[發明專利]一種仙茅人工種子的制作方法

有效

• 申請號: 201610217475.5
• 申請日: 2016-04-11
• 公開（公告）號: CN105850736B
• 公開（公告）日: 2017-11-10
• 發明（設計）人: 何鋼;張虹;劉賢桂;榮廣天;劉杰;朱麗芳;葉生寶
• 申請（專利權）人: 中南林業科技大學
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 長沙市融智專利事務所43114
• 代理人: 劉擎天

技術領域

本發明屬于人工種子制備領域，具體涉及一種仙茅人工種子的制作方法。

技術背景

仙茅(Curculigo orchioides Gaertn.)為仙茅科仙茅屬植物，是一種極其珍貴的藥用植物。通過文獻查考，認為仙茅最早記載于一千多年前的《海藥本草》，古今用藥種類基本一致。以仙茅的干燥根莖入藥，其功效在中醫古籍中多為補腎壯陽為主，近年研究發現其功效還包括壯筋骨、抗炎癥、抗氧化、耐缺氧、耐高溫等。

仙茅自然繁殖率低，加之長期無節制采挖，其野生資源日益減少；傳統的繁殖方式如分株、扦插等繁殖率也較低；組織培養技術能在一定程度上解決快速繁殖的難題，但是依然存在轉接次數多、生產周期長、成本高、移栽成活率低等問題。人工種子是將離體產生的體細胞胚或其它繁殖體包埋在能提供養分的膠囊里，又在膠囊外包上具有保護功能的外膜，形成類似于種子的結構。1978年，美國科學家Murashige在國際園藝植物學術會議首次提出了人工種子的概念。它是在植物離體培養技術基礎上發展來的一門新興技術，是細胞工程中最年輕的一項技術。人工種子可以不受季節、環境各方面天然條件的限制，來進行大規模大批量高效制作生產，使得農業生產的擇時播種成為可能。

發明內容

本發明的目的在于提供一種萌發率高、成苗率高的仙茅人工種子的制作方法，通過本發明可大規模批量生產仙茅種子，為解決仙茅資源緊張問題提供技術支持。

本發明采用的具體技術方案如下:一種仙茅人工種子的制作方法,包括仙茅愈傷組織的誘導、仙茅不定芽的誘導、仙茅不定芽的篩選以及仙茅不定芽的包埋和人工種子的制備步驟，仙茅不定芽的包埋和人工種子的制備過程中，仙茅不定芽在包埋液中反應后再與質量濃度為2％的CaCl₂溶液反應，上述反應重復一次；

其中，所述的包埋液是以1/2MS+0.8mg/L NAA+0.05mg/L6-BA+3％蔗糖+3mg/L多菌靈為人工胚乳，在其中加入4％海藻酸鈉熬制而成。

本發明進一步包括以下優選方案：

優選的方案中，仙茅不定芽的包埋和人工種子的制備過程為：將不定芽加入滅菌過的包埋液中，攪拌充分混合，3分鐘后，將含有不定芽的包埋液滴入到質量濃度為2％的CaCl₂溶液中，反應5分鐘，形成透明有彈性的人工種子，將制作的人工種子再放入人工胚乳中，攪拌充分混合，3分鐘后，用玻璃棒將含有不定芽的包埋液，撥入到質量濃度為2％的CaCl₂溶液中，反應10分鐘。

優選的方案中，含有不定芽的包埋液滴入到質量濃度為2％的CaCl₂溶液的過程中，用內徑為3mm的吸管吸取包含有不定芽的包埋液。

仙茅愈傷組織的誘導過程中，切取長為4-6mm的仙茅幼葉，接種到MS+1.5mg/LKT+0.05mg/L2,4-D+3.0％蔗糖+0.7％瓊脂+3mg/L多菌靈+8mg/L檸檬酸培養基中進行仙茅愈傷誘導培養。

優選的方案中，仙茅不定芽的誘導過程中，把得到的愈傷組織轉移到MS+3.0％蔗糖+0.7％瓊脂+3mg/L多菌靈分化培養基中，進行不定芽的誘導。

優選的方案中，仙茅不定芽的選擇過程中，選出長度為2-3mm的不定芽。

優選的方案中，仙茅愈傷組織的誘導過程中，培養溫度25±1℃，光照強度1100-1200lx，光照時間10-12h。

優選的方案中，仙茅不定芽的誘導過程中，培養溫度25±1℃，光照強度1100-1200lx，光照時間12-14h。

優選的方案中，種子發芽時：培養溫度26±1℃，光照強度1100-1200lx，黑暗處理3-5天，發芽后光照時間為12-14h。

本發明通過人工的方法制備種子可以代替天然種子，可不受季節限制，大規模大批量高效生產人工種子，可實現擇時播種，為仙茅資源開發提供技術保證。

本發明的萌發率高、成苗率高。

本發明的仙茅種子發芽生根率高、染菌率低、失水率低。

本發明得到的種子顆粒均勻，軟硬適中，呈球形，透明有彈性。

附圖說明

圖1為本發明仙茅幼葉誘導出的愈傷組織的照片。

圖2為本發明仙茅愈傷組織誘導出的不定芽的照片。

圖3為本發明仙茅不定芽包裹一層包埋液制作的人工種子的照片。

圖4為本發明仙茅不定芽包裹兩層包埋液制作的人工種子的照片。

圖5為仙茅人工種子發芽初期的照片。