[發明專利]大菱鲆雌雄辨別用引物組及使用其的大菱鲆雌雄辨別方法

在審

• 申請號: 201610183477.7
• 申請日: 2016-03-28
• 公開（公告）號: CN107119106A
• 公開（公告）日: 2017-09-01
• 發明（設計）人: 徐鐘表;李禹宰;鄭泰成;林奉洙;吳泰憲;尹英碩
• 申請（專利權）人: 營漁組合法人海淵
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68;C12N15/11
• 代理公司: 北京英賽嘉華知識產權代理有限責任公司11204
• 代理人: 王達佐,洪欣

技術領域

本發明涉及用于大菱鲆的雌雄辨別的引物組及使用其來辨別大菱鲆的雌雄的方法，更具體而言，本發明涉及能夠通過測定對生成大菱鲆的性激素而言重要的芳香化酶基因表達量而在種苗階段快速而準確地辨別大菱鲆的雌雄的方法。

背景技術

在水產養殖中，養殖魚種的性別辨別對養殖的效率性起到重要的作用。即，這是因為生長速度或者產業價值會根據性別而有所不同，因此在養殖生產性上產生大的差異。鰻鱺魚或比目魚等物種是雌性的生長速度更快，而羅非魚則是雄性的生長速度更快。另外，對于鮭魚或真鯛而言，雌性的體色的消費者好感程度高，對于被食用生殖質的鯔魚、香魚而言，具有卵的雌性的養殖價值高。因此，挑選水產養殖的產業價值高的性別來進行飼養能夠增大生產力，從而提高養殖的效率。

作為魚類性別的辨別方法，首先有通過外形特征來進行辨別的方法。根據在成熟期顯現出的婚姻色或成熟的雌雄個體的外形特征來進行辨別，或者對生殖質進行組織學觀察來進行辨別的方法均屬于其中。對輻紋海豬魚、犁齒鯛、鰟鮍等可通過體色來區別性別，對鮭魚或海馬等可用形態來區別性別。然而，由于這大部分屬于在生長為成體之后在產卵期和發情期發生改變的情況，因此事實上不可能在魚類的魚苗階段用肉眼來區別性別。

除了外觀上的辨別以外，還有在卵形成過程中測定作為卵黃形成前體的卵黃蛋白原的方法。然而，該方法也屬于在性成熟之后才能夠進行的方法，因此同樣不能夠在屬于未成熟期的種苗階段進行辨別。

除此以外，還有通過分子生物學方法來辨別性別的方法，但魚類 與哺乳類不同，不僅具有性染色體的魚種不多，而且僅由性染色體不能夠決定性腺性別，受到如性分化期的水溫等環境影響而發生性別改變的魚種較多。

已知，除了這種根據生態情況來改變性別的魚類以外，對于根據生長初期的環境而具有與遺傳性別(genetic gender)不同的性別的情況，主要根據生殖腺的發育而顯現出性腺性別(gonadal gender)，對于水產養殖中作為產業上重要的養殖魚類的比目魚等的情況，除了遺傳性狀以外，根據水溫等環境條件，生殖腺發育形成得不同，并且性別被決定。另外已知，即使遺傳上為雌性(XX)，在高水溫和低水溫下飼養時也會性分化為性腺雄性。基于這樣的理由，基因辨別的方法也難以在種苗階段辨別魚類的性別。

另外，大菱鲆(turbot；Scophthalmus maximus)為生活在大西洋沿岸、歐洲海岸、北大西洋、波羅的海、地中海以及黑海周邊的比目魚科魚類。大菱鲆作為不在東北亞棲息的外來魚種，在比較冰冷的海洋中棲息，具有從非對稱菱形趨近于圓形程度的寬大的體型，因而具有與比目魚相類似的外形。對于體色，生活在沙中的個體與生活在暗礁中的個體相互不同，與其它鰈魚科魚類同樣地隨著棲息環境而改變體色。眼鏡的位置如韓國的普通的比目魚(偏口魚)那樣，從正面觀察時偏向于左側。

大菱鲆養殖始于法國，目前在西班牙、葡萄牙、丹麥及荷蘭等歐洲以及以中國為首的亞洲進行著養殖。韓國從2012年開始進行利用濟州島的熔巖地下海水的養殖，目前少量地流通。

這種大菱鲆具有如比目魚那樣的雌性生長得快于雄性的特性，因此需要開發在養殖的種苗階段能夠在魚苗階段中快速而準確地區別表現得不同于遺傳性別的性腺性別的技術。

現有技術文獻

專利文獻

韓國注冊專利第10-1418139號

韓國注冊專利第10-1281529號

韓國注冊專利第10-1499689號

韓國公開專利第10-2014-0071579號

發明內容

技術課題

本發明的目的在于提供雌雄辨別方法，其中該雌雄辨別方法能夠在種苗階段準確而容易地辨別雌雄，從而解決水產養殖中不易在種苗階段辨別養殖魚的雌雄的問題，并且利用最近作為高附加值養殖魚種而受到矚目的大菱鲆的養殖中的雌性比雄性快速生長的特性來提高養殖效率。

技術方案