[發明專利]一種巴氏染色液及其制備方法

在審

• 申請號: 201610183609.6
• 申請日: 2016-03-28
• 公開（公告）號: CN105755099A
• 公開（公告）日: 2016-07-13
• 發明（設計）人: 劉春紅
• 申請（專利權）人: 天津智達康華生物科技有限公司
• 主分類號: C12Q1/02
• 分類號: C12Q1/02
• 代理公司: 北京國昊天誠知識產權代理有限公司 11315
• 代理人: 劉昕

技術領域

本發明涉及生物技術技術領域，尤其涉及一種適于臨床使用的巴氏染色液及其制備方法。

背景技術

目前，子宮頸炎、肺結核、胸膜炎、尿路感染等疾病成為我國臨床上的常見疾病、多發病，這些疾病的發病率高，治愈時間長，如何診斷這些疾病成為一個研究的熱點。

液基薄層細胞學技術可輔助臨床醫生對上述疾病提早發現并制定正確的治療方案，使患者盡快康復，減少痛苦，因而受到研究人員和臨床醫生的關注。

液基薄層細胞學技術的重要步驟之一就是對細胞進行染色，而巴氏染色液是最常用的染色方法之一。利用巴氏染色液染色的標本細胞透明度好，結構清晰，制片色彩豐富而鮮艷，因能顯示鱗狀上皮細胞的不同角化程度而常用于婦科標本的染色。

但傳統的巴氏染色液配制較為復雜，染色液易陳舊，而且染色效果不穩定，影響醫生的病理閱片的準確性，影響疾病的診斷。

發明內容

本發明要解決的問題是傳統的巴氏配制復雜、染色不均勻、染色效果不穩定，影響疾病的診斷。

為解決上述技術問題，本發明采用的技術方案是：提供一種巴氏染色液。所述巴氏染色液包括改良蘇木素染色液、EA50染色液和橙黃G染色液。其中，改良蘇木素染色液包括以下組分：碘酸鈉、蘇木色精、硫酸鋁鉀、乙醇、冰醋酸和水。

進一步地，每100ml改良蘇木素染色液，包括以下組分，

碘酸鈉0.003～0.005g

蘇木色精0.1～0.3g

硫酸鋁鉀1～3g

無水乙醇10～30ml

冰醋酸1～3ml

余量為純化水。

優選地，所述EA50染色液包括以下組分：亮綠、伊紅、磷鎢酸、甲醇、冰醋酸、乙醇和水。

進一步地，每100mlEA50染色液，包括以下組分：

亮綠0.02～0.06g

水溶性伊紅0.1～0.4g

磷鎢酸0.1～0.3g

甲醇5～20ml

冰醋酸1～3ml

純化水5～10ml

余量為95％乙醇。

優選地，所述橙黃G染色液包括以下組分：橙黃G、磷鎢酸、乙醇和水。

進一步地，每100ml橙黃G染色液，包括以下組分：

橙黃G0.2～0.6g

磷鎢酸0.2～0.4g

無水乙醇90～95ml

余量為純化水。

本發明的另一個目的在于提供一種上述的巴氏染色液的制備方法。所述制備方法中，改良蘇木素液的制備包括如下步驟：

(1)將蘇木色精溶于無水乙醇，得到A液；

(2)將硫酸鋁鉀溶于純化水，得到B液；

(3)將A液和B液混合，得到混合液；

(4)將碘酸鈉、冰醋酸加入到混合液中，攪拌溶解后加入純化水，即得改良蘇木素染色液。

進一步地，所述制備方法中，EA50染色液的制備方法包括如下步驟：

(1)將水溶性伊紅溶于一部分純化水中，得到C液；

(2)將亮綠溶于剩余的純化水中，得到D液；

(3)將甲醇和95％乙醇混合，得到E液；

(4)將C液、D液同時加入到E液中，攪拌均勻后加入磷鎢酸和冰醋酸，混合均勻后即得EA50染色液。

優選地，所述EA50染色液的制備方法中，步驟(1)和步驟(2)中的純化水的量相同。

進一步地，所述制備方法中，橙黃G染色液的制備包括如下步驟：將橙黃G溶于無水乙醇中，溶解后再加入磷鎢酸，之后加入純化水，混合均勻后即得橙黃G染色液。

本發明具有的優點和積極效果是：本發明提供的巴氏染色液染色均勻、染色后的細胞結構清晰、細胞著色鮮艷，易于臨床上病理切片的觀察判斷。

本發明提供的巴氏染色液中，包括改良蘇木素染色液、EA50染色液和橙黃G染色液，分別對細胞的不同部位進行染色：改良蘇木色素染色液對細胞核進行染色，待檢細胞的細胞核呈深藍色或深紫色，核仁呈紅色；EA50染色液對細胞漿進行染色，待檢細胞的細胞漿顯示粉紅色或藍綠色，不全角化細胞的細胞漿呈粉紅色；橙黃G染色液對細胞漿進行染色，完全角化細胞的細胞漿呈橘黃色。三種染色液相互配合，臨床上可以多方位觀測染色結果，判斷切片的病理情況，使得診斷結果更為準確。