[發(fā)明專利]一種Ficolin-3電化學(xué)免疫傳感器及其制備與應(yīng)用

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201610165015.2
• 申請日: 2016-03-22
• 公開（公告）號: CN105675876A
• 公開（公告）日: 2016-06-15
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 宓現(xiàn)強(qiáng);散麗黎;吳家睿;曾冬冬
• 申請（專利權(quán)）人: 中國科學(xué)院上海高等研究院
• 主分類號: G01N33/577
• 分類號: G01N33/577;G01N33/558;G01N27/30
• 代理公司: 上海光華專利事務(wù)所 31219
• 代理人: 郭婧婧;許亦琳

1.一種Ficolin-3電化學(xué)免疫傳感器，包括工作電極，所示工作電極包括基底電極和捕獲 分子，所述基底電極選用玻碳電極，所述捕獲分子選用Ficolin-3單克隆抗體。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的電化學(xué)免疫傳感器，其特征在于，所述捕獲分子固定于所述基底 電極上。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的電化學(xué)免疫傳感器，其特征在于，所述捕獲分子通過靜電引力吸 附于所述基底電極上。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的電化學(xué)免疫傳感器，其特征在于，所示基底電極上捕獲分子的密 度范圍是56.62～106.16ng/mm²。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的電化學(xué)免疫傳感器，其特征在于，所述捕獲分子選用鼠抗人 Ficolin-3單克隆抗體。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的電化學(xué)免疫傳感器，其特征在于，所示電化學(xué)免疫傳感器中還含 有參比電極和對電極。

7.如權(quán)利要求1～6任一權(quán)利要求所述電化學(xué)免疫傳感器中工作電極的制備方法，包括步 驟：在基底電極表面添加捕獲分子，孵育，獲得工作電極。

8.一種電化學(xué)免疫檢測系統(tǒng)，包括如權(quán)利要求1～6任一權(quán)利要求所述電化學(xué)免疫傳感器。

9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的電化學(xué)免疫檢測系統(tǒng)，其特征在于，還包括生物素標(biāo)記Ficolin-3 多克隆抗體、親和素修飾的辣根過氧化物酶、含有過氧化氫的TMB底物溶液。

10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的電化學(xué)免疫檢測系統(tǒng)，其特征在于，所述生物素標(biāo)記Ficolin-3 多克隆抗體為生物素標(biāo)記羊抗人Ficolin-3多克隆抗體。

11.一種使用如權(quán)利要求1～6任一權(quán)利要求所述電化學(xué)免疫傳感器檢測Ficolin-3的方法， 包括步驟：

(1)封閉電化學(xué)免疫傳感器中工作電極上的非特異性結(jié)合位點(diǎn)；

(2)在步驟(1)所得已經(jīng)封閉其他非特異性結(jié)合位點(diǎn)的工作電極上添加待測樣本， 孵育；

(3)再在步驟(2)所得工作電極上添加生物素標(biāo)記Ficolin-3多克隆抗體，孵育；

(4)再在步驟(3)所得工作電極上添加親和素修飾的辣根過氧化物酶；

(5)將步驟(4)所得工作電極放在含有過氧化氫的TMB底物溶液中，進(jìn)行檢測。

12.根據(jù)權(quán)利要求11所述的方法，其特征在于，所述方法為非疾病診斷目的的方法。

13.根據(jù)權(quán)利要求11所述的方法，其特征在于，步驟(1)中，采用BSA封閉電化學(xué)免疫 傳感器中工作電極上的非特異性結(jié)合位點(diǎn)。

14.根據(jù)權(quán)利要求11所述的方法，其特征在于，步驟(2)中，孵育溫度為4～25℃，孵育 時間為45～75min。

15.根據(jù)權(quán)利要求11所述的方法，其特征在于，步驟(3)中，所述生物素標(biāo)記Ficolin-3 多克隆抗體為生物素標(biāo)記羊抗人Ficolin-3多克隆抗體。

16.根據(jù)權(quán)利要求11所述的方法，其特征在于，步驟(3)中，孵育溫度為4～25℃，孵育 時間為60～90min。

17.根據(jù)權(quán)利要求11所述的方法，其特征在于，步驟(3)中，生物素標(biāo)記Ficolin-3多克 隆抗體的濃度為25～30μg/ml。

18.根據(jù)權(quán)利要求11所述的方法，其特征在于，步驟(4)中，檢測時采用三電極系統(tǒng)，除 了工作電極以外，還包括對電極和參比電極。

19.根據(jù)權(quán)利要求18所述的方法，其特征在于，采用鉑電極為對電極，銀/氯化銀為參比電 極。

20.如權(quán)利要求1～6任一權(quán)利要求所述電化學(xué)免疫傳感器在制備Ficolin-3檢測產(chǎn)品中的用 途。