[發明專利]快速定量檢測糞便乳鐵蛋白的免疫層析試劑盒

在審

• 申請號: 201610172060.0
• 申請日: 2016-03-24
• 公開（公告）號: CN105717308A
• 公開（公告）日: 2016-06-29
• 發明（設計）人: 李降龍;尹嘉
• 申請（專利權）人: 泰州海路生物技術有限公司
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68
• 代理公司: 南京匯盛專利商標事務所(普通合伙) 32238
• 代理人: 袁靜

技術領域

本發明屬于臨床體外診斷試劑技術領域，具體涉及一種快速定量檢測糞便乳鐵蛋白的免疫層析試劑盒。

背景技術

腸易激綜合癥(IrritableBowelsyndrome,IBS)是一組以腹痛及腹部不適伴排便習慣改變、糞便性狀異常為特點而缺乏器質性疾病依據的癥候群,是較常見的胃腸功能紊亂性疾病,其主要的病理生理基礎是胃腸動力奈亂、內臟高敏感性、腦-腸軸相互作用失調等,治療上多以飲食調節、對癥治療及心理干預為主,預后較好。炎癥性腸病(InflammatoryBowelDisease,IBD)包括潰癌性結腸炎(ulcerativecolitis,UC)和克羅恩病(Crohn'sdisease,CD),是一種以反復發作的腹瀉、便血、發熱、腹痛、體重下降為臨床表現的慢性腸道疾病,通常伴有腸外表現,病理表現為胃腸點膜和(或)胃腸壁全層的慢性炎癥,其發病可能與遺傳、環境及腸道菌群等多種病因導致機體對腸道抗原免疫應答失調所致,治療上需氨基水楊酸,甚至糖皮質激素、免疫抑制劑及生物制劑,且病情易于反復,可能終生用藥,嚴重時危及生命。

典型的IBD與IBS在臨床表現上各有不同,但近年來研究發現,很多IBD患者在發病初期和臨床緩解期表現為IBS癥狀如腹脹、腹灣、胃部不適等,依據IBS羅馬I診斷標準,IBS樣前驅癥狀在UC患者可持續2.7年,在CD患者可持續6.8年,而在此階段,即使有現行的羅馬標準等指南可供參考,僅根據臨床表現和體征要想準確區分IBD與IBS還是相當困難的。但因彼此的病理機制、治療方式及預后完全不同,兩者的鑒別診斷對于大部分臨床醫師來說是極大的挑戰。

臨床實踐中，一般根據患者的癥狀、體征以及內鏡和實驗室檢查結果綜合判斷IBD疾病活動度。內鏡檢查聯合病變黏膜活檢是現階段評估腸道炎癥程度的金標準，可直接觀察病變部位，明確病變范圍、程度及其組織學改變，但具有檢查為侵入性、費時、內鏡和顯微鏡下的各種參數難以量化等缺點；一些血液學指標如CRP、ESR、白蛋白、PLT計數、WBC計數等雖然亦可用于評價IBD疾病活動度，但這些指標缺乏器官特異性，全身各系統炎癥、感染時均可明顯升高。因此,相當數量的IBS樣癥狀患者需要接受進一步侵入性診療如內鏡檢查和放射性影像學檢查以明確是否為器質性或功能性疾患,這不僅增加了患者的痛苦和相關操作的風險(特別對于兒童及部分年邁病重患者),并且加重其經濟負擔、造成部分醫療資源的浪費。臨床資料顯示,絕大多數接受內鏡檢查的患者實際并沒有嚴重器質性病變,慢性腹部不適的患者在就診初期沒有必要進行內鏡檢查。因而,尋找一種非侵入性的、廉價安全、簡便可重復、又具有較高敏感性與特異性的實驗室檢測指標對于IBD和IBS的鑒別診斷具有重要意義。

乳鐵蛋白（Lactoferrin,LF)是一種相對分子質量為76-80kD的鐵結合糖蛋白，廣泛存在于乳汁、唾液等外分泌或者血漿、中性粒細胞次級顆粒中，是活化的多形核中性粒細胞的主要成分，為炎癥反應的一種產物。由于處于炎癥的腸道黏膜中有大量中性粒細胞浸潤，導致糞便中性粒細胞衍生蛋白（如乳鐵蛋白等）濃度的升高，那么測定糞便中這些蛋白濃度則可以間接可靠的反應腸道炎癥情況。

糞便乳鐵蛋白（FecalLactoferrin,FLA）作為一種腸道炎癥的標記物，可用來鑒別炎癥性(包括細菌感染性腸炎、活動性IBD)和非炎癥性腸道疾病，用于腸道炎癥的診斷、炎癥活動度和藥物療效的評估以及疾病復發的預測。

目前，檢測糞便乳鐵蛋白（FecalLactoferrin,FLA）的方法目前主要是酶聯免疫技術（ELISA)，ELISA技術存在以下缺點：檢測設備要求高，成本高；干擾因素較多，重復性不好；檢測時間長。因此酶聯免疫技術檢測糞便乳鐵蛋白（FecalLactoferrin,FLA）不適合臨床快速診斷。

發明內容

本發明的一個目的是提供一種快速定量檢測糞便乳鐵蛋白的免疫層析試劑盒，具有方便快捷、操作簡單、結果準確等優點，適于臨床快速檢測。

本發明的另一目的是提供上述試劑盒的制備方法，簡單，高效，成本低。

本發明的目的采用如下技術方案實現。