[發明專利]一株特基拉芽孢桿菌及其應用

有效

• 申請號: 201610151411.X
• 申請日: 2016-03-16
• 公開（公告）號: CN105733986B
• 公開（公告）日: 2020-04-07
• 發明（設計）人: 李崎;朱林江;范子豪;劉春鳳;鄭飛云;王金晶;李永仙;王佳琪
• 申請（專利權）人: 江南大學
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;A23L29/00;C12R1/07
• 代理公司: 哈爾濱市陽光惠遠知識產權代理有限公司 23211
• 代理人: 耿曉岳

本發明公開了一株特基拉芽孢桿菌及其應用，屬于發酵技術領域。所述特基拉芽孢桿菌已于2016年1月21日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏編號為CGMCC No.12092，保藏地址為北京市朝陽區北辰西路1號院3號，中國科學院微生物研究所。該菌株具有較好的抑菌性能，能有效地控制豆瓣醬發酵過程中蠟狀芽孢桿菌的生長，而蠟狀芽孢桿菌是一種潛在病原菌。

技術領域

本發明涉及一株特基拉芽孢桿菌及其應用，屬于發酵技術領域。

背景技術

芽孢桿菌的菌體呈桿狀，形態為長直或接近直，大小為0.3～2.2×1.2～7.0微米。多數運動，鞭毛典型側生。菌體可形成耐熱內生孢子，在一個孢子囊細胞中，孢子不多于1個。菌體暴露在空氣中并不妨礙孢子的形成，革蘭氏反應陽性，僅在生長早起可能出現陰性。有機化能營養，可利用多種底物進行嚴格呼吸代謝，嚴格發酵代謝或者呼吸和發酵二者兼有的代謝。在呼吸代謝中，最終的電子受體是分子氧，在一些種中可以用硝酸鹽代替氧，大多數的種可以產生氫氧化物酶。嚴格好氧或兼性厭氧。

特基拉芽孢桿菌是芽孢桿菌屬中的一個種，呈桿狀，很少成鏈，染色均勻，鞭毛側生。內生孢子的大小為0.8×1.5～1.8微米，游離孢子的表面著色較弱，萌發時芽孢殼赤道裂，營養細胞露出后，孢子殼消解緩慢。菌落形態為圓形或不規則形，菌落直徑2～4mm，邊緣粗糙。菌落表面粗糙褶皺，白色不透明。最適生長溫度為28～30℃，最適生長pH在5.5到8.5之間。該種可產生多肽抗菌素，一個菌株可產生一種或多種抗菌素，釋放對菌體有溶菌作用的酶。

蠶豆醬是以蠶豆等為原料發酵釀制而成的保持蠶豆醬原形的半流動粘稠體或半固態調味品。蠶豆醬在我國有著悠久的歷史，營養豐富，味道鮮美，有助消化，增進食欲，因此深受廣大消費者的歡迎。然而，在蠶豆醬的發酵制備過程中，常因醬醅中有害微生物的繁殖，而破壞發酵過程，影響醬體的風味，甚至產生不利于身體健康的有害物質。

發明內容

本發明提供了一株特基拉芽孢桿菌(Bacillus tequilensis)。

所述特基拉芽孢桿菌(Bacillus tequilensis)，已于2016年1月21日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏編號為CGMCC No.12092，保藏地址為北京市朝陽區北辰西路1號院3號，中國科學院微生物研究所。

本發明所述的特基拉芽孢桿菌分離自安徽某知名醬品傳統方法釀制的醬醅，該菌株具有典型特征的M13-PCR指紋，即菌株專一性的特征指紋，如圖1所示；測序分析，其16srDNA序列基因型如SEQ ID NO.1所示，NCBI登錄號為KT982222。

所述特基拉芽孢桿菌對蠟狀芽孢桿菌具有較明顯的抑制作用。其基因組內存在編碼細菌素Subtilosin以及制磷脂菌素Plipastatin的基因。

所述特基拉芽孢桿菌為從風味口感較佳的傳統方法釀制的豆瓣醬醬醅中篩選得到的，其保藏條件如下：從生長良好的LB培養基平板中取單菌落移入新鮮的液體LB培養基中，37℃搖床培養24h，取1.3mL菌液移入盛有0.5mL無菌甘油(40％，v/v)的甘油管中，放-80℃冰箱保存。

所述LB培養基為：蛋白胨1％；酵母粉0.5％；NaCl 1％；pH自然。

所述特基拉芽孢桿菌的培養條件為：將甘油管保藏的特基拉芽孢桿菌接入LB液體培養基，在37℃、180rpm搖瓶培養24h即可到達對數期中后期。

本發明還提供了一種所述特基拉芽孢桿菌的應用，用于抑制發酵過程中醬醅中蠟狀芽孢桿菌等潛在病原菌的生長。

本發明提供的特基拉芽孢桿菌是蠶豆醬發酵過程中的無害菌，對醬醅中有害微生物的抑制有一定的作用，可用于抑制豆瓣醬生產過程中的有害菌。

生物材料保藏