提供了一種高性能的人血液免疫球蛋白M檢測試 劑盒。

為了實現上述目的，本發明采用的技術方案如下：

一種高性能的人血液免疫球蛋白M檢測試劑盒，包括試劑2，所述試劑2為標記有兔 抗人免疫球蛋白M多克隆抗體的膠乳顆粒溶液。其中，試劑1選用常規的磷酸鹽緩沖液、 Good’s緩沖液或甘氨酸緩沖液即可。

值得說明的是，本發明是針對試劑盒中的試劑2進行改進，然而試劑1選用市面上 的常用試劑均可。

由于過低的抗體使用量，在滿足樣本抗體比例不變的情況下，需要樣本稀釋比例 提高，導致過低的樣本量，試劑靈敏度無法滿足臨床使用。抗體量過大，在標記過程中容易 導致膠乳凝聚，試劑批間差異難以控制，并且試劑成本過高，無法接受。膠乳粒徑過小，試劑 靈敏度無法保證，膠乳粒徑過大，膠乳微球顆粒懸浮受到影響，容易沉降，故而，本發明的膠 乳顆粒粒徑范圍為80nm～200nm，每升試劑2中抗體的用量為14ml～26ml。

具體地，本發明是采用化學偶聯方法將兔抗人免疫球蛋白M多克隆抗體標記在膠 乳顆粒上。

作為一種優選，所述試劑盒對樣本進行檢測時，樣本與抗體的體積比為1:6.3～1： 11.7。通過上述限定，能夠避免樣本與抗體比例過高或過低，因為樣本與抗體比例過高，將 導致反應體系中抗原過多，降低試劑的抗原過剩范圍甚至線性范圍；過低時，將導致反應體 系中抗原量太少，試劑靈敏度無法滿足臨床使用。

所述試劑盒是基于膠乳免疫比濁法檢測人血液免疫球蛋白M，其線性范圍為 0.10g/L～12.00g/L，抗原過剩范圍達到180g/L。

具體地，所述兔抗人免疫球蛋白M多克隆抗體為Dako公司生產的兔抗人免疫球蛋 白M多克隆抗體，或為GeneTex公司生產的兔抗人免疫球蛋白M多克隆抗體。

另外，所述試劑盒適用于具有自動樣本稀釋功能的全自動分析儀器，如迪瑞、邁 瑞、Roche、Hitachi、Olympus等多種全自動生化分析儀。

本發明具有以下優點及有益效果：

1、使用本發明的試劑盒對人尿液中的血液免疫球蛋白M進行測定，因線性范圍較 進口試劑提高2倍，使用時大幅度減少了需要人工稀釋復測的樣本數量，大幅度節約了人力 和試劑，極大地提高了檢測效率，并節約了成本。

2、本發明的試劑盒抗原過剩范圍廣，有效避免了臨床結果被低估甚至假陰性結果 的出現，測定結果可靠性相比進口試劑更高。