[發(fā)明專利]以大豆分離蛋白為基底物制備的多肽鐵螯合物及制備方法

在審

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• 申請日: 2016-03-17
• 公開（公告）號: CN105746907A
• 公開（公告）日: 2016-07-13
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 郭子好;方華;季春源;朱校適;孫中超
• 申請（專利權(quán)）人: 上海源耀生物股份有限公司
• 主分類號: A23K20/147
• 分類號: A23K20/147;A23K20/20;A23K10/12;A23K10/18
• 代理公司: 上海申新律師事務(wù)所 31272
• 代理人: 俞滌炯

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及飼料生產(chǎn)領(lǐng)域，具體涉及一種以大豆分離蛋白為基底物制備的多肽鐵螯合物及制備方法。

背景技術(shù)

鐵是動物體所必須的微量元素之一，制造血紅素、肌紅蛋白和細(xì)胞色素都必須依賴鐵。嚴(yán)重缺鐵時不僅發(fā)生貧血，也可引起體內(nèi)含鐵的酶類缺乏，導(dǎo)致細(xì)胞呼吸發(fā)生障礙，影響組織器官的功能，臨床上可發(fā)生胃腸道、循環(huán)、神經(jīng)等系統(tǒng)的功能障礙(林萍,2004)。傳統(tǒng)上用于豬料的補(bǔ)鐵劑以無機(jī)鐵(如硫酸亞鐵、氯化亞鐵)為主，無機(jī)鐵在消化過程中釋放出的游離金屬離子容易與腸道內(nèi)的一些抗?fàn)I養(yǎng)因子(如植酸、草酸、磷酸根離子)結(jié)合生成不溶性鹽或沉淀排除體外，從而降低金屬離子的吸收。

氨基酸絡(luò)合鐵和無機(jī)鐵相比有很好多處，但由于氨基酸較單一，同一種氨基酸在吸收的時候也會受到限制，營養(yǎng)和吸收兩方面都沒有達(dá)到最佳；多肽螯合鐵不僅具有氨基酸絡(luò)合鐵的優(yōu)點，多肽物質(zhì)中的氨基酸組成較為均衡，且相對氨基酸絡(luò)合物來說比較穩(wěn)定，在胃腸道中不易解離，容易被機(jī)體所吸收。Carlson等研究結(jié)果認(rèn)為，多肽螯合鐵可以利用小肽的吸收通道完整地通過小腸黏膜進(jìn)入血漿，被非常有效的吸收并轉(zhuǎn)運到靶器官(Carlsonetal,2004)。大量研究表明，在不同動物中使用多肽螯合鐵均可提高動物的生長、繁殖性能，提高動物抵御疾病的能力。

目前，已有利用酶解一些蛋白下腳料或是豆粕棉籽粕制備多肽或小肽螯合鐵的方法，但這些方法中存在許多問題，這些問題最終將導(dǎo)致產(chǎn)品質(zhì)量問題。如專利一種小肽螯合微量元素飼料添加劑及其生產(chǎn)工藝(公開號：102657285A)，其使用的水解蛋白廢液中氨基酸不平衡，重金屬會超標(biāo)，使用pH8.0進(jìn)行螯合，產(chǎn)品中有相當(dāng)一部分會以氫氧化鐵的形式存在，噴霧干燥溫度過高，影響產(chǎn)品質(zhì)量；專利一種小肽螯合鐵復(fù)合物的制備方法與應(yīng)用(公開號：102827908A)，其使用發(fā)酵酶解豆粕等蛋白原料后與金屬鹽進(jìn)行螯合，后期沒用特別處理，混合物中的多肽分子量分布廣，生產(chǎn)過程不容易控制，產(chǎn)品穩(wěn)定性差，有效多肽含量低等，這些問題急需進(jìn)行修改；專利以豆粕為基料制配的小肽螯合物及其制配方法(公開號：102669418A)，其使用豆粕作為基底物，后期獲得的多肽含量較少，成品中多肽螯合鐵的含量較低。

現(xiàn)有技術(shù)生產(chǎn)的多肽螯鐵生產(chǎn)工藝較簡單，成品質(zhì)量不穩(wěn)定，成品中的螯合鐵含量低，有些產(chǎn)品質(zhì)量較差，產(chǎn)品味道不佳，且價格昂貴，這些問題都亟待解決。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明為解決現(xiàn)有技術(shù)中的上述問題，提供一種以大豆分離蛋白(Soyproteinisolate，簡稱SPI，蛋白含量90％以上)為基底物制備的多肽鐵螯合物，它是綜合利用SPI首先經(jīng)乳酸菌和酵母菌發(fā)酵，給物料提供特有的發(fā)酵香味和較高的誘食性，然后經(jīng)復(fù)合蛋白酶和風(fēng)味蛋白酶進(jìn)行酶解得到大量多肽、小肽和游離氨基酸，利用超濾得到分子量≤2000Da的多肽，并用納濾膜進(jìn)行脫鹽，再以多肽和無機(jī)鐵鹽溶液進(jìn)行螯合，最后經(jīng)噴霧干燥獲得成品。利用該方法得到的多肽螯合鐵純度高，含量高，質(zhì)量穩(wěn)定，是一種螯合率高，使用效果好，綜合性優(yōu)越的微量元素小肽螯合鐵，并且整個反應(yīng)過程解決了現(xiàn)有的技術(shù)不足的地方。

本發(fā)明還提供了一種多肽鐵螯合物具有大量的功能性多肽，且具有較濃的發(fā)酵香味和較強(qiáng)的誘食性。

為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用以下技術(shù)方案：

本發(fā)明的第一個方面是提供一種以大豆分離蛋白為基底物制備多肽鐵螯合物的方法，以大豆分離蛋白為基料，經(jīng)過發(fā)酵、酶解、納濾、螯合和干燥，以大豆分離蛋白經(jīng)發(fā)酵酶解過濾后產(chǎn)生的多肽為螯合劑制得的多肽鐵螯合物，具體的包括以下步驟：

1)將大豆分離蛋白、超微粉的豆粕和葡萄糖按重量比為85：(5-10)：(5-10)混合均勻，配制成培養(yǎng)基，滅菌；

2)將乳酸菌與酵母菌按重量比1：2-1：4，接種濃度為4×10⁷-9×10⁷cfu/ml，料水重量比1：1.2-1：2.5配制成三級擴(kuò)培菌種，加入到步驟1)滅菌后的培養(yǎng)基中，混合均勻，于37-42℃發(fā)酵36-48h；

3)將復(fù)合蛋白酶與風(fēng)味蛋白酶按重量比1：1-1：2.5混合，復(fù)合蛋白酶和風(fēng)味蛋白酶的總加入量為300-500U/g大豆分離蛋白，再與水混合后加入到步驟2)已發(fā)酵好的物料中，混合后物料的固含物含量為12％-15％，pH值控制在6.0-8.5，升溫至42-45℃酶解12-16h；

4)將步驟3)酶解后的物料采用截留分子量為2000Da的超濾膜進(jìn)行超濾，然后使用納濾膜進(jìn)行納濾，納濾除去一些鹽類和游離氨基酸，得多肽液；