[發(fā)明專利]心臟創(chuàng)可貼及其制備方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201610184735.3
• 申請日: 2016-03-29
• 公開（公告）號: CN105727365B
• 公開（公告）日: 2018-08-28
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 王嘉顯
• 申請（專利權(quán)）人: 南京艾爾普再生醫(yī)學(xué)科技有限公司
• 主分類號: A61L27/18
• 分類號: A61L27/18;A61L27/38;A61K49/00
• 代理公司: 南京知識律師事務(wù)所 32207
• 代理人: 高玲玲

1.一種心臟創(chuàng)可貼，其特征在于：所述心臟創(chuàng)可貼為在PDMS薄膜表面種植形成的心肌細(xì)胞片；

所述心臟創(chuàng)可貼采用以下步驟制備而成：

(1)對PDMS薄膜進(jìn)行等離子體處理，使薄膜表面形成微皺紋；

(2)對形成微皺紋的PDMS薄膜進(jìn)行生物處理；

(3)在處理后的PDMS薄膜表面種植心肌細(xì)胞；

(4)進(jìn)行心肌細(xì)胞培育在PDMS薄膜表面形成心臟創(chuàng)可貼；

所述步驟(3)中心肌細(xì)胞的種植按照250,000細(xì)胞/cm²進(jìn)行均勻種植，種植后將載有心肌細(xì)胞的PDMS薄膜置于容器中，儲存于37℃恒溫培養(yǎng)箱中；

所述種植的心肌細(xì)胞采用多能干細(xì)胞分化的心肌細(xì)胞，并進(jìn)行濃縮處理，將心肌細(xì)胞濃縮為100,000細(xì)胞/mL的濃度以上。

2.一種根據(jù)權(quán)利要求1所述心臟創(chuàng)可貼的制備方法，其特征在于包括以下步驟：

(1)對PDMS薄膜進(jìn)行等離子體處理，使薄膜表面形成微皺紋；

(2)對形成微皺紋的PDMS薄膜進(jìn)行生物處理；

(3)在處理后的PDMS薄膜表面種植心肌細(xì)胞；

(4)進(jìn)行心肌細(xì)胞培育在PDMS薄膜表面形成心臟創(chuàng)可貼。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的制備方法，其特征在于：所述步驟(1)中對PDMS薄膜進(jìn)行等離子體處理步驟采用對PDMS薄膜進(jìn)行1～20min的等離子體照射，之后放置在150℃溫度下處理3～5min。

4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的制備方法，其特征在于：所述步驟(1)中PDMS薄膜表面形成微皺紋的主波長在2.5～4.0μm。

5.根據(jù)權(quán)利要求2所述的制備方法，其特征在于：所述步驟(2)的生物處理包括以下步驟：

(1)將PDMS薄膜在體積濃度為70％的酒精溶液中浸泡15min；

(2)取出后用無菌PBS溶液沖洗3次；

(3)用生物凝膠物質(zhì)對PDMS薄膜進(jìn)行表面處理，之后保存在4℃的無菌PBS溶液中。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的制備方法，其特征在于：所述生物凝膠物質(zhì)為Matrigel或Gelatin，處理時間為30min。

7.根據(jù)權(quán)利要求2所述的制備方法，其特征在于：所述心肌細(xì)胞的培育包括以下步驟：在種植好心肌細(xì)胞的第2天，移去心肌細(xì)胞培養(yǎng)液，并置換新的心肌細(xì)胞培養(yǎng)液；之后每3天更換一次細(xì)胞培養(yǎng)液，直至種植后第7天。