[發明專利]一種甘薯爪哇黑腐病抗性鑒定方法

有效

• 申請號: 201610208075.8
• 申請日: 2016-04-01
• 公開（公告）號: CN105648028B
• 公開（公告）日: 2020-02-14
• 發明（設計）人: 黃立飛;房伯平;葉芍君;陳景益;黃實輝;張雄堅;羅忠霞;王章英;姚祝芳;陳新亮
• 申請（專利權）人: 廣東省農業科學院作物研究所
• 主分類號: C12Q1/02
• 分類號: C12Q1/02
• 代理公司: 44288 廣州市越秀區哲力專利商標事務所(普通合伙)
• 代理人: 譚啟斌

本發明提供一種甘薯爪哇黑腐病抗性鑒定方法，包括以下步驟：1)病原菌活化培養；2)待鑒定甘薯材料準備，使甘薯材料露出0.5?2cm²創面；3)接種培養：從PDA培養基平板邊緣取含有菌絲體的菌塊，分別將長有菌絲體的一面貼附于待鑒定甘薯材料和對照品種的創面，進行培養；4)等級鑒定：接種培養5?10天后，觀察待鑒定甘薯材料病害情況并測量薯塊病斑直徑，進行發病嚴重度分級，再根據平均發病嚴重度進行抗性評價。本發明提供了一種操作簡單、接種后發病周期短、發病過程穩定的甘薯爪哇黑腐病抗性鑒定評價方法。

技術領域

本發明涉及植物保護領域，具體涉及一種甘薯爪哇黑腐病抗性鑒定方法。

背景技術

甘薯爪哇黑腐病(Java black rot of sweetpotato)是由可可毛色二孢(Lasiodiplodia theobromae)引起的一種重要甘薯儲藏性病害。該病害是美國南部以及夏威夷州重要的毀滅性儲藏病害，據報道在上世紀八十年代曾在我國南方局部地區發生，近年來逐漸成為南方地區危害最重的甘薯儲藏性病害之一。該病害多從甘薯的薯蒂和薯尾以及傷口侵入，特別是搬運過程中薯皮損傷極易導致病菌侵入，形成棕褐色病斑或者整個甘薯薯塊腐爛失水干縮，在廣州個別倉庫發病率可達50％以上，可造成了巨大的經濟損失。

培育和利用抗甘薯爪哇黑腐病的新品種或材料是防治和控制該病最經濟環境友好的措施。因此，建立一種操作簡單、快速準確的甘薯爪哇黑腐病抗性鑒定評價方法十分必要。

迄今，在我國目前沒有甘薯爪哇黑腐病抗性鑒定評價方法，發明人曾嘗試利用甘薯爪哇黑腐病菌分生孢子和菌絲塊對甘薯薯塊進行接種，發現采用分生孢子和菌絲塊均不能使無創傷薯塊致病，而利用分生孢子接種有創傷的薯塊，發病不穩定，培養分生孢子需要時間較長，試驗操作較為復雜，不適合用于該病的抗性鑒定評價。最終，建立了一種操作簡單、發病迅速、效果穩定的適于甘薯爪哇黑腐病抗性鑒定評價方法。

發明內容

為了克服現有技術的不足，本發明的目的在于提供一種效果穩定的甘薯爪哇黑腐病抗性鑒定方法。

為解決上述問題，本發明所采用的技術方案如下：

本發明提供一種甘薯爪哇黑腐病抗性鑒定方法，包括以下步驟：

1)病原菌活化培養：將甘薯爪哇黑腐病菌接種至PDA培養基平板，活化培養，PDA培養基平板上生長出菌絲體；

2)待鑒定甘薯材料準備：取待鑒定甘薯材料和對照品種，清洗晾干，削薯皮使待鑒定甘薯材料和對照品種均露出0.5-2cm²創面；

3)接種培養：分別從PDA培養基平板邊緣取含有菌絲體的菌塊，將長有菌絲體的一面貼附于待鑒定甘薯材料和對照品種的創面，進行培養；

4)等級鑒定：接種培養5-10天后，將待鑒定甘薯材料和對照品種取出，觀察病害情況并測量薯塊病斑直徑，進行發病嚴重度分級，然后計算每個待鑒定甘薯材料和對照品種的平均發病嚴重度，根據平均發病嚴重度進行抗性評價。

作為優選，步驟1)中，病原菌活化培養的具體操作方法如下：將甘薯爪哇黑腐病菌接種至PDA培養基平板，活化培養2天，用打孔器從PDA培養基平板的邊緣取含有菌絲體的菌塊，將所述菌塊置于另一新的PDA培養基平板的中央，繼續活化培養2天。

作為優選，所述活化培養的具體操作步驟：將PDA培養基平板置于25±3℃培養。

作為優選，步驟2)中，所述對照品種為廣薯79。

作為優選，步驟3)中，所述培養步驟的具體參數如下：培養溫度為25±3℃，培養濕度為85-98％。

作為優選，步驟4)中，發病嚴重度分級標準如下：

1級:薯塊正常無任何病癥，或者薯塊病斑直徑≤1cm；