[發(fā)明專利]電感耦合等離子體質(zhì)譜法測(cè)定人體全血中微量元素的方法

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201610197111.5
• 申請(qǐng)日: 2016-03-31
• 公開（公告）號(hào): CN105784831A
• 公開（公告）日: 2016-07-20
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 程雅婷;文國(guó)學(xué);陳靜宜;陳文彬;李超
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 廣州市圣鑫生物科技有限公司
• 主分類號(hào): G01N27/64
• 分類號(hào): G01N27/64;G01N1/38
• 代理公司: 北京精金石專利代理事務(wù)所(普通合伙) 11470
• 代理人: 劉曄

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于生物檢測(cè)技術(shù)領(lǐng)域，涉及電感耦合等離子體質(zhì)譜法測(cè)定人體全血中微量元素的方法。

背景技術(shù)

人體微量元素特別是血液中微量元素含量的變化與人體生理病理狀況有著直接的聯(lián)系。全血微量元素鎂、錳、鈣、鐵、銅和鋅是形成酶、激素、維生素等大生物分子的重要成分，在人體發(fā)揮重要的生理生化功能，且其能影響人體免疫系統(tǒng)，與多種疾病的發(fā)生有因果聯(lián)系，如鈣缺乏可引起軟骨瘤、骨質(zhì)疏松和佝僂病等，而鈣攝入過量會(huì)抑制鋅的吸收，易引發(fā)膽結(jié)石等病癥；鐵為血紅蛋白的重要組成之一，鐵缺乏易導(dǎo)致缺鐵性貧血；肝癌、糖尿病、妊娠和有異常分娩史患者體內(nèi)錳元素含量降低，而急性肝炎患者、壞死性肝硬化、心梗、錳中毒病人、腫瘤患者可見體內(nèi)錳元素含量輕度或中度增高。環(huán)境和生活方式中的金屬污染可通過各種途徑在體內(nèi)代謝和蓄積，從而影響人的身體健康，而鉛是生活中較為常見的一種。全血微量元素鉛毒性可累及神經(jīng)、血液、造血、消化、心血管和泌尿系統(tǒng)，對(duì)兒童智能產(chǎn)生不可逆的影響。

全血中微量元素鎂、錳、鈣、鐵、銅、鋅和鉛含量的檢測(cè)可以反映元素在人體內(nèi)的濃度，可作為健康保健、輔助診斷元素缺乏或中毒性病癥和觀察療效的可靠依據(jù)。目前，全血中微量各種元素含量測(cè)定的方法有原子吸收光譜法(AAS)、原子熒光光譜法(AFS)和電感耦合等離子體發(fā)射光譜法(ICP-AES)等。AAS和AFS由于分析周期長(zhǎng)，一次只能檢測(cè)一種元素，效率低，準(zhǔn)確性和線性范圍不能涵蓋所有的臨床元素濃度和易受到機(jī)體干擾的影響等原因，限制了其在臨床上的應(yīng)用；而ICP-AES可同時(shí)測(cè)定許多元素，操作方便，成本低，穩(wěn)定性好，是臨床上常用的檢測(cè)方法，但其測(cè)定過程中需要使用相應(yīng)的基體改進(jìn)劑，樣品前處理過程繁瑣，同時(shí)其檢出限也無法滿足血中重金屬元素含量測(cè)定的要求。

電感耦合等離子體質(zhì)譜法(ICP-MS)檢測(cè)具備靈敏度高、線性范圍廣和可進(jìn)行多元素同時(shí)檢測(cè)、樣品需用量少等特點(diǎn)，適用于大批量樣品的測(cè)定，現(xiàn)已被廣泛用于地球科學(xué)、環(huán)境分析、食品科學(xué)、石油工業(yè)及冶金分析等領(lǐng)域。張素靜發(fā)表的名為“血液和尿液中34種元素檢測(cè)方法及其應(yīng)用研究”的論文公開了一種血液中34種元素ICP-MS檢測(cè)方法，其樣品前處理采用電熱板加熱消解法，試劑用量大，容易造成污染和易揮發(fā)組分的損失，且一次處理的樣品量少、用時(shí)長(zhǎng)。

因此，本領(lǐng)域技術(shù)人員迫切需要一種前處理簡(jiǎn)單、穩(wěn)定性好、檢測(cè)時(shí)間短、效率高、檢測(cè)精密度高、成本低廉的測(cè)定人體全血中微量元素的方法。

發(fā)明內(nèi)容

為了解決現(xiàn)有技術(shù)中存在的問題，本發(fā)明提供一種電感耦合等離子體質(zhì)譜法測(cè)定人體全血中微量元素的方法，可用于同時(shí)檢測(cè)人體全血中微量元素鎂、錳、鈣、鐵、銅、鋅和鉛的含量檢測(cè)。本發(fā)明提供的人體全血中微量元素檢測(cè)方法的樣品用量少，前處理簡(jiǎn)單，成本低廉，并且整個(gè)檢測(cè)過程時(shí)間短、效率高，檢測(cè)靈敏度和精密度高、檢測(cè)穩(wěn)定性好。

本發(fā)明的技術(shù)方案如下：

電感耦合等離子體質(zhì)譜法測(cè)定人體全血中微量元素的方法，包括如下步驟：

(1)全血樣品的前處理：取全血樣品，充分混勻后，使用硝酸和曲拉通的混合液作為稀釋液進(jìn)行稀釋，充分振勻，得樣品檢測(cè)液；

(2)對(duì)混合元素標(biāo)準(zhǔn)溶液和所述樣品待測(cè)液用電感耦合等離子體質(zhì)譜儀ICP-MS進(jìn)行檢測(cè)：用調(diào)諧液對(duì)電感耦合等離子體質(zhì)譜儀進(jìn)行儀器優(yōu)化后，采用全定量模式、譜圖掃描方式、同位素離子掃描方式，在線加入內(nèi)標(biāo)工作液，由ICP-MS依次對(duì)混合元素標(biāo)準(zhǔn)溶液和樣品待測(cè)液進(jìn)行定量檢測(cè)；；

其中，目標(biāo)定量離子包括待測(cè)元素同位素，其質(zhì)量數(shù)及條件包括：鎂質(zhì)量數(shù)為23或24；鈣質(zhì)量數(shù)為44；鐵質(zhì)量數(shù)為57或58；錳質(zhì)量數(shù)為55；銅質(zhì)量數(shù)為63或65；鋅質(zhì)量數(shù)為66或68；鉛質(zhì)量數(shù)為206、207和208；

其中，所述電感耦合等離子體質(zhì)譜儀工作參數(shù)包括：高頻發(fā)生器功率1550W；載氣流速1.0L/min；輔助氣流速1.0L/min；稀釋氣流速0.0L/min；補(bǔ)償氣流速1.0L/min；冷卻氣流速15.0L/min；霧化室溫度：2℃；蠕動(dòng)泵轉(zhuǎn)速：0.2r/s；采樣深度6-8mm；提升時(shí)間30s；積分時(shí)間0.1s；讀數(shù)時(shí)間8s；重復(fù)次數(shù)2次；

碰撞/反應(yīng)池條件包括：CellEntrance：-40V；CellExit：-60V；Deflect：0V；PlateBias：-60V；OctPRF：180V；OctPBias：-18V；QPBias：-15V；Gasflow(He)：4.0～5.0mL/min；