[發明專利]miRNA在制備藥物性心臟病生物標志物中的用途

在審

• 申請號: 201610150851.3
• 申請日: 2016-03-16
• 公開（公告）號: CN105713972A
• 公開（公告）日: 2016-06-29
• 發明（設計）人: 許錦文;王淑榮;凌霜;陳小淼
• 申請（專利權）人: 上海中醫藥大學
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68;C12N15/113
• 代理公司: 上海精晟知識產權代理有限公司 31253
• 代理人: 馮子玲

技術領域

本發明屬于生物技術領域，特別是涉及一種miRNA(microRNA)在制備藥物性心臟病生物標志物中的用途。

背景技術

廣義而論，凡由于藥物直接或間接的心肌毒性所導致的心臟病變，無論是因藥物對心肌電生理的影響而引起的心肌除極和復極的異常或各種心律失常，或心肌的收縮性因藥物的毒性作用而受到抑制，進而誘發或加重的心力衰竭，或因對某種藥物過敏而導致心肌炎、心包炎，均可稱之為藥物性心臟病(drug-inducedheartdiseases)。與其他藥源性疾病一樣，藥物性心臟病可由于藥物本身、用藥的醫師和受治的病人三方面的原因所促成，但通常藥物本身和藥物相互作用是引起病變的主導因素。藥物累及心臟者主要是對心肌的損害，但少數藥物也累及心包和心內膜。

雷公藤(TripterygiumwilfrdiiHook.f.)又名黃藤、黃藤木、典蠟藤、斷腸草等,屬于衛茅科木質藤本植物。其英文名：CommonThreewingnutRoot，拉丁名：RadixTripterygiiWilfordiiTripterygiumwilfordiiHooK.f。文獻資料記載其味苦、辛，性涼，大毒，歸肝、腎經。具有祛風除濕、活血通絡、消腫止痛、殺蟲解毒等功效。雷公藤的根、頸、葉均可作為藥用，主要藥用部位為其根。臨床應用中發現，雷公藤制劑治療類風濕關節炎的機制與皮質激素類相似，但沒有激素類的副作用，耐受性好，臨床應用前景廣闊。然而近年來的研究發現，雷公藤可導致中毒性心肌炎，引起心肌傳導障礙，嚴重者可出現心源性休克和心力衰竭。在各種雷公藤制劑導致的急性中毒性心肌損害中，又以雷公藤甲素引起的心肌損害最為嚴重。

生物標志物(Biomarker)是指可以標記系統、器官、組織、細胞及亞細胞結構或功能的改變或可能發生的改變的生化指標，具有非常廣泛的用途。生物標志物可用于疾病診斷、判斷疾病分期或者用來評價新藥或新療法在目標人群中的安全性及有效性。目前臨床上診斷心功能的生化指標已被廣泛應用于藥物心臟毒性的檢測。其中，心肌肌鈣蛋白I(cTnI)是一種心肌細胞所特有的，僅存在于心室肌和心房肌中的蛋白。cTnI的分子量為22ku，血清半衰期為2h左右。cTnI在心肌內約有3％～6％以游離形式存在于胞漿中，其余部分則以結合形式存在于肌原纖維中。正常人血清中cTnI的含量很少，在急性心肌梗塞(AMI)發病后，血清cTnI多于3～6h開始升高，10～24h達高峰，5～7d恢復正常。與心肌肌酸激酶MB(CK-MB)相比，cTnI在心肌中含量較多，分子量偏小，心肌損傷后易在血清中被測出，故而其較為敏感，可用于檢出心肌的微小損傷。

miRNA(microRNA)是一類新發現的非編碼單鏈小分子RNA，約22個核苷酸長度，通過識別特定的目標mRNA，與靶mRNA的3′非翻譯區(3′-untranslatedregion，3′-UTR)互補配對，進行蛋白翻譯抑制或降解mRNA。miRNA廣泛參與機體的生長發育、細胞的代謝、增殖、分化和凋亡，參與了肝損傷、腫瘤形成、心血管疾病等多種病理過程。因此，正常機體內miRNA的變化也指示著機體正常生理功能的改變，乃至病變的發生。已有700多種miRNA被發現，收載于miRBase數據庫，目前miRNA已成為生命科學界研究的熱點。已有研究人員對腫瘤、心腦血管疾病等多種病癥進行了以miRNA為診斷指標和治療靶點為目的的研究，并取得了一些進展。由于血漿、組織等生物樣本中的miRNA在室溫、高溫、不同pH、多次凍融后仍能檢測到，并且含量變化不大，而此時大多數RNA、蛋白質、酶都會降解、失活，因此miRNA的穩定性；快速、高通量的miRNA芯片檢測技術；miRBase數據庫的日益完善，為其作為心肌毒性生物標志物進行檢測提供了可能。

發明內容

本發明的目的旨在提供一種miRNA在制備藥物性心臟病生物標志物中的用途。

如本發明所用，大鼠的miR-15a-3p是一段成熟的miRNA(miRNA，microRNA)序列，其堿基序列為：5'-AGGCCAUAUUGUGCUGCCUCA-3'(SEQIDNo.1)。

大鼠的miR-483-3p是一段成熟的miRNA(miRNA，microRNA)序列，其堿基序列為：5'-CACUCCUCCCCUCCCGUCUUGU-3'(SEQIDNo.2)。

大鼠的miR-127-5p是一段成熟的miRNA(miRNA，microRNA)序列，其堿基序列為：5'-CUGAAGCUCAGAGGGCUCUGAUU-3'(SEQIDNo.3)。