[發明專利]利用SSR指紋圖譜鑒別黃魁茶樹品種的方法有效
| 申請號： | 201610189372.2 | 申請日： | 2016-03-28 |
| 公開（公告）號： | CN105624321B | 公開（公告）日： | 2018-11-02 |
| 發明（設計）人： | 韋朝領;劉洪偉;饒佳;吳艾琳;何雅賢 | 申請（專利權）人： | 安徽農業大學 |
| 主分類號： | C12Q1/6895 | 分類號： | C12Q1/6895;C12N15/11 |
| 代理公司： | 北京市京大律師事務所 11321 | 代理人： | 劉向輝;王凝 |
| 地址： | 230036 安徽*** | 國省代碼： | 安徽;34 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 利用 ssr 指紋 圖譜 鑒別 茶樹 品種 方法 | ||
【權利要求書】：
1.利用SSR指紋圖譜鑒別黃魁茶樹品種的方法，其特征在于，包括如下步驟：
1）提取待測植株的基因組DNA；
2）以待測植株的基因組DNA為模板，利用引物進行PCR擴增反應；
3）檢測PCR擴增產物，如果能夠擴增出214bp和236bp大小的特征條帶，則待測植株為黃魁茶樹品種；
其中，步驟1）所述待測植株選自黃魁、黃金芽、黃金茶2號、天臺黃茶；
步驟2）所述引物的序列為：
上游引物：5′-AGGCTAAAGAAGATGGAG-3′
下游引物：5′-GAGGGAATGGGTTGTCTA-3′。
2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟2）中PCR擴增體系：50ng/μL基因組DNA2μL，10μM上、下游引物各0.5μL，10×EasyTaq酶緩沖液2μL，EasyTaq DNA聚合酶1U，2.5mMdNTP 2μL，ddH2O加至總量20μL。
3.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟2）中PCR程序：94℃預變性5min；94℃變性30s，55℃退火30s，72℃延伸30s，共30個循環；72℃延伸10min，4℃保存。
4.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟3）中通過毛細管電泳檢測PCR擴增產物。
5.根據權利要求1-4任一項所述的方法，其特征在于，步驟1）用改良的CTAB法從干茶或茶樹葉片中提取基因組DNA。
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