[發明專利]一種高靜壓結合酶解法制備低敏性白果蛋白粉的方法

在審

• 申請號: 201610161399.0
• 申請日: 2016-03-22
• 公開（公告）號: CN105755082A
• 公開（公告）日: 2016-07-13
• 發明（設計）人: 王成章;周昊;陳虹霞
• 申請（專利權）人: 中國林業科學研究院林產化學工業研究所
• 主分類號: C12P21/06
• 分類號: C12P21/06;A23L33/185
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種高靜壓結合酶解法制備低敏性白果蛋白粉的方法，其特征在于，其步驟如下：

（1）白果蛋白的分離純化

取新鮮白果脫殼，冷凍干燥后，研磨過篩，用石油醚脫脂至脫脂完全為止，待石油醚完全揮發后，按1:15～20g/mL的比例加入pH7.4的濃度為0.2mol/L的Tris-HCl溶液進行蛋白提取，4℃下磁力攪拌24～48h，然后在4℃下5000r/min冷凍離心15min，上清液分別通過40和80g/100mL飽和度的(NH4)₂SO₄進行分級沉淀，4℃下5000r/min冷凍離心30min，沉淀用少量pH8.0的濃度為0.01mol/L的Tris-HCl溶液溶解，置于截留分子量為3.5kDa的透析袋中用相同的Tris-HCl溶液進行透析，透析液冷凍干燥后得到白果蛋白；

（2）高靜壓處理

取一定量的白果蛋白，用蒸餾水配制成濃度為40～60mg/mL的白果蛋白溶液，將其密封于雙層聚乙烯塑料袋中，抽真空密封后，置于高壓設備中，于25℃條件下進行高靜壓處理，處理壓力范圍為100～700MPa，處理時間均為20～30min；

（3）蛋白酶水解

取一定量上述高壓處理后的白果蛋白樣品，于90℃條件下熱處理5min，然后用1mol/LHCl或1mol/LNaOH調節溶液的pH值至蛋白酶最適宜的水解pH，根據白果蛋白樣品質量，按1～5%的質量比例加入蛋白酶進行水解，水解溫度為蛋白酶最佳水解溫度，水解時間為1～2h，水解結束后在95℃下滅酶活10min，然后將水解樣品進行冷凍干燥，即得到低敏性白果蛋白粉。

2.如權利要求1所述的一種高靜壓結合酶解法制備低敏性白果蛋白粉的方法，其特征在于：步驟（3）中所述的蛋白酶為堿性蛋白酶、木瓜蛋白酶、胃蛋白酶或中性蛋白酶中的一種。

3.如權利要求1所述的一種高靜壓結合酶解法制備低敏性白果蛋白粉的方法，其特征在于：步驟（3）中所述的蛋白酶最適宜的水解pH，堿性蛋白酶為pH8.0，木瓜蛋白酶為pH6.5、胃蛋白酶為pH1.5，中性蛋白酶為pH7.0。

4.如權利要求1所述的一種高靜壓結合酶解法制備低敏性白果蛋白粉的方法，其特征在于：步驟（3）中所述的蛋白酶最佳水解溫度，堿性蛋白酶為45℃，木瓜蛋白酶為55℃、胃蛋白酶為40℃，中性蛋白酶為45℃。