[發(fā)明專利]一種阿法替尼有關(guān)物質(zhì)的分離檢測方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201610163945.4
• 申請日: 2016-03-22
• 公開（公告）號(hào): CN107219308A
• 公開（公告）日: 2017-09-29
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 鄭永亮;張艷俠;郝福;康旺;余大海;許桂玲;李志剛
• 申請（專利權(quán)）人: 河北神威藥業(yè)有限公司
• 主分類號(hào): G01N30/02
• 分類號(hào): G01N30/02
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及阿法替尼有關(guān)物質(zhì)，尤其是其對映異構(gòu)體的分離檢測方法，屬于制藥技術(shù)領(lǐng)域。

背景技術(shù)

阿法替尼(Afatinib)是一種表皮生長因子受體(EGFR)和人表皮生長因子受體2(Her-2)酪氨酸激酶的不可逆抑制劑，其二馬來酸鹽可用于治療晚期非小細(xì)胞肺癌(NSCLC)等疾病。該化合物的化學(xué)名為(2E)-4-[(3-氯-4-氟苯基)氨基]-6-{[4-(N,N-二甲基氨基)-1-氧代-2-丁烯-1-基]氨基}-7-((3S)-四氫呋喃-3-基氧基)-喹唑啉，結(jié)構(gòu)式如下：

阿法替尼(API)含有雙鍵和手性碳結(jié)構(gòu)且穩(wěn)定性較差，因此阿法替尼及其二馬來酸鹽在制備或儲(chǔ)存過程中易產(chǎn)生雜質(zhì)，包括(S,Z)-N-{4-[(3-氯-4-氟苯基)氨基]-7-[(四氫呋喃-3-基)氧基]喹唑啉-6-基}-4-(二甲基氨基)丁-2-烯酰胺(RC1)、(R,E)-N-{4-[(3-氯-4-氟苯基)氨基]-7-[(四氫呋喃-3-基)氧基]喹唑啉-6-基}-4-(二甲基氨基)丁-2-烯酰胺(RC2)、(S,Z)-N-{4-[(3-氯-4-氟苯基)氨基]-7-[(四氫呋喃-3-基)氧基]喹唑啉-6-基}-4-(羥基)丁-2-烯酰胺(RC3)、(S)-N4-(3-氯-4-氟苯基)-7-[(四氫呋喃-3-基)氧基]喹唑啉-4,6-二胺(RC4)、二甲胺(RC5)等。其中，對映異構(gòu)體異構(gòu)體雜質(zhì)RC 2和與目標(biāo)產(chǎn)物性質(zhì)相近而難以分離、檢測。

CN104391058A公開了一種阿法替尼及其對映異構(gòu)體雜質(zhì)的HPLC分離檢測方法，其為等度檢測，色譜柱為CHIRALPAK OZ-H(250mm×4.6mm，5μm手性色譜柱)，流動(dòng)相和稀釋劑為體積比550-650：350-250：100：0.1的正己烷：乙醇：甲醇：二乙胺，流速為0.5mL/min～1.0mL，柱溫為15～35℃，其檢測波長為256nm。該方法采用四種溶劑混合作為流動(dòng)相及稀釋劑，操作繁復(fù)，不具備實(shí)用性，并且其靈敏度低、峰型較寬。因此，需要一種適于分離和檢測阿法替尼的對映異構(gòu)體雜質(zhì)及其他潛在雜質(zhì)的方法，以更有效地控制藥品的質(zhì)量。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明提供了一種阿法替尼有關(guān)物質(zhì)的分離檢測方法，在高效液相色譜儀上進(jìn)行檢測，色譜柱為纖維素三(3,5-二甲基氨基苯基甲酸酯)吸附硅膠色譜柱，流動(dòng)相為體積比為90:10的正己烷：乙醇混合溶液，檢測波長為255nm～265nm，柱溫為25～35℃，流速為0.9～1.0L/min。

在本發(fā)明一些實(shí)施方案中，所述色譜柱選自Lux Cellulose-1或Chiralcel OD-H(250mm×4.6mm，5μm)。

在本發(fā)明一些實(shí)施方案中，所述檢測波長為260nm。

在本發(fā)明一些實(shí)施方案中，所述柱溫為30℃。

在本發(fā)明一些實(shí)施方案中，所述流速為1.0mL/min。

在本發(fā)明中，所述阿法替尼有關(guān)物質(zhì)是指對映異構(gòu)體異構(gòu)體(R,E)-N-{4-[(3-氯-4-氟苯基)氨基]-7-[(四氫呋喃-3-基)氧基]喹唑啉-6-基}-4-(二甲基氨基)丁-2-烯酰胺(RC2)。

本發(fā)明的方法具有重復(fù)性好、準(zhǔn)確度高、耐用性良好的特點(diǎn)，適用于阿法替尼或其二馬來酸鹽及其對映異構(gòu)體雜質(zhì)的分離檢測。

說明書附圖

圖1為空白圖譜。

圖2為實(shí)施例1的對映異構(gòu)體對照品溶液圖譜。

圖3為實(shí)施例1的系統(tǒng)適用性溶液圖譜。

圖4為實(shí)施例1的供試品溶液圖譜。

圖5為實(shí)施例2的供試品溶液圖譜。

圖6為實(shí)施例3的供試品溶液圖譜。

具體實(shí)施方案

為了使本領(lǐng)域的技術(shù)人員更好地理解本發(fā)明的技術(shù)方案，下面進(jìn)一步披露一些非限制實(shí)施例對本發(fā)明作進(jìn)一步的詳細(xì)說明。

本發(fā)明所使用的試劑均可以從市場上購得。

實(shí)施例1

(1)檢測條件

儀器：Ultimate 3000四元低壓高效液相色譜儀，紫外檢測器，檢測波長：260nm；

色譜柱：用纖維素三(3,5-二甲基氨基苯基甲酸酯)吸附硅膠為填充劑(Lux Cellulose-1或Chiralcel OD-H)(250mm×4.6mm，5μm)；

稀釋劑：甲醇；

流動(dòng)相：正己烷-乙醇(90:10)

流速：1.0mL/min；

柱溫：30℃；

進(jìn)樣量：10μL。

(2)檢測步驟