[發明專利]檢測二氯喹啉酸的酶聯免疫試劑盒及其應用

有效

• 申請號: 201610145337.0
• 申請日: 2016-03-15
• 公開（公告）號: CN105675858B
• 公開（公告）日: 2017-07-21
• 發明（設計）人: 陳黎;范子彥;李行;楊呂松;潘立寧;胡斌;唐綱嶺;劉惠民;賈芳芳;崔華鵬;樊美娟
• 申請（專利權）人: 中國煙草總公司鄭州煙草研究院;國家煙草質量監督檢驗中心;北京勤邦生物技術有限公司
• 主分類號: G01N33/535
• 分類號: G01N33/535;G01N33/577
• 代理公司: 鄭州中民專利代理有限公司41110
• 代理人: 姜振東

1.一種檢測二氯喹啉酸酶聯免疫試劑盒，其特征在于：包括包被有包被原的酶標板、二氯喹啉酸標準品溶液、二氯喹啉酸抗體、酶標二抗、底物顯色液、終止液、洗滌液以及復溶液，所述包被原為二氯喹啉酸偶聯抗原，所述酶標二抗為酶標記的二氯喹啉酸抗抗體，所述二氯喹啉酸偶聯抗原是由二氯喹啉酸半抗原與載體蛋白偶聯得到，所述二氯喹啉酸半抗原是由二氯喹啉酸與溴乙酰氯反應得到，二氯喹啉酸半抗原分子結構式為：

。

2.如權利要求1所述試劑盒，其特征在于：所述載體蛋白為鼠血清蛋白、甲狀腺蛋白、牛血清白蛋白、兔血清蛋白、人血清蛋白、卵清蛋白、血藍蛋白或纖維蛋白原。

3.如權利要求1所述試劑盒，其特征在于：所述二氯喹啉酸抗體是以二氯喹啉酸偶聯抗原作為免疫原制備獲得，所述二氯喹啉酸抗體為二氯喹啉酸單克隆抗體或二氯喹啉酸多克隆抗體。

4.如權利要求1所述試劑盒，其特征在于：所述酶標二抗的標記酶為辣根過氧化物酶或細菌提取堿性磷酸酯酶，當標記酶為辣根過氧化物酶時，底物顯色液A液為過氧化氫或過氧化脲，底物顯色液B液為鄰苯二胺或四甲基聯苯胺，終止液為1~2 mol/L的硫酸緩沖液或1~2 mol/L鹽酸緩沖液；當標記酶為細菌提取堿性磷酸酯酶時，底物顯色液為對硝基磷酸鹽緩沖液，終止液為1~2 mol/L氫氧化鈉。

5.如權利要求1所述試劑盒，其特征在于：所述洗滌液為pH值為7.4，含有0.5%~1.0%吐溫-20、0.01‰~0.03‰疊氮化鈉防腐劑、0.1~0.3 mol/L的磷酸鹽緩沖液；所述復溶液為pH值為7.0、0.02 mol/L的磷酸鹽緩沖液，洗滌液中的百分比為重量體積百分比，單位g/mL。

6.如權利要求1所述試劑盒，其特征在于：所述二氯喹啉酸標準品溶液的濃度分別為0 μg/L、0.5 μg/L，1.5 μg/L，4.5 μg/L，13.5 μg/L，40.5 μg/L。

7.一種利用權利要求1所述試劑盒檢測土壤樣品中二氯喹啉酸含量的方法，其特征在于：包括以下步驟：

（1）樣品前處理；

（2）用試劑盒進行檢測；

（3）分析檢測結果。