[發明專利]一種microRNA-129-5p的檢測試劑盒和檢測方法

在審

• 申請號: 201610192472.0
• 申請日: 2016-03-30
• 公開（公告）號: CN105647919A
• 公開（公告）日: 2016-06-08
• 發明（設計）人: 羅鳳鳴
• 申請（專利權）人: 四川大學華西醫院
• 主分類號: C12N15/11
• 分類號: C12N15/11;C12Q1/68
• 代理公司: 成都高遠知識產權代理事務所(普通合伙) 51222
• 代理人: 李高峽;張娟

技術領域

本發明涉及一種microRNA的檢測技術，特別是microRNA-129-5p的檢測試劑盒和 檢測方法。

背景技術

腫瘤的診斷主要依靠病理學、影像學及血清學證據，而目前常用的腫瘤標志物在 敏感度、特異性、費用方面存在一些不足，而近年來學者們對miRNA的深入研究為腫瘤診斷 提供了新的切入點。研究發現，microRNA-129-5p的表達水平與腫瘤相關，可用于腫瘤的診 斷。

然而，目前通過PCR檢測microRNA-129-5p的表達水平的方法存在擴增效率低、出 現非特異性產物幾率較高等問題，大大影響結果的真實性和可靠性。

發明內容

為了解決上述問題，本發明提供了一種新的microRNA-129-5p的檢測試劑盒和檢 測方法。

本發明提供了SEQIDNO：1～3所示的引物。

本發明還提供了SEQIDNO：1～2所示的引物在制備檢測microRNA-129-5p的試劑 中的用途。

所述試劑還包括SEQIDNO：3所示引物。

本發明還提供了一種檢測microRNA-129-5p的試劑盒，包含序列如SEQIDNO：1～ 2所示的引物。

所述試劑盒還包括SEQIDNO：3所示引物。

本發明還提供了一種檢檢測血漿中microRNA-129-5p含量的方法，包括如下步驟：

a，提取樣本RNA：提取待檢樣本中的RNA；

b，基因擴增：用前述的試劑盒對待檢樣本中的RNA進行逆轉錄和PCR擴增；

c，結果檢測：對擴增結果進行檢測。

綜上，本發明檢測試劑盒和檢測方法可以有效檢測microRNA-129-5p，特異性強、 擴增效率高、靈敏度高、穩定性好，檢測快速，可用于腫瘤檢查，具有良好的應用前景。

以下通過實施例形式的具體實施方式，對本發明的上述內容作進一步的詳細說 明。但不應將此理解為本發明上述主題的范圍僅限于以下的實施例。凡基于本發明權利要 求書記載的內容所實現的技術均屬于本發明的范圍。

附圖說明

圖1肺癌患者血漿1中microRNA-129-5p含量的擴增曲線

圖2肺癌患者血漿1中microRNA-129-5p含量的熔解曲線

圖3肺癌患者血漿2中microRNA-129-5p含量的擴增曲線

圖4肺癌患者血漿2中microRNA-129-5p含量的熔解曲線

圖5肺癌患者血漿3中microRNA-129-5p含量的擴增曲線

圖6肺癌患者血漿3中microRNA-129-5p含量的熔解曲線

圖7肺癌患者血漿4中microRNA-129-5p含量的擴增曲線

圖8肺癌患者血漿4中microRNA-129-5p含量的熔解曲線

圖9正常人血漿1中microRNA-129-5p含量的擴增曲線

圖10正常人血漿1中microRNA-129-5p含量的熔解曲線

圖11正常人血漿2中microRNA-129-5p含量的擴增曲線

圖12正常人血漿2中microRNA-129-5p含量的熔解曲線

圖13肺癌組織1中microRNA-129-5p含量的擴增曲線

圖14肺癌組織1中microRNA-129-5p含量的熔解曲線

圖15正常組織1中microRNA-129-5p含量的擴增曲線

圖16正常組織15中microRNA-129-5p含量的熔解曲線

圖17肺癌組織2中microRNA-129-5p含量的擴增曲線

圖18肺癌組織2中microRNA-129-5p含量的熔解曲線

圖19正常組織2中microRNA-129-5p含量的擴增曲線

圖20正常組織2中microRNA-129-5p含量的熔解曲線

圖21肺癌組織3中microRNA-129-5p含量的擴增曲線

圖22肺癌組織3中microRNA-129-5p含量的熔解曲線

圖23正常組織3中microRNA-129-5p含量的擴增曲線

圖24正常組織3中microRNA-129-5p含量的熔解曲線