[發明專利]去泛素化酶USP13在制備預防或者治療乳腺癌的藥物中的用途

在審

• 申請號: 201610153004.2
• 申請日: 2016-03-17
• 公開（公告）號: CN105749262A
• 公開（公告）日: 2016-07-13
• 發明（設計）人: 李昀輝;袁健;羅坤甜;吳晨明;尹玉嬌;李磊;陳玉平;王藝朵
• 申請（專利權）人: 上海市東方醫院
• 主分類號: A61K38/48
• 分類號: A61K38/48;A61P35/00
• 代理公司: 上海申匯專利代理有限公司 31001
• 代理人: 林煒

技術領域

本發明屬于生物醫藥領域，涉及一種治療乳腺癌的藥物，具體來說是一種去泛素化酶USP13在制備預防或者治療乳腺癌的藥物中的用途。

背景技術

1990年，研究發現了一種直接與遺傳性乳腺癌有關的基因BRCA1，它位于人體細胞核的第17號染色體上。如果BRCA1基因的結構發生突變，它所具有的抑制腫瘤發生的功能就會受影響，使人罹患乳腺癌和卵巢癌的風險增加。研究顯示，BRCA1基因突變者，患乳腺癌和卵巢癌的風險分別是50%-85%和15%-45%，而在普通人群中，約12.0％的女性可能患乳腺癌，BRCA1基因突變讓乳腺癌風險升高的4-7倍。卵巢癌方面，只有1.4％的普通女性有卵巢癌風險，BRCA1基因突變使卵巢癌風險增加10倍以上。

BRCA1是一種具有抑制惡性腫瘤發生的基因，在調節人體細胞的復制、遺傳物質DNA損傷修復、細胞的正常生長方面有重要作用，DNA損傷應答機制與癌癥的發生發展密切相關。BRCA1或BRCA2的突變會顯著削弱細胞的損傷應答的修復能力，引起基因組不穩定甚至癌變。

泛素—蛋白酶體途徑是細胞內重要的蛋白質降解調節系統，在細胞對損傷應答修復能力具有關鍵的調控作用。泛素通過對底物蛋白的多聚泛素化并經蛋白酶體降解，該途徑也是一個被嚴格調控的可逆過程，泛素化的可逆過程即去泛素化主要通過去泛素化酶進行調節。去泛素化酶通過逆向調控泛素化參與泛素介導的多種生物學過程，包括腫瘤生長、炎癥過程、細胞周期調節、免疫反應等眾多疾病密切相關的過程。去泛素化酶也參與調控DNA損傷應答信號通路的多個方面。但迄今為止，尚無研究系統地闡述去泛素化酶如何調控BRCA1蛋白功能并影響乳腺癌發生發展。因此，深入剖析去泛素化酶調控DNA損傷應答，并對BRCA1基因進行調控，將有助于理解乳腺癌的發病機制，為乳腺癌治療藥物的開發提供理論基礎。

發明內容

針對現有技術中的上述技術問題，本發明提供了一種去泛素化酶USP13在制備預防或者治療乳腺癌的藥物中的用途，所述的這種用途解決了現有技術中的藥物治療乳腺癌效果不佳的技術問題。

本發明提供了一種去泛素化酶USP13在制備預防或者治療乳腺癌的藥物中的用途。

進一步的，所述的去泛素化酶USP13的氨基酸序列如SEQIDNO:2所示。

進一步的，編碼所述的去泛素化酶USP13的堿基序列如SEQIDNO:1所示。

本發明和已有技術相比，其技術進步是顯著的。本發明的去泛素化酶USP13通過對BRCA1基因的調控，從而有效的影響乳腺癌的發展，達到治療和預防乳腺癌的效果。

附圖說明

圖1A顯示經過CRISPR-Cas9系統敲除USP13的U2OS細胞株經過篩選后，已穩定消減USP13。

圖1B顯示敲除USP13對其他DNA損傷關鍵蛋白形成Foci的能力沒有影響。

圖1C顯示通過Western檢測證明，敲除USP13的U2OS細胞株已經成功回補USP13野生型，和USP13泛素化突變缺失型。

圖1D顯示在敲除USP13的細胞中回補USP13野生型后，BRCA1形成Foci的能力回復，但回補USP13去泛素化缺失突變型后，BRCA1在DNA損傷處的募集能力沒有恢復。

圖2顯示去泛素化酶USP13能被ATM磷酸化，使用ATM抑制劑和磷酸酶后完全抑制了USP13的磷酸化水平。

圖3顯示了在乳腺癌細胞中消減USP13，顯著增強腫瘤細胞對PARP抑制劑的敏感性，顯著提高PARP抑制劑對乳腺癌的殺傷效果；其中，A為在乳腺癌細胞MDA-231中消減USP13，對PARA抑制劑的敏感性顯著提高；B為在乳腺癌細胞MCF7中消減USP13，對PARA抑制劑的敏感性顯著提高。

圖4顯示通過Western檢測證明，去泛素化酶USP13在乳腺癌組織中高表達。

圖5顯示通過IHC檢測證明，去泛素化酶USP13在乳腺癌組織中高表達，并且與預后數據高度相關；其中，A為在乳腺癌組織和正常組織中USP13的免疫組化染色分級情況，Score0-1為陰性，Score2-3為陽性；B為在乳腺癌組織和正常組織中USP13的免疫組化染色情況的數據統計；C為USP13在乳腺癌組織和正常組織中的表達情況與相對應樣本的腫瘤分化情況顯著相關；D為USP13在乳腺癌組織和正常組織中的表達情況與相對應樣本的腫瘤TNM值顯著相關。

具體實施方式