[發(fā)明專利]基于表達HBsAg的熱失活全重組漢遜酵母細胞的乙肝治療疫苗

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201610180329.X
• 申請日: 2016-03-25
• 公開（公告）號: CN105727280B
• 公開（公告）日: 2021-01-19
• 發(fā)明（設計）人: 汪和睦;王昌華;楊珺
• 申請（專利權）人: 汪和睦
• 主分類號: A61K39/29
• 分類號: A61K39/29;A61K39/39;A61P31/20;C12N1/19;C12R1/78
• 代理公司: 天津翰林知識產(chǎn)權代理事務所(普通合伙) 12210
• 代理人: 陳松

1.基于表達HBsAg的熱失活全重組漢遜酵母細胞的乙肝治療疫苗，其特征在于所述的乙肝治療疫苗以所述熱失活全重組漢遜酵母細胞作為佐劑，作為抗原的HBsAg在所述重組漢遜酵母細胞內(nèi)表達量為每10⁸細胞中含有6-10μg HBsAg；重組漢遜酵母表達的HBsAg為adw亞型，所述重組漢遜酵母表達HBsAg的DNA序列如SEQ ID NO:1所示；所述重組漢遜酵母表達的HBsAg共含有如下19個CTL表位：VLQAGFFLL、PFVQWFVGL、FLLTRILTI、WYWGPSLYSI、SLNFLGGSPV、FLGGSPVCL、LYSIVSPF、LYSIVSPFI、PFIPLLPIF、LLLCLIFLL、LLCLIFLLV、LLDYQGMLPV、LVLLDYQGML、VLLDYQGML、WLSLLVPFV、LLVPFVQWFV、GLSPTVWLSA、SIVSPFIPLL、LLPIFFCLWV；所述重組漢遜酵母表達的HBsAg為病毒樣顆粒結構。

2.根據(jù)權利要求1所述的乙肝治療疫苗，其特征是重組漢遜酵母表達的HBsAg的氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示。

3.如權利要求1所述的乙型肝炎疫苗，其特征在于所述重組漢遜酵母表達的HBsAg為病毒樣顆粒結構，由HBsAg插入漢遜酵母類脂組成，所述HBsAg的14個半胱酸中有9～12個形成二硫鍵。

4.如權利要求1所述的乙肝治療疫苗，其特征是所述熱失活重組漢遜酵母細胞的熱失活條件為：熱失活溫度52℃-54℃，熱失活時間1小時-3小時。

5.如權利要求1所述的乙肝治療疫苗，其特征是所述重組漢遜酵母的宿主多形漢遜酵母細胞株為HU-11，保藏編號為CGMCC No.1218，所述宿主多形漢遜酵母的乳清酸苷-5-磷酸脫羧酶基因被破壞的DNA序列如SEQ ID NO：3所示。

6.根據(jù)權利要求1～5任一所述的乙肝治療疫苗，其特征是所述乙肝治療疫苗的劑型選自注射液劑或凍干粉針劑。

7.根據(jù)權利要求6所述的乙肝治療疫苗，其特征是所述注射液劑為預充式注射液劑。

8.根據(jù)權利要求1所述的乙肝治療疫苗，其特征在于還含有HBsAg原液或鋁佐劑HBsAg中的一種。

9.一種重組多形漢遜酵母菌，其特征是所述重組多形漢遜酵母菌中含有SEQ ID NO:1所示核苷酸序列，所述重組多形漢遜酵母菌的基因組中整合有SEQ ID NO:1所示核苷酸序列。