[發(fā)明專利]一種基因芯片探針剝離液

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201610161151.4
• 申請日: 2016-03-21
• 公開（公告）號: CN105733842B
• 公開（公告）日: 2018-10-19
• 發(fā)明（設計）人: 廉國勝;汪海波;田綠波;柯明劍;楊澤;林繼燦;伍碧梅;蘇影
• 申請（專利權）人: 珠海國際旅行衛(wèi)生保健中心
• 主分類號: C11D1/94
• 分類號: C11D1/94;C11D3/60;C11D3/386;C11D3/37;C11D3/28;C11D3/20;C11D3/04
• 代理公司: 廣州新諾專利商標事務所有限公司 44100
• 代理人: 吳澤燊

本發(fā)明公開了一種基因芯片探針剝離液，包括以下質(zhì)量分數(shù)的A溶液、B溶液和C溶液三種組分：A溶液：10％脂肪醇聚氧乙烯醚硫酸鈉、6％十二烷基硫酸鈉、6％丙三醇、3％十二烷基二甲基氧化胺、3％烷基醇酰胺、2％氯化鈉、1％羥甲基纖維素鈉；B溶液：1mg/ml DNA酶Ⅰ；C溶液：50％二氯異氰尿酸鈉。本發(fā)明組成簡單、成本低廉、安全環(huán)保，清除芯片表面探針及雜質(zhì)干凈而且不影響芯片表面的化學修飾，不影響再次雜交的結(jié)果，從而使芯片可以反復利用，大大降低芯片的使用費用。

技術領域

本發(fā)明屬于基因芯片相關技術領域，具體的公開了一種基因芯片探針剝離液。

背景技術

基因芯片(又稱DNA芯片、生物芯片)技術系指將大量(通常每平方厘米點陣密度高于400)探針分子固定于支持物上后與標記的樣品分子進行雜交，通過檢測每個探針分子的雜交信號強度進而獲取樣品分子的數(shù)量和序列信息。通俗地說，就是通過微加工技術，將數(shù)以萬計、乃至百萬計的特定序列的DNA片段(基因探針)，有規(guī)律地排列固定于2cm2的硅片、玻片等支持物上，構成的一個二維DNA探針陣列，與計算機的電子芯片十分相似，所以被稱為基因芯片。

基因芯片技術由于同時將大量探針固定于支持物上，所以可以一次性對樣品大量序列進行檢測和分析，從而解決了傳統(tǒng)核酸印跡雜交(Southern Blotting和NorthernBlotting等)技術操作繁雜、自動化程度低、操作序列數(shù)量少、檢測效率低等不足。而且，通過設計不同的探針陣列、使用特定的分析方法可使該技術具有多種不同的應用價值，如基因表達譜測定、實變檢測、多態(tài)性分析、基因組文庫作圖及雜交測序等。

基因芯片的最大優(yōu)點在于其高通量，然而，芯片價格高昂，且需要重復實驗來獲得有意義的統(tǒng)計顯著性，這些限制了它們的應用。所以在實際使用中常需要進行探針剝脫步驟以實現(xiàn)芯片的重復使用。現(xiàn)有公開報道的重復利用方法包括基于RNase H的剝離技術、微生物基因芯片的再生利用、用于傳感器芯片的再生利用等。基于RNase H的剝離技術的剝離液主要適用于探針類型為RNA探針的芯片，對DNA寡核苷酸探針不適用。微生物基因芯片的再生利用的剝離液主要成分為檸檬酸鈉、十二烷基磺酸鈉，成分雖簡單，但實際操作中需將芯片放入水浴鍋中100℃煮沸，不太適用于聚苯乙烯芯片。用于傳感器芯片的再生利用的剝離液分為CM5芯片、SA芯片等。CM5芯片的再生主要由環(huán)氧氯丙烷、二甘醇二甲醚溶液、NaOH、乙醇、葡聚糖溶液、溴乙酸等成分構成，成分眾多、復雜，操作則更加繁瑣。SA芯片的再生主要由N-羥基丁二酰亞胺、EDC、鏈霉親和素溶液、鹽酸乙醇胺溶液構成，不但對聚苯乙烯芯片無效，而且操作更麻煩。

為了解決這些問題，我們研發(fā)了一種新型基因芯片探針剝離液，當制備了探針、完成了雜交的的芯片，通過使用該剝離液并通過一定的操作后，再次使用的效果與原來的芯片相同，且背景無顯著增加，即芯片可以重復利用，從而可以大大降低每個芯片的費用。

發(fā)明內(nèi)容

為了解決上述技術問題，本發(fā)明提供了一種基因芯片探針剝離液，可以通過一定的操作方法，實現(xiàn)基因芯片的重復利用。

本發(fā)明所采用的技術方案為：

一種基因芯片探針剝離液，包括以下質(zhì)量分數(shù)的A溶液、B溶液和C溶液三種組分：其中A溶液含有10～20％陰離子表面活性劑、6％丙三醇、2～5％兩性表面活性劑、2～5％非離子表面活性劑、0～4％Nacl、0～2％乳化穩(wěn)定劑；B溶液含有0.5～2mg/ml DNA水解酶；C溶液含有50％的氧化性殺菌劑。

進一步地，所述陰離子表面活性劑選自脂肪醇聚氧乙烯醚硫酸鈉、十二烷基硫酸鈉、α-磺基脂肪酸甲酯、油酰氧基乙磺酸鈉中的一種或幾種。

進一步地，所述兩性表面活性劑選自十二烷基二甲基氧化胺、十二烷基乙氧基磺基甜菜堿、十二烷基羥丙基磺基甜菜堿、十二烷基磺丙基甜菜堿中的一種或幾種。

進一步地，所述非離子表面活性劑選自烷基醇酰胺、烷基酚聚氧乙烯醚、碳脂肪醇聚氧乙烯醚、失水山梨醇酯中的一種或幾種。