[發明專利]一種鑒定新菠蘿灰粉蚧的引物對及其應用

有效

• 申請號: 201610159773.3
• 申請日: 2016-03-21
• 公開（公告）號: CN105586339B
• 公開（公告）日: 2018-09-04
• 發明（設計）人: 黃蓬英;林玲玲;方志鵬;廖富榮
• 申請（專利權）人: 廈門出入境檢驗檢疫局檢驗檢疫技術中心
• 主分類號: C12N15/11
• 分類號: C12N15/11;C12Q1/6888
• 代理公司: 北京紀凱知識產權代理有限公司 11245
• 代理人: 關暢;何葉喧

本發明公開了一種鑒定新菠蘿灰粉蚧的引物對及其應用。本發明的引物對由引物D.neo?28SF和引物D.neo?28SR組成，分別如序列表1、2所示。本發明還保護所述引物對在鑒定或輔助鑒定待測昆蟲是否為新菠蘿灰粉蚧中的應用、檢測待測生物樣本中是否含有新菠蘿灰粉蚧中的應用。本發明還保護一種鑒定待測昆蟲是否為新菠蘿灰粉蚧的方法、一種檢測待測生物樣本中是否含有新菠蘿灰粉蚧的方法。本發明建立的檢測方法能夠快速準確地判斷樣品是否為新菠蘿灰粉蚧，該方法的建立為新菠蘿灰粉蚧快速檢測與準確識別提供了依據，為有效阻截新菠蘿灰粉蚧在我國的進一步傳播擴散和危害提供了技術保障，為進出口安全提供了保證。

技術領域

本發明屬于植物檢疫技術領域，具體涉及一種鑒定新菠蘿灰粉蚧的引物對及其應用。

背景技術

新菠蘿灰粉蚧(Dysmicoccus neobrevipes Beardsley)屬半翅目(Hemiptera)，蚧總科(Coccoidea)，粉蚧科(Pseudococcidae)。

新菠蘿灰粉蚧寄主范圍十分廣泛，危害菠蘿、香蕉、番荔枝、柑橘、葡萄等農林經濟作物，其主要分布在熱帶、亞熱帶地區，目前在我國僅海南、臺灣地區、廣東局部有分布記載。新菠蘿灰粉蚧以卵、幼蟲和成蟲寄生在寄主植物表面，因而極易隨寄主植物傳播，被列入中華人民共和國進境植物檢疫性有害生物名錄中，在口岸檢疫中常有截獲。

新菠蘿灰粉蚧種類識別主要基于雌成蟲的外部形態特征，包括體長、多孔腺類型、數量及排列，而這些識別特征對于口岸經常截獲的若蟲或殘體的鑒別則無能為力，且用傳統形態分類進行蚧蟲鑒定過程復雜，需經固定、透明、染色、脫色、整形、封片、鏡檢等一系列步驟，這與進口水果快速驗放、快速通關形成矛盾。因此，傳統的形態學方法難以滿足口岸檢疫以及水果和種苗調運過程中對新菠蘿灰粉蚧快速識別與鑒定的現實需求，尤其當截獲的樣本為若蟲或殘體時，而新菠蘿灰粉蚧的快速準確識別是有效阻止其進一步傳播擴散的必要前提。

發明內容

本發明的目的是提供一種鑒定新菠蘿灰粉蚧的引物對及其應用。

本發明提供一種引物對，由引物D.neo-28SF和引物D.neo-28SR組成；

所述引物D.neo-28SF為如下(a1)或(a2)：

(a1)序列表的序列1所示的單鏈DNA分子；

(a2)將序列1經過一個或幾個核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且與序列1具有相同功能的DNA分子；

所述引物D.neo-28SR為如下(a3)或(a4)：

(a3)序列表的序列2所示的單鏈DNA分子；

(a4)將序列2經過一個或幾個核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且與序列2具有相同功能的DNA分子。

所述引物對的用途為如下(b1)或(b2)或(b3)或(b4)：

(b1)鑒定或輔助鑒定待測昆蟲是否為新菠蘿灰粉蚧；

(b2)制備用于鑒定或輔助鑒定待測昆蟲是否為新菠蘿灰粉蚧的試劑盒；

(b3)檢測待測生物樣本中是否含有新菠蘿灰粉蚧；

(b4)制備用于檢測待測生物樣本中是否含有新菠蘿灰粉蚧的試劑盒。

本發明還保護含有所述引物對的試劑盒；所述試劑盒的用途為如下(c1)或(c2)：

(c1)鑒定或輔助鑒定待測昆蟲是否為新菠蘿灰粉蚧；

(c2)檢測待測生物樣本中是否含有新菠蘿灰粉蚧。

本發明還保護所述試劑盒的制備方法，包括將各條引物單獨包裝的步驟。