[發明專利]一種檢測弓形蟲和新孢子蟲抗體的二聯膠體金試紙條

在審

• 申請號: 201610147064.3
• 申請日: 2016-03-15
• 公開（公告）號: CN105785031A
• 公開（公告）日: 2016-07-20
• 發明（設計）人: 劉群;南匯珠;劉晶
• 申請（專利權）人: 中國農業大學
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68;G01N33/569;G01N33/558
• 代理公司: 北京紀凱知識產權代理有限公司 11245
• 代理人: 關暢;白艷

1.一種檢測弓形蟲和/或新孢子蟲的二聯膠體金試紙條，包括底板和放置在其上的樣 品墊、包被有金標蛋白的金標墊、含有檢測線T1、檢測線T2和質控線C的檢測墊和吸水墊；

所述檢測線T1由NcSRS2蛋白溶液形成；

所述檢測線T2由TgGRA1蛋白溶液形成；

所述NcSRS2蛋白為如下d或e或f：

d)序列表中序列4所示的蛋白質；

e)在序列4所示的蛋白質的N端和/或C端連接標簽得到的融合蛋白質；

f)將d)或e)所示的氨基酸序列經過一個或幾個氨基酸殘基的取代和/或缺失和/或添 加且具有相同功能由序列4衍生的蛋白質；

所述TgGRA1蛋白為如下a或b或c：

a)序列表中序列2所示的蛋白質；

b)在序列2所示的蛋白質的N端和/或C端連接標簽得到的融合蛋白質；

c)將a)或b)所示的氨基酸序列經過一個或幾個氨基酸殘基的取代和/或缺失和/或添 加且具有相同功能由序列2衍生的蛋白質。

2.根據權利要求1所述的二聯膠體金試紙條，其特征在于：

所述TgGRA1蛋白溶液中TgGRA1蛋白的濃度為2mg/ml；

所述NcSRS2蛋白溶液中NcSRS2蛋白的濃度為1mg/ml。

3.根據權利要求1或2所述的二聯膠體金試紙條，其特征在于：

所述金標蛋白為膠體金標記的SPA蛋白。

4.根據權利要求1-3中任一所述的二聯膠體金試紙條，其特征在于：

所述質控線C由IgG蛋白或IgG蛋白溶液形成；

所述IgG蛋白具體為豬IgG蛋白；

所述豬IgG蛋白溶液的濃度尤其具體為1mg/ml。

5.一種制備權利要求1-4中任一所述的二聯膠體金試紙條的方法，包括如下步驟：

1)制備包被有金標蛋白的金標墊和含有檢測線T1、檢測線T2和質控線C的硝酸纖維素 膜；

所述包被有金標蛋白的金標墊按照如下方法制備：將膠體金溶液和SPA蛋白混勻，反 應，得到金標蛋白；再將所述金標蛋白加到玻璃纖維素膜上，得到包被有金標蛋白的金標 墊；

所述含有檢測線T1、檢測線T2和質控線C的硝酸纖維素膜為將權利要求1-4中任一中的 所述NcSRS2蛋白溶液、TgGRA1蛋白溶液和所述IgG蛋白溶液分別包被在酸纖維素膜上，形成 含有檢測線T1、檢測線T2和質控線C的硝酸纖維素膜；

2)將所述包被有金標蛋白的金標墊、樣品墊、所述含有檢測線T1、檢測線T2和質控線C 的硝酸纖維素膜和吸水墊組裝到底板上，得到所述二聯膠體金試紙條。

6.根據權利要求5所述的方法，其特征在于：

所述膠體金溶液和所述SPA蛋白的加入配比為1ml:7μg；

所述膠體金溶液中的膠體金粒徑為20nm。

7.權利要求1-4中任一中的所述TgGRA1蛋白或所述TgGRA1蛋白溶液、所述NcSRS2蛋白 或所述NcSRS2蛋白溶液或權利要求1-4中任一所述的膠體金試紙條在制備檢測或輔助檢測 弓形蟲和/或新孢子蟲產品中的應用。

8.權利要求1-4中任一中的所述TgGRA1蛋白或所述TgGRA1蛋白溶液、所述NcSRS2蛋白 或所述NcSRS2蛋白溶液或權利要求1-4中任一所述的膠體金試紙條在制備檢測或輔助檢測 待測樣本或待測動物或待測人是否感染弓形蟲和/或新孢子蟲產品中的應用。

9.根據權利要求7或8所述的應用，其特征在于：所述產品為試劑盒。