[發明專利]一種聯用SERS基底檢測食品中激素的應用方法

有效

• 申請號: 201610220725.0
• 申請日: 2016-04-12
• 公開（公告）號: CN107290324B
• 公開（公告）日: 2020-09-08
• 發明（設計）人: 王升啟;李萍;肖瑞;汪崇文;李敏;榮振
• 申請（專利權）人: 中國人民解放軍軍事科學院軍事醫學研究院
• 主分類號: G01N21/65
• 分類號: G01N21/65
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發明公開了一種聯用SERS基底檢測食品中激素的應用方法，該檢測方法步驟如下：首先制備正己硫醇修飾的磁性納米銀花；其次以乙烯雌酚為實驗對象，對Fe₃O₄@SiO₂?Ag?C6+棒銀聯用SERS基底進行均一性、重復性和穩定性的考察研究；將2種激素分別用甲醇水和牛奶稀釋至不同濃度，用SPE固相萃取柱進行純化富集；洗脫液分別加入SERS基底，干燥后點上棒銀，進行拉曼光譜檢測，確定最低檢測限。加標回收率在88.72％～110.04％，具有較高的回收率，完全可以滿足對食品中激素殘留分析的要求。本發明還公開了由上述方法制備的Fe₃O₄@SiO₂?Ag?C6+棒銀的聯用SERS基底，其具有大量熱點，可彌補C6吸附在銀殼表面帶來的拉曼信號的損失。

技術領域

本發明涉及本發明涉及聯用SERS基底的SERS信號的均一性、重復性和穩定性研究，具體涉及一種聯用SERS基底檢測食品中激素的應用方法，屬于光子材料、納米材料、食品安全檢測領域。

背景技術

激素在自然界中分布廣泛，是一類具有相似化學結構的類固醇激素，分為內源性雌激素和外源性雌激素，其一端含有一個羧基的長的脂肪族碳氫鏈，可直接影響到動物的代謝與繁殖。激素進入機體后長期蓄積，半衰期長，難以生物降解，導致激素殘留問題日益嚴重。人類攝入激素的途徑很多，其中乳制品是主要來源，我國兒童和青少年是乳品與乳制品的主要消耗人群，由于現在奶牛的品種多為經基因改良的高產品種以及在飼料中提高了高蛋白飼料的比例，導致所產牛奶中的激素水平有較大程度地上升，從而造成“奶粉致性早熟事件”的發生。

由于SERS具有較高的靈敏度和良好的選擇性，在食品安全檢測中的應用愈來愈廣泛。我們選擇Fe3O4@SiO2-Ag-C6+棒銀聯用SERS基底，使聯用基底既可以富集溶液中激素分子，同時又彌補C6吸附在銀殼表面所帶來的拉曼信號的損失。考查了聯用SERS基底的均一性、穩定性和重復性。實現了聯用SERS基底對溶液和實際牛奶中激素的定性和定量檢測。

發明內容

本發明的目的是將制備的正己硫醇修飾磁性納米銀花與棒銀進行聯用，考察聯用SERS基底的均一性、重復性和穩定性，基于該聯用SERS基底對食品中激素殘留問題展開一系列的應用研究。

一種聯用SERS基底檢測食品中激素的應用方法，包括以下步驟：

1)制備本實驗室自主合成的正己硫醇修飾的磁性納米銀花(Fe3O4@SiO2-Ag-C6)；

2)用步驟1)制備好的Fe3O4@SiO2-Ag-C6SERS基底用乙醇洗三次，保存于乙醇溶液中待用；

3)以10^-6M的乙烯雌酚為實驗對象，對步驟2)獲得的Fe3O4@SiO2-Ag-C6SERS基底+棒銀SERS基底(本實驗室自主合成)聯用進行SERS信號的均一性、重復性和穩定性的考察研究；

4)2種激素溶液樣品制備：將乙烯雌酚和17 β-雌二醇分別配制成1mg/ml的標準儲備液。隨后，采用10倍稀釋的方法制備濃度范圍從10^-5M～10^-13M的激素溶液，待用。

5)2種牛奶激素樣品制備：將步驟4)配制好的標準儲備液，加入牛奶依次10倍稀釋成10^-3～10^-10M的加標牛奶，用SPE固相萃取法進行純化富集，將洗脫液濃縮后待用；

6)將Fe3O4@SiO2-Ag-C6分別加入步驟4)和步驟5)制備好的樣品中，室溫下自然干燥后，點上棒銀，干燥后利用便攜式拉曼光譜儀對樣品進行檢測。

7)根據牛奶中激素的拉曼峰強度計算樣品回收率。