[發(fā)明專利]酶法同時制備谷胱甘肽和腺苷酸的方法有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201610167664.6 | 申請日： | 2016-03-22 |
| 公開（公告）號： | CN105603028B | 公開（公告）日： | 2019-04-16 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 劉珊珊;于鐵妹;黃慶軍;秦永發(fā) | 申請（專利權(quán)）人： | 深圳市古特新生生物科技有限公司 |
| 主分類號： | C12P21/02 | 分類號： | C12P21/02;C12P19/32 |
| 代理公司： | 北京彭麗芳知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11407 | 代理人： | 彭麗芳 |
| 地址： | 518103 廣東省深圳市*** | 國省代碼： | 廣東;44 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 同時 制備 谷胱甘肽 腺苷酸 方法 | ||
1.一種酶法同時制備谷胱甘肽和腺苷酸的方法，其特征在于，所述方法包括以下步驟：
(1)在反應(yīng)罐中生成谷胱甘肽GSH和AMP：
在反應(yīng)罐中，100L無菌水的反應(yīng)體系為含有底物2.8kg谷氨酸、1.8kg半胱氨酸和2.0kg甘氨酸，以及5.1kg ATP和0.83kg一水氯化錳的溶液，均勻攪拌；調(diào)節(jié)pH值至7.0，在反應(yīng)體系中添加0.01kg GshF酶及0.001kg Adk酶開始反應(yīng)，反應(yīng)期間控制pH值為7.0，溫度為37℃，反應(yīng)時間6小時；
(2)在過濾器中分離GshF酶及Adk酶：
通過超濾方法，將步驟(1)的反應(yīng)體系的反應(yīng)液經(jīng)過過濾器過濾分離GshF酶和Adk酶，過濾，濾出液為分離出酶之后的反應(yīng)液；
(3)分離產(chǎn)物GSH和AMP：
使用鹽酸調(diào)節(jié)濾出液的pH值至3.0，在離子交換柱中通過D001大孔強(qiáng)酸性苯乙烯系陽離子交換樹脂，溶液中的GSH、部分氨基酸及陽離子被吸附，穿出液中主要含有AMP，可簡單脫鹽后直接濃縮結(jié)晶；
使用0-0.8M NaCl梯度洗脫陽離子交換樹脂上的GSH；
(4)反應(yīng)罐生成GSH和AMP的連續(xù)反應(yīng)，即步驟(1)的連續(xù)反應(yīng)：
將步驟(2)中分離出的酶經(jīng)由過濾器的回流口添加至反應(yīng)罐，并添加原酶量5-15％的新酶進(jìn)行反應(yīng)；
在37℃、pH為7.0的條件下進(jìn)行生成GSH和AMP的連續(xù)反應(yīng)，反應(yīng)時間6小時。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的酶法同時制備谷胱甘肽和腺苷酸的方法，其特征在于，所述步驟(4)反應(yīng)中反應(yīng)液配制方法與步驟(1)相同。
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