[發(fā)明專利]一種基于CID碎裂鑒定脂質(zhì)組學(xué)中脂質(zhì)成分結(jié)構(gòu)的方法

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• 申請日: 2016-03-23
• 公開（公告）號: CN107228908A
• 公開（公告）日: 2017-10-03
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 謝彤;單進(jìn)軍;徐建亞;沈存思;狄留慶;汪受傳
• 申請（專利權(quán)）人: 南京中醫(yī)藥大學(xué)
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N27/62
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1.一種基于CID碎裂鑒定脂質(zhì)組學(xué)中未知脂質(zhì)成分的簡單方法，其特征在于由以下幾個步驟組成：

a：針對不同的生物樣品，優(yōu)化相應(yīng)的提取條件，為保證樣品濃度在合適的范圍，應(yīng)摸索生物樣品所需要的量以及提取脂質(zhì)成分所選擇的方法；

b：根據(jù)脂質(zhì)成分的性質(zhì)，確定合適的質(zhì)譜檢測儀器以及質(zhì)譜檢測條件，包括是否需要液相分離并確定合適的洗脫梯度、正負(fù)離子的選擇、使用合適的流動相調(diào)節(jié)劑、使用合適的色譜柱等；

c：在得到脂質(zhì)組學(xué)色譜質(zhì)譜圖信息的基礎(chǔ)上，針對精確的母子質(zhì)核比，搜索在線脂質(zhì)組學(xué)譜庫確定其可能的脂質(zhì)成分歸屬，由此確定其結(jié)構(gòu)中脂肪酰的總含碳量和不飽和度；

d：運用簡易公式，確定MS²譜圖中所對應(yīng)的診斷離子；

e：根據(jù)診斷離子歸屬各脂肪酰的含碳量和不飽和度，最終確定該脂質(zhì)分子可能的結(jié)構(gòu)。

2.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于所述步驟a中涉及的生物樣品包括植物樣品、動物或人的血漿樣品、組織樣品、尿液樣品、培養(yǎng)貼壁細(xì)胞樣品、培養(yǎng)懸浮細(xì)胞樣品、各種食用油、各種保健食品、藥品、藥材以及其他的各種含有脂質(zhì)成分的混合物等。

3.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于所述步驟a中涉及的生物樣品提取方法應(yīng)能夠盡可能高回收率的提取所需檢測的脂質(zhì)成分包括固相萃取法、液液萃取提取法、蛋白沉淀法等。

4.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于所述步驟b中涉及的質(zhì)譜儀為具有CID碎裂功能并同時具有高準(zhǔn)確度的離子精確質(zhì)量數(shù)測定功能的雜交質(zhì)譜，包括HPLC/Q-TOF、HPLC/LTQ-Orbitrap以及HPLC/Q-Orbitrap等質(zhì)譜聯(lián)用儀。

5.如權(quán)利要求1b所述的脂質(zhì)提取方法，其特征在于所述步驟b中所涉及的檢測參數(shù)應(yīng)該能夠保證在該條件下能夠高靈敏的檢測到所需檢測的脂質(zhì)成分。

6.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于所述步驟c中所檢測的脂質(zhì)成分包括甘油三酯、甘油二酯、磷脂酰膽堿、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰肌醇、心磷脂、神經(jīng)酰胺、磷脂甘油、磷脂酰絲氨酸等。

7.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于所述步驟d中涉及的簡易公式為附表1中的公式，用于快速篩選各脂質(zhì)成分的診斷離子。