[發明專利]一種DC-CIK細胞培養試劑及其培養方法

有效

• 申請號: 201610197485.7
• 申請日: 2016-03-31
• 公開（公告）號: CN105602902A
• 公開（公告）日: 2016-05-25
• 發明（設計）人: 谷超
• 申請（專利權）人: 谷超
• 主分類號: C12N5/0784
• 分類號: C12N5/0784;C12N5/0783
• 代理公司: 長沙星耀專利事務所 43205
• 代理人: 許伯嚴

1.一種DC-CIK細胞培養試劑，其特征在于：包括DC細胞培養試劑、CIK細胞培養試 劑和共培養試劑；所述DC細胞培養試劑包括DC細胞培養試劑A和DC細胞培養試劑B， DC細胞培養試劑A包含GM-SCF和IL-4，DC細胞培養試劑B包含GM-SCF、IL-4、TNF-α 和MDC；所述CIK細胞培養試劑包括CIK細胞培養試劑A和CIK細胞培養試劑B，CIK細 胞培養試劑A包含INF-γ，CIK細胞培養試劑B包含OKT-3、IL-1α和IL-2；所述共培養試劑 包含化合物CephaloziellinN和IL-2。

2.根據權利要求1所述的DC-CIK細胞培養試劑，其特征在于：還包括含有血漿的無血 清培養基。

3.根據權利要求2所述的DC-CIK細胞培養試劑，其特征在于：所述無血清培養基中血 漿的體積百分含量為5％～15％。

4.根據權利要求1所述的DC-CIK細胞培養試劑，其特征在于：所述DC細胞培養試劑 A中，GM-SCF的濃度為100～500U/mL，IL-4的濃度為100～500U/mL。

5.根據權利要求1所述的DC-CIK細胞培養試劑，其特征在于：所述DC細胞培養試劑 B中，GM-SCF的濃度為100～300U/mL，IL-4的濃度為200～400U/mL，TNF-α的濃度為 300～500U/mL，MDC的濃度為5～15ng/mL。

6.根據權利要求1所述的DC-CIK細胞培養試劑，其特征在于：所述CIK細胞培養試劑 A中，INF-γ的濃度為500～900U/mL。

7.根據權利要求1所述的DC-CIK細胞培養試劑，其特征在于：所述CIK細胞培養試劑 B中，OKT-3的濃度為60～100ng/mL、IL-1α的濃度為100～200U/mL，IL-2的濃度為 600～800U/mL。

8.根據權利要求1所述的DC-CIK細胞培養試劑，其特征在于：所述共培養試劑中，IL-2 的濃度為100～500U/mL。

9.根據權利要求1所述的DC-CIK細胞培養試劑，其特征在于：所述共培養試劑中，化 合物CephaloziellinN的濃度為20～40μg/mL。

10.一種利用權利要求1～9任一所述DC-CIK細胞培養試劑培養DC-CIK細胞的方法，其 特征在于，包括如下步驟：

步驟S1，將單個核細胞進行細胞培養，獲得貼壁細胞和懸浮細胞；

步驟S2，采用DC細胞培養試劑A培養所述貼壁細胞，培養4～6天后，采用DC細胞培 養試劑B培養24～48h，得到DC細胞；采用CIK細胞培養試劑A培養所述懸浮細胞，培養 1～3天后，采用CIK細胞培養試劑B繼續培養7～8天，繼續培養過程中每隔3天補加IL-2， 獲得CIK細胞；

步驟S3，將步驟S2中的DC細胞和CIK細胞混合，采用所述共培養試劑培養5～8天， 得到DC-CIK細胞。