[發(fā)明專利]小鼠骨髓雜交瘤細(xì)胞株、及其產(chǎn)生的單克隆抗體和應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201610221551.X
• 申請(qǐng)日: 2016-04-11
• 公開（公告）號(hào): CN105695420B
• 公開（公告）日: 2019-11-12
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 田克恭;郝麗影
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 洛陽普泰生物技術(shù)有限公司
• 主分類號(hào): C12N5/20
• 分類號(hào): C12N5/20;C07K16/10;A61K39/42;A61P31/14;G01N33/577;G01N33/569;G01N33/558;C12R1/91
• 代理公司: 北京華夏正合知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 11017
• 代理人: 韓登營

本發(fā)明提供了兩株小鼠骨髓雜交瘤細(xì)胞株及其產(chǎn)生的單克隆抗體和應(yīng)用，所述小鼠骨髓雜交瘤細(xì)胞株分別分泌的抗犬瘟熱病毒單克隆抗體6E11、1G5，以及制備的含單克隆抗體6E11、1G5的檢測試劑盒和藥物組合物、及兩者的應(yīng)用，屬于生物技術(shù)領(lǐng)域。使用含單克隆抗體6E11和1G5制備的的犬瘟熱病毒抗原檢測試劑盒靈敏度高，并且操作簡便、快速、省時(shí)，或提高了CDV感染的檢出率，便于大規(guī)模篩查方面時(shí)應(yīng)用，適合基層或現(xiàn)場快速檢測。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及犬瘟熱病毒小鼠骨髓雜交瘤細(xì)胞株、其產(chǎn)生的單克隆抗體，含單克隆抗體的檢測試劑盒和應(yīng)用，屬于生物技術(shù)領(lǐng)域。

背景技術(shù)

犬瘟熱病毒(Canine distemper virus,CDV)屬于副黏病毒科麻疹病毒屬，病毒核酸為單股RNA，病毒粒子呈圓形或不整形，有時(shí)呈長絲狀。CDV對(duì)熱和干燥敏感，在50-60℃溫度下30分鐘即可滅活，在炎熱季節(jié)CDV在犬群中不能長期存活。在較冷的溫度下，CDV可存活較長時(shí)間,在2-4℃可存活數(shù)周，在-60℃可存活超過7年。

犬瘟熱病是由犬瘟熱病毒引起的，屬于犬科、浣熊科和鼬科動(dòng)物的一種急性、高度接觸性傳染病，以雙相熱型發(fā)熱、結(jié)膜炎、上呼吸道與肺及胃腸道卡他性炎癥、皮炎、神經(jīng)炎和足墊硬化為特征。染病犬的死亡率高達(dá)30％-80％，嚴(yán)重影響犬及其它易感染動(dòng)物的健康，造成大批犬死亡，并可引起患病動(dòng)物的嚴(yán)重后遺癥，造成了嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。

目前，國內(nèi)外犬瘟熱病毒檢測方法包括電鏡觀察、親和素-生物素-復(fù)合物法(ABC)、免疫熒光法(IFA)、聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)法(PCR)，檢測時(shí)需要昂貴的儀器設(shè)備和專業(yè)的技術(shù)人員，從而限制了其在大規(guī)模篩查方面的應(yīng)用，使得這些方法偏向于實(shí)驗(yàn)室診斷，不適合基層或現(xiàn)場快速檢測。基于此，亟需發(fā)展一種快速、簡便、靈敏度高的檢測方法。

發(fā)明內(nèi)容

為解決現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明提供了犬瘟熱病毒小鼠骨髓雜交瘤細(xì)胞株，其分泌的抗犬瘟熱病毒單克隆抗體，可以有效地診斷、預(yù)防和/或治療犬瘟熱病毒所引發(fā)的感染；含所述抗犬瘟熱病毒單克隆抗體的檢測試劑盒，可快速、簡便、準(zhǔn)確地檢測犬瘟熱病毒抗原。

本發(fā)明涉及一種小鼠骨髓雜交瘤細(xì)胞6E11株(Hybridoma-Balb/c mouse spleencells and Sp2/0,strain 6E11)，保藏號(hào)為CCTCC No：C2015202，保藏于中國典型培養(yǎng)物保藏中心，保藏地址為中國武漢·武漢大學(xué)，保藏時(shí)間為2015年11月25日。

本發(fā)明涉及一種單克隆抗體，所述單克隆抗體重鏈可變區(qū)氨基酸序列為SEQ IDNo.2所示的氨基酸序列或該序列經(jīng)過一個(gè)或多個(gè)氨基酸添加、刪除、替換或修飾保守性突變獲得的保守性變異體；所述單克隆抗體輕鏈可變區(qū)氨基酸序列為SEQ ID No.4所示的氨基酸序列或該序列經(jīng)過一個(gè)或多個(gè)氨基酸添加、刪除、替換或修飾保守性突變獲得的保守性變異體。

本發(fā)明涉及一種小鼠骨髓雜交瘤細(xì)胞1G5株(Hybridoma-Balb/c mouse spleencells and Sp2/0,strain 1G5)，保藏號(hào)為CCTCC No：C2015201，保藏于中國典型培養(yǎng)物保藏中心，保藏地址為中國武漢·武漢大學(xué)，保藏時(shí)間為2015年11月25日。

本發(fā)明涉及一種單克隆抗體，所述單克隆抗體重鏈可變區(qū)氨基酸序列為SEQ IDNo.6所示的氨基酸序列或該序列經(jīng)過一個(gè)或多個(gè)氨基酸添加、刪除、替換或修飾保守性突變獲得的保守性變異體；所述單克隆抗體輕鏈可變區(qū)氨基酸序列為SEQ ID No.8所示的氨基酸序列或該序列經(jīng)過一個(gè)或多個(gè)氨基酸添加、刪除、替換或修飾保守性突變獲得的保守性變異體。

本發(fā)明涉及一種抗犬瘟熱病毒藥物組合物，其中，所述藥物組合物包含免疫量的本發(fā)明的所述單克隆抗體或其可變區(qū)氨基酸序列制備的單鏈抗體，以及藥學(xué)上可接受的載體。