[發(fā)明專利]HIV-1早期感染相關(guān)的血清miRNA在制備試劑盒中的應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201610191645.7
• 申請日: 2016-03-30
• 公開（公告）號: CN105603113B
• 公開（公告）日: 2019-02-05
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 戚宇華;胡海洋;郭宏雄;崔侖標(biāo);還錫萍;周明浩
• 申請（專利權(quán)）人: 江蘇省疾病預(yù)防控制中心
• 主分類號: C12Q1/6883
• 分類號: C12Q1/6883
• 代理公司: 江蘇法德永衡律師事務(wù)所 32305
• 代理人: 胡玲

本發(fā)明屬于生物技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種基于血清miRNA的試劑盒及其使用方法在HIV?1感染早期檢測中的應(yīng)用。本發(fā)明涉及的miRNA分子包括hsa?miR?29a、hsa?miR?223、hsa?miR?27a、hsa?miR?19b、hsa?miR?151?3p、hsa?miR?28?5p、hsa?miR?766、hsa?miR?30a?5p和hsa?miR?136*。用這9種血清miRNA作為分子靶標(biāo)，建立了一種快速、敏感、特異的HIV?1感染早期的檢測方法。本發(fā)明涉及上述9種miRNA在病毒感染早期診斷中的用法及檢測這9種miRNA所用的試劑盒。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于生物技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種基于血清miRNA的試劑盒及其使用方法及其人類免疫缺陷(HIV-1)病毒早期感染檢測中的應(yīng)用。

背景技術(shù)

隨著人們生活水平的不斷提高，由人類免疫缺陷病毒(HIV)感染所引起艾滋病(AIDS)由原來的吸毒、暗娼等高危人群開始向一般人群擴散，疫情不僅嚴重地威脅我國人民健康，而且影響到經(jīng)濟發(fā)展和社會穩(wěn)定。截止2011年底，我國存活艾滋病感染者和艾滋病人78萬，每年新發(fā)HIV感染者4.8萬人。早期發(fā)現(xiàn)和早期診斷艾滋病患者是減少傳播機會、控制疫情的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。

目前的實驗室檢測包括HIV抗體、病毒載量、CD4⁺T淋巴細胞、P24抗原檢測等。HIV抗體檢測陽性雖然是HIV感染的金標(biāo)準(zhǔn)，但是一般抗體在感染病毒后4周才逐漸出現(xiàn)，患者從感染HIV到血清HIV抗體陽性反應(yīng)的窗口期由于病毒的大量復(fù)制，具有較強的傳染性；應(yīng)用RT-PCR技術(shù)檢測窗口期血液中的病毒核酸雖然具有很高的靈敏度，但是HIV病毒具有高度的變異性，隨著抗病毒治療的推廣，病毒變異和耐藥株不斷出現(xiàn)，使檢測的敏感性受到了限制；P24抗原檢測能夠在窗口期檢測到抗原，但易出現(xiàn)假陽性；CD4淋巴細胞水平隨著感染的發(fā)展而逐漸下降，一般用于病程監(jiān)測。因此，尋找新的診斷技術(shù)，既要簡便快速又要敏感、特異，是縮短窗口期，實現(xiàn)早期診斷，治療、預(yù)測和監(jiān)測疾病進程的迫切任務(wù)。

微小核糖核酸(microRNA，miRNA)是約22個核苷酸長、單鏈、內(nèi)源的非編碼RNA，在轉(zhuǎn)錄后或翻譯水平調(diào)節(jié)相關(guān)基因表達。最近研究表明血清miRNA不僅在腫瘤、心血管、代謝性等疾病，而且在病毒感染性疾病如肝炎的早期診斷中起著非常重要的作用，血清中成熟的miRNA分子具有高度的穩(wěn)定性，而且在病毒血癥消失后依然可以檢測到。因此建立一種基于血清miRNA作為HIV感染的診斷標(biāo)志物用于疾病的早期診斷及病程的監(jiān)測具有重要意義。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的第一目的是提供一種能夠用于檢測HIV-1病毒早期感染的新的血清miRNA標(biāo)志物及其在制備制備HIV-1感染早期檢測試劑盒中的應(yīng)用。

本發(fā)明的第二目的是提供一種HIV-1感染早期檢測試劑盒及其使用方法。

為了實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用的技術(shù)方案如下：

本發(fā)明提供了一種HIV-1早期感染相關(guān)的血清miRNA標(biāo)志物，所述的miRNA標(biāo)志物為包括如下9種：

hsa-miR-29a(UAGCACCAUCUGAAAUCGGUUA)，其序列信息如SED ID NO.1所示，

hsa-miR-223(UGUCAGUUUGUCAAAUACCCCA)，其序列信息如SED ID NO.2所示，

hsa-miR-27a(UUCACAGUGGCUAAGUUCCGC)，其序列信息如SED ID NO.3所示，

hsa-miR-19b(UGUGCAAAUCCAUGCAAAACUGA)，其序列信息如SED ID NO.4所示，

hsa-miR-151-3p(CUAGACUGAAGCUCCUUGAGG)，其序列信息如SED ID NO.5所，