[發(fā)明專利]一株產(chǎn)脂固氮螺菌及其應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201610172940.8
• 申請(qǐng)日: 2016-03-24
• 公開（公告）號(hào): CN105624073B
• 公開（公告）日: 2019-05-03
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 葉文雨;魯國(guó)東;林占熺;劉朋虎;余文英
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 福建農(nóng)林大學(xué)
• 主分類號(hào): C12N1/20
• 分類號(hào): C12N1/20;A01N63/02;A01P21/00;C12R1/01
• 代理公司: 福州元?jiǎng)?chuàng)專利商標(biāo)代理有限公司 35100
• 代理人: 蔡學(xué)俊

本發(fā)明提供了一株產(chǎn)脂固氮螺菌及其應(yīng)用，所述的菌為產(chǎn)脂固氮螺菌(Azospirillum lipoferum)FZJG415，該菌株已于2016年1月20日在中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心保藏，保藏號(hào)為CGMCC No.12060。通過(guò)菌株將空氣中游離的氮轉(zhuǎn)為氨，供作物吸收利用，從而能夠顯著促進(jìn)水稻等作物生長(zhǎng)的菌株。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明微生物領(lǐng)域，涉及一株產(chǎn)脂固氮螺菌及其應(yīng)用，該產(chǎn)脂固氮螺菌(Azospirillum lipoferum，F(xiàn)ZJG415)能將空氣中游離的氮轉(zhuǎn)為氨對(duì)水稻有著明顯的促生作用。

背景技術(shù)

內(nèi)生固氮菌是一類具有固氮能力的微生物，它的主要宿主是非豆科作物。人們?cè)谘芯績(jī)?nèi)生固氮菌時(shí)發(fā)現(xiàn)某些菌類能提供植物高達(dá)70%的氮量。發(fā)掘內(nèi)生固氮菌的資源已成為非豆科作物高效利用生物固氮戰(zhàn)略的主攻方向之一。長(zhǎng)期以來(lái)，為了確保農(nóng)產(chǎn)品獲得高產(chǎn)，人們大量使用化學(xué)肥料和農(nóng)藥，這樣既造成了土壤結(jié)構(gòu)的破壞及環(huán)境的污染，又不利于農(nóng)業(yè)的可持續(xù)發(fā)展。通過(guò)微生物的作用將空氣中游離的氮轉(zhuǎn)為氨，供植物吸收利用，從而促進(jìn)作物的生長(zhǎng)。

從福建農(nóng)林大學(xué)菌草所基地巨菌草根中篩選到具有高固氮酶活性的產(chǎn)脂固氮螺菌菌株，通過(guò)將空氣中游離的氮轉(zhuǎn)為氨，供植物吸收利用，從而促進(jìn)作物生長(zhǎng)具有重要的意義。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于提供一株產(chǎn)脂固氮螺菌及其應(yīng)用，提供具有高效固氮酶活性、生長(zhǎng)速度快、對(duì)環(huán)境適應(yīng)性強(qiáng)的內(nèi)生固氮菌株。通過(guò)菌株將空氣中游離的氮轉(zhuǎn)為氨，供作物吸收利用，從而能夠顯著促進(jìn)水稻等作物生長(zhǎng)的菌株。

為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用如下技術(shù)方案：

本發(fā)明通過(guò)采用選擇性培養(yǎng)基在厭氧和好氧培養(yǎng)條件下，利用CCM與NFB兩種選擇性無(wú)氮培養(yǎng)基從福建農(nóng)林大學(xué)菌草所基地巨菌草根中進(jìn)行內(nèi)生固氮菌的分離純化。將分離純化到的內(nèi)生固氮菌株進(jìn)行活化后，用乙炔還原法和¹⁵N₂同位素標(biāo)記，固氮酶活性為360.22nmol.mL-1h-1，15N測(cè)定豐度為26.19%，發(fā)現(xiàn)該菌株能夠?qū)⒖諝庵杏坞x的氮轉(zhuǎn)為氨，可作為接種劑對(duì)水稻具有明顯的促生長(zhǎng)作用。

本發(fā)明所述的巨菌草固氮螺菌為產(chǎn)脂固氮螺菌(Azospirillum lipoferum)FZJG415，已于2016年01月20日保存在中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心（CGMCC），保藏號(hào)為 CGMCC No.12060。地址為北京市朝陽(yáng)區(qū)北辰西路1號(hào)院3號(hào) 中國(guó)科學(xué)院微生物研究所，郵政編碼：100101。

本發(fā)明產(chǎn)脂固氮螺菌具有如下形態(tài)和生理、生化特性：

a、菌體形態(tài)特性

該產(chǎn)脂固氮螺菌為革蘭氏陰性菌，細(xì)胞呈桿狀或卷曲，大小為(0.6-0.8)×(1.1-1.6) μm。

b、菌落形態(tài)特性

NFB瓊脂平板上生長(zhǎng)速度較快，菌落圓形（30℃，生長(zhǎng)48小時(shí)），表面光滑呈粘液狀，邊緣整齊，透明，菌落直徑3-7毫米。最適生長(zhǎng)溫度是28-37℃及最佳生長(zhǎng)pH值6-8。

c、生理生化特性