[發(fā)明專利]生物反應(yīng)器及其攪拌槳和使用其培養(yǎng)TIL細(xì)胞的方法有效
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 201610141281.1 | 申請(qǐng)日： | 2016-03-11 |
| 公開(kāi)（公告）號(hào)： | CN105602901B | 公開(kāi)（公告）日： | 2020-01-31 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | 王一飛;陳海佳;葛嘯虎;曾維杰 | 申請(qǐng)（專利權(quán)）人： | 廣州賽萊拉干細(xì)胞科技股份有限公司 |
| 主分類號(hào)： | C12N5/0783 | 分類號(hào)： | C12N5/0783;C12M3/00;C12M1/02 |
| 代理公司： | 11344 北京市盈科律師事務(wù)所 | 代理人： | 劉雪花 |
| 地址： | 510000 廣東省廣州市廣州*** | 國(guó)省代碼： | 廣東;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 生物反應(yīng)器 及其 攪拌 使用 培養(yǎng) til 細(xì)胞 方法 | ||
1.一種使用生物反應(yīng)器培養(yǎng)TIL細(xì)胞的方法，其特征在于，攪拌槳外包裹有減小剪切力的材料；包括以下步驟：
用X-VIVO 15培養(yǎng)基將PBMC按照1×106cells/ml的密度接種于培養(yǎng)瓶中，添加1%培養(yǎng)基體積的TNF-α溶液、IL-2溶液以及OKT-3溶液，在37℃、5%CO2條件下培養(yǎng)，每2~3天補(bǔ)充適量的培養(yǎng)基和IL-2，當(dāng)培養(yǎng)體系達(dá)到一定體積后，轉(zhuǎn)入生物反應(yīng)器中繼續(xù)培養(yǎng)至兩周；
所述TNF-α溶液的濃度為200ng/ml，IL-2溶液的濃度為300U/ml，OKT-3溶液的濃度為500U/ml；
所述減小剪切力的材料為醫(yī)用硅膠管或食用橡膠管；
當(dāng)培養(yǎng)體系大于500ml時(shí)，轉(zhuǎn)入2L生物反應(yīng)器中繼續(xù)培養(yǎng)，
所述使用生物反應(yīng)器培養(yǎng)TIL細(xì)胞的方法，在生物反應(yīng)器中培養(yǎng)TIL細(xì)胞的條件為：溶氧量為50%，pH7.2，攪拌速度為45rpm。
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C12N5-00 未分化的人類、動(dòng)物或植物細(xì)胞，如細(xì)胞系；組織；它們的培養(yǎng)或維持；其培養(yǎng)基
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C12N5-10 .經(jīng)引入外來(lái)遺傳物質(zhì)而修飾的細(xì)胞，如病毒轉(zhuǎn)化的細(xì)胞
