[發明專利]使用工程化的解酯耶氏酵母生產高蛋白秸稈飼料的方法

有效

• 申請號: 201610227696.0
• 申請日: 2016-04-13
• 公開（公告）號: CN105795120B
• 公開（公告）日: 2017-07-07
• 發明（設計）人: 宋慧婷;江正兵;劉詩慧;高媛;馬向東;李蓉;李諾楠
• 申請（專利權）人: 湖北大學
• 主分類號: A23K10/30
• 分類號: A23K10/30;A23K10/35;A23K10/37;A23K10/18
• 代理公司: 北京輕創知識產權代理有限公司11212
• 代理人: 楊立

1.一種使用工程化的解酯耶氏酵母生產飼料成分的方法，其特征在于，使用分別轉入了密碼子優化的β-葡萄糖苷酶編碼基因、密碼子優化的外切葡聚糖酶編碼基因和密碼子優化的內切葡聚糖酶編碼基因的三種工程化的解酯耶氏酵母的混合物對秸稈與氯化銨的混合物發酵來生產所述飼料成分，其中，所述密碼子優化的β-葡萄糖苷酶編碼基因序列如SEQ ID NO:1所示，所述密碼子優化的外切葡聚糖酶編碼基因序列如SEQ ID NO:2所示，并且所述密碼子優化的內切葡聚糖酶編碼基因序列如SEQ ID NO:3所示，所述方法包括以下步驟：

1)將秸稈與氯化銨以10:1-50:1的重量比配制成培養基，滅菌；

2)將所述三種工程化的解酯耶氏酵母接種于YPD液體培養基中培養，將培養得到的三種工程化的解酯耶氏酵母培養物等體積混合，離心收集菌體，用pH 5.0的磷酸緩沖液重懸，所述磷酸緩沖液的量為6mL/g秸稈；

3)將步驟2)得到的重懸的工程化的解酯耶氏酵母接種于步驟1)得到的秸稈與氯化銨的混合培養基中進行發酵10-15天，得到發酵產物。

2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述秸稈為小麥、水稻、玉米、薯類、油菜、棉花、甘蔗、高粱的秸稈中的一種或幾種的組合。

3.根據權利要求2所述的方法，其特征在于，步驟3)中的發酵條件為23-28℃恒溫，有氧條件。

4.一種高蛋白含量的飼料，其特征在于，包含通過權利要求1-3中任一項所述的方法得到發酵產物。