[發(fā)明專利]番茄頸腐根腐病分子標(biāo)記及其標(biāo)記方法與應(yīng)用

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201610219002.9
• 申請(qǐng)日: 2016-04-08
• 公開（公告）號(hào): CN105755133A
• 公開（公告）日: 2016-07-13
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 張生;程琳;國家進(jìn);陳福東;張曉燕;董甜;劉岳;李曉杰;王如芳;董靜;于彩玉
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 山東壽光蔬菜種業(yè)集團(tuán)有限公司;山東省壽光蔬菜產(chǎn)業(yè)集團(tuán)有限公司
• 主分類號(hào): C12Q1/68
• 分類號(hào): C12Q1/68;C12N15/11
• 代理公司: 濰坊正信專利事務(wù)所 37216
• 代理人: 石譽(yù)虎

1.番茄頸腐根腐病分子標(biāo)記，其特征在于：所述分子標(biāo)記的引物序列包含以下序列：SEQIDNO:1:

上游引物A1為5’–TAAAGGACCATTTTTCGTAGACCATT-3’，

下游引物A2為5’–TAGCATGAAGTACAAAATGGATATAG-3’；

SEQIDNO:2:

上游引物B1為5’–TTTGGTTTCTTCAGCGGTGCTGGCA-3’，

下游引物B2為5’–TATCACACTTTTATCCCATTTTTTCG-3’。

2.如權(quán)利要求1所述的番茄頸腐根腐病分子標(biāo)記，其特征在于：所述引物序列為：SEQIDNO:1:

上游引物A1為5’–TAAAGGACCATTTTTCGTAGACCATT-3’，

下游引物A2為5’–TAGCATGAAGTACAAAATGGATATAG-3’；

SEQIDNO:2:

上游引物B1為5’–TTTGGTTTCTTCAGCGGTGCTGGCA-3’，

下游引物B2為5’–TATCACACTTTTATCCCATTTTTTCG-3’。

3.番茄頸腐根腐病分子標(biāo)記方法，其特征在于：

a.CTAB法提取番茄全基因組DNA；

b.利用權(quán)利要求2所述的引物A1、引物A2、引物B1和引物B2以全基因組DNA為模板進(jìn)行PCR擴(kuò)增；

c.電泳檢測(cè)：PCR產(chǎn)物用2％的瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)，可獲得732bp的抗病特異片段或/和535bp的感病特異片段，以此判斷植株的抗病性。

4.如權(quán)利要求3所述的番茄頸腐根腐病分子標(biāo)記方法，其特征在于：所述PCR擴(kuò)增程序?yàn)椋?4℃預(yù)變性5min；94℃變性30s，60℃退火30s，72℃延伸60s，32個(gè)循環(huán)；72℃延伸10min。

5.番茄頸腐根腐病分子標(biāo)記的應(yīng)用，其特征在于：所述分子標(biāo)記在番茄頸腐根腐病抗病番茄品種選育中的應(yīng)用。