[發(fā)明專利]β-半乳糖苷酶突變體及其相關(guān)生物材料與應(yīng)用在審
| 申請?zhí)枺?/td> | 201610202871.0 | 申請日： | 2016-04-01 |
| 公開（公告）號： | CN105754969A | 公開（公告）日： | 2016-07-13 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 李相陽;陳湘寧;張紅星 | 申請（專利權(quán)）人： | 北京農(nóng)學(xué)院 |
| 主分類號： | C12N9/38 | 分類號： | C12N9/38;C12N15/56;C12P19/14;C12P19/02 |
| 代理公司： | 北京紀(jì)凱知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11245 | 代理人： | 關(guān)暢;張如佳 |
| 地址： | 102206 北京市*** | 國省代碼： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 半乳糖 突變體 及其 相關(guān) 生物 材料 應(yīng)用 | ||
技術(shù)領(lǐng)域
本發(fā)明涉及生物技術(shù)領(lǐng)域中的一種β-半乳糖苷酶突變體及其相關(guān)生物材料與應(yīng)用。
背景技術(shù)
β-半乳糖苷酶(β-galactosidase)通常被稱為乳糖酶，各種動植物和微生物中廣泛存在。這種酶能把乳糖水解成葡萄糖和半乳糖，同時也具有半乳糖苷的轉(zhuǎn)移作用。牛奶和乳清中的主要成分就是乳糖，其大約占牛奶干物質(zhì)的30％，但溶解度低，在20℃水中溶解度僅為20％，而其甜度僅及蔗糖的16％，久存的乳制品由于乳糖析出，呈砂樣感覺，影響風(fēng)味。此外，許多成人，特別是嬰兒(因人種而異，西歐占2-8％，亞洲、非洲占60-90％)體內(nèi)缺乏乳糖酶，因此他們很難消化牛奶，飲用牛奶后，乳糖到了腸里，被腸道細(xì)菌分解發(fā)酵，產(chǎn)生大量二氧化碳?xì)怏w，使腸道膨脹，并刺激腸道蠕動，使收縮加強(qiáng)，造成腸鳴和腹瀉，這種疾病稱作乳糖不耐受癥。
乳糖酶最初是利用其水解乳糖的特性降低乳制品中的乳糖含量，后來主要用來治療乳糖不耐受癥、處理加工牛乳、乳清等，以及生產(chǎn)低乳糖牛奶和低乳糖乳制品及減少環(huán)境污染等。除此之外，在軟飲料、三明治和紡織品上漿中水解乳清或乳糖都起著非常重要的作用。由此可見，乳糖酶無論是在工業(yè)生產(chǎn)還是在食品行業(yè)都有著廣泛的應(yīng)用前景。然而，市場上銷售的乳糖酶主要通過酵母系統(tǒng)表達(dá)獲得，由于耐熱性差，適用范圍窄，無法滿足食品行業(yè)的各種需求。
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是如何提高β-半乳糖苷酶的耐熱性。
為了解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明首先提供了一種β-半乳糖苷酶突變體，其名稱為β-Gal-2，該酶，在40℃～60℃范圍內(nèi)均具有較高的酶活力。
本發(fā)明所提供的β-Gal-2，為如下A1)或A2)：
A1)氨基酸序列如SEQIDNo.1所示的蛋白質(zhì)；
A2)在A1)的蛋白質(zhì)的氨基酸序列中經(jīng)過取代和/或缺失和/或添加一個或幾個氨基酸殘基得到具有β-Gal-2活性的蛋白質(zhì)。
其中，SEQIDNo.1所示的蛋白質(zhì)由1026個氨基酸殘基組成。
為了使A1)中的蛋白質(zhì)便于純化，可在序列表中SEQIDNo.1所示的氨基酸序列的氨基末端或羧基末端連接上如表1所示的標(biāo)簽。
表1標(biāo)簽的序列
上述A2)中的蛋白質(zhì)，所述一個或幾個氨基酸殘基的取代和/或缺失和/或添加為不超過10個氨基酸殘基的取代和/或缺失和/或添加。
上述(A2)中的蛋白質(zhì)可先合成其編碼基因，再進(jìn)行生物表達(dá)得到。
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