[發明專利]一種剖腹產防宮腔粘連專用透明質酸鈉凝膠的制備方法

在審

• 申請號: 201610151215.2
• 申請日: 2016-03-17
• 公開（公告）號: CN105617467A
• 公開（公告）日: 2016-06-01
• 發明（設計）人: 張靜;張帆;林大偉
• 申請（專利權）人: 張靜
• 主分類號: A61L31/04
• 分類號: A61L31/04;A61L31/00;A61L31/14
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明公開了一種剖腹產防宮腔粘連專用透明質酸鈉凝膠的制備方法，屬于凝膠制備技術領域。

背景技術

宮腔粘連系指子宮腔、子宮峽部及子宮頸管因宮腔手術操作或放射、感染等原有造成的腔壁相互粘連，臨床可表現為腹痛、月經減少或閉經、不孕以及習慣性流產等，任何引起子宮內膜破壞的因素均可導致宮腔粘連，宮腔鏡電切除術不同程度地破壞子宮內膜，術后易發生宮腔粘連。剖宮產后引起組織粘連，主要包括腸管漿膜損傷相互粘連以及子宮切口部位與腹壁粘連，形成粘連后，不但影響腸蠕動功能的恢復，延長排氣時間，而且由于粘連的牽拉、收縮和壓迫，引起消化功能障礙，出現腹脹腹痛，同時也給再次開腹手術帶來一定的困難，嚴重影響了產婦的生活質量。

腹腔粘連發生決定于纖維蛋白的形成，正常生理狀態下的腹膜纖維蛋白溶解與沉積之間有著動態平衡，剖宮產后早期，胃腸運動減慢，局部組織受損、缺血，腹膜發生防御性炎癥反應。宮腔粘連行分離手術后，宮腔內膜修復需要一定時間，在此期間再次粘連仍可能發生，宮腔粘連的治療原則是去除粘連、恢復解剖結構的同時防止粘連的再次形成。

由于宮腔粘連對女性危害較大，已經有很多材料應用于預防宮腔粘連，透明質酸就是其中一種，透明質酸是人體內一種固有的成分，是一種葡聚糖醛酸，沒有種屬特異性，廣泛存在于胎盤、羊水、晶狀體、關節軟骨、皮膚真皮層組織中，具有預防盆、腹腔粘連的作用，但透明質酸在宮腔停留時間短，易被透明質酸酶以及自由基降解，難以達到預防宮腔粘連的作用。

透明質酸鈉是由N-乙酰葡萄糖醛酸反復交替而形成的一種高分子多醣體生物材料，具有高度的黏彈性、可塑性以及良好的生物相容性，在預防粘連和修復軟組織方面有明顯作用。本發明則從這一方面進行研究。

發明內容

本發明主要解決的技術問題：針對目前在預防宮腔粘連的過程中，使用的透明質酸雖具有預防盆、腹腔粘連作用，但是在宮腔中停留的時間短，容易被體內透明質酸酶以及自由基降解，難以達到預防宮腔粘連作用的現狀，提供了一種以眼球玻璃體為原料，除蛋白純化后透析濃縮干燥制得透明質酸鈉粉，再從茶葉中提取茶多酚作為自由基清除劑，肝素鈉作抗酶解添加劑，三者復配，從而得到剖腹產防宮腔粘連專用透明質酸鈉凝膠的制備方法。該方法操作簡便，方法獨特，利用提取透明質酸制得透明質酸鈉凝膠，并加入抗酶解劑以及自由基清除劑，使得制得的透明質酸鈉凝膠生物穩定性良好，不易被透明質酸酶和自由基降解，具有顯著的預防宮腔粘連的作用。

為了解決上述技術問題，本發明所采用的技術方案是：

（1）稱取1～2kg牛眼球玻璃體放入10L搪瓷罐中，按固液比為1:2再向罐中加入濃度為0.5mol/L燒堿溶液，于60～70℃水浴條件下攪拌浸提20～30min后，再加入1～2L質量濃度為10%三氯乙酸，用濃度為30%氫氧化鉀溶液調節pH至7.0～7.5，保溫反應1～2h去除雜蛋白，得混合液；

（2）將上述混合液裝入透析袋，放置在流動去離子水中透析過夜，打開透析袋取出袋內透析物過濾，去除濾渣得濾液，再將得到濾液加熱至80～90℃滅菌處理10～15min，以10mL/min速率向濾液中滴加無水乙醇，直至再無沉淀產生，離心分離得到沉淀物后，經噴霧干燥，研磨后得透明質酸鈉粉末，備用；

（3）稱取300～400g新鮮茶葉，先放入剛玉研缽中研磨成糊狀物，之后將糊狀物移入陶瓷酶解罐中，按料液比為1:30向罐內加入質量濃度為80%乙醇，再加入酶解底物總質量2.0～3.0%復合植物水解酶，用濃度為0.3mol/L磷酸溶液調節pH至4.0～5.0，于35～45℃下保溫酶解3～5h；

（4）待酶解完成后，過濾去除濾渣得酶解液，將得到的酶解液放入臥式離心機，在4000～5000r/min轉速下離心10～15min分離得到上清液，再將上清液放入旋轉蒸發器，于80～85℃下旋蒸濃縮去除多余乙醇，得到自制自由基清除劑，備用；

（5）稱取10～20g肝素鈉和5～10g色甘酸鈉溶于200～300mL去離子水中，移入超聲分散儀，在100～200W功率下超聲分散20～30min，直至兩者完全溶解，得抗酶解添加劑；