[發(fā)明專利]一種利用水稻內(nèi)生泛菌和小球藻共培養(yǎng)提高小球藻油脂產(chǎn)率的方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201610156256.0
• 申請(qǐng)日: 2016-03-17
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN105755091B
• 公開(kāi)（公告）日: 2019-05-14
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 趙艷;史玉倩
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 浙江工商大學(xué)
• 主分類號(hào): C12P39/00
• 分類號(hào): C12P39/00;C12P7/64;C12R1/01;C12R1/89
• 代理公司: 杭州天勤知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 33224
• 代理人: 陳升華

本發(fā)明公開(kāi)了一種利用水稻內(nèi)生泛菌和小球藻共培養(yǎng)提高小球藻油脂產(chǎn)率的方法，包括：1)將水稻內(nèi)生泛菌和小球藻在光照下進(jìn)行菌藻共培養(yǎng)，培養(yǎng)結(jié)束后，得到菌藻共培養(yǎng)液；2)對(duì)菌藻共培養(yǎng)液進(jìn)行細(xì)胞分離，得到小球藻細(xì)胞沉淀和內(nèi)含水稻內(nèi)生泛菌的上清菌液，將小球藻細(xì)胞沉淀經(jīng)處理后得到小球藻細(xì)胞干品；3)將小球藻細(xì)胞干品粉碎，得到藻粉，之后采用有機(jī)溶劑提取液提取總油脂，得到總油脂。本發(fā)明利用水稻內(nèi)生泛菌和小球藻共培養(yǎng)，從而促進(jìn)小球藻的生長(zhǎng)，提高了小球藻生物量，同時(shí)也提高了油脂含量與油脂產(chǎn)率。本發(fā)明方法操作簡(jiǎn)單，在小球藻的應(yīng)用開(kāi)發(fā)方面效益顯著，前景廣闊。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及微生物和生物技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種利用水稻內(nèi)生泛菌和小球藻共培養(yǎng)提高小球藻油脂產(chǎn)率的方法。

背景技術(shù)

小球藻是一種單細(xì)胞綠藻，其環(huán)境適應(yīng)性強(qiáng)，易于大規(guī)模培養(yǎng)，細(xì)胞中含有豐富的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，可應(yīng)用于食品開(kāi)發(fā)、醫(yī)療保健品、美容和藥品開(kāi)發(fā)等各個(gè)領(lǐng)域。小球藻富含短鏈脂肪酸，是優(yōu)質(zhì)的生物柴油原料(徐進(jìn),等.高產(chǎn)油小球藻的篩選及其油脂分析.水生生物學(xué)報(bào),2012,36(3):426-432.)，而且小球藻所產(chǎn)油脂中的亞油酸和γ-亞麻酸等具有調(diào)節(jié)血脂、降血黏等功效[張旗，等.小球藻營(yíng)養(yǎng)活性研究進(jìn)展.食品研究與開(kāi)發(fā),2015,36(13):139-142.]。提高小球藻生物量和促進(jìn)藻細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的合成是開(kāi)發(fā)應(yīng)用小球藻的技術(shù)關(guān)鍵。已有研究表明微藻和微生物之間存在從寄生到共生等廣泛的互作現(xiàn)象，某些微生物對(duì)藻細(xì)胞的生長(zhǎng)代謝影響顯著(Ueda H,et al..Bacterial communities constructed inartificial consortia of bacteria and Chlorella vulgaris.Microbes Environment,2010,25(1):36-40.)。

植物內(nèi)生菌是能夠定殖在健康植物內(nèi)，并與宿主植物建立和諧共生關(guān)系的一類微生物。水稻植株含有許多內(nèi)生微生物，是重要的內(nèi)生細(xì)菌資源，來(lái)源于水稻植株的內(nèi)生泛菌可以顯著提高宿主水稻的生物量、葉綠素及磷含量，并影響光合作用產(chǎn)物的轉(zhuǎn)移(FengY,etal.Rice endophyte Pantoea agglomeransYS19 promotes hostplant growth andaffects allocations of hostphotosynthates.Journal ofApplied Microbiology,2006,100(5):938-945.劉佳,等.內(nèi)生成團(tuán)泛菌HAUM1對(duì)宿主水稻的定殖及促生作用.湖北農(nóng)業(yè)科學(xué),2011,50(23):4820-4824.)。由于小球藻與植物細(xì)胞一樣具有葉綠體，能夠進(jìn)行光合作用，其生化代謝特征與植物具有相似性，理論上，對(duì)植物具有代謝調(diào)節(jié)作用的植物內(nèi)生菌也能影響小球藻的生長(zhǎng)和代謝活動(dòng)，但迄今國(guó)內(nèi)外未見(jiàn)采用包括水稻內(nèi)生菌在內(nèi)的植物內(nèi)生菌促進(jìn)小球藻生長(zhǎng)及生化組分合成積累的技術(shù)研究和應(yīng)用。

申請(qǐng)公布號(hào)CN 103045481 A(申請(qǐng)?zhí)枮?01310004747.X)的中國(guó)發(fā)明專利申請(qǐng)公開(kāi)了一種促進(jìn)小球藻生長(zhǎng)并提高其葉綠素和菌體蛋白含量的方法，該技術(shù)方案是在小球藻培養(yǎng)液中添加來(lái)自生物質(zhì)熱解的內(nèi)醚糖或經(jīng)脫毒處理的纖維素?zé)峤庖海瑑?nèi)醚糖添加量為5mM-50mM，纖維素?zé)峤庖禾砑恿堪粗亓坑?jì)為0.25％-2％。以纖維素生物質(zhì)高溫?zé)峤猱a(chǎn)物內(nèi)醚糖或熱解液作為促進(jìn)劑，結(jié)果表明：內(nèi)醚糖或熱解液能明顯促進(jìn)小球藻的生長(zhǎng)，促進(jìn)率最高達(dá)194％，并可顯著提高葉綠素和菌體蛋白含量，從而可提高纖維素生物質(zhì)的利用價(jià)值。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明提供了一種利用水稻內(nèi)生泛菌和小球藻共培養(yǎng)提高小球藻油脂產(chǎn)率的方法，該方法能夠提高小球藻生物量、油脂含量與油脂產(chǎn)率。

一種利用水稻內(nèi)生泛菌和小球藻共培養(yǎng)提高小球藻油脂產(chǎn)率的方法，包括：

1)將水稻內(nèi)生泛菌和小球藻在光照下進(jìn)行菌藻共培養(yǎng)，培養(yǎng)結(jié)束后，得到菌藻共培養(yǎng)液；

2)對(duì)菌藻共培養(yǎng)液進(jìn)行細(xì)胞分離，得到小球藻細(xì)胞沉淀和內(nèi)含水稻內(nèi)生泛菌的上清菌液，將小球藻細(xì)胞沉淀經(jīng)處理后得到小球藻細(xì)胞干品；