[發(fā)明專利]一種慢性萎縮性胃炎大鼠模型的評(píng)價(jià)方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201610141242.1
• 申請(qǐng)日: 2016-03-11
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN105651804B
• 公開(kāi)（公告）日: 2017-05-17
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 劉月濤;崔佳佳;仝家羽;胡英還;秦雪梅;杜冠華
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 山西大學(xué)
• 主分類號(hào): G01N24/08
• 分類號(hào): G01N24/08
• 代理公司: 山西五維專利事務(wù)所(有限公司)14105
• 代理人: 雷立康

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于模型的構(gòu)建及評(píng)價(jià)方法技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種慢性萎縮性胃炎大鼠模型的評(píng)價(jià)方法。

背景技術(shù)

慢性萎縮性胃炎(Chronic atrophic gastritis,CAG)是消化系統(tǒng)的常見(jiàn)疾病之一，是指胃黏膜上皮遭受反復(fù)損害導(dǎo)致固有腺體的減少，伴或不伴纖維替代，腸腺化生和/或假幽門腺化生的一種慢性胃部疾病。在我國(guó)，CAG患者占受檢人群總數(shù)的13.8％。1978年世界衛(wèi)生組織將CAG列為胃癌前狀態(tài)。目前，現(xiàn)代醫(yī)學(xué)對(duì)于慢性萎縮性胃炎尚缺乏行之有效的治療方法。患者一旦發(fā)病，難于治愈，大多終生帶病，嚴(yán)重威脅著人類的身體生存質(zhì)量。

CAG作為胃癌癌前疾病，是非常值得臨床及科研工作者深入研究的。病理模型的評(píng)價(jià)則是疾病發(fā)病機(jī)制和新藥研究的關(guān)鍵所在。現(xiàn)代研究多應(yīng)用綜合方法復(fù)制慢性萎縮性胃炎模型，摸擬與人類近似的病因、發(fā)病機(jī)制等特征，用于臨床和藥物研究中。但是，在模型復(fù)制中，缺乏有效的評(píng)價(jià)方式，主要體現(xiàn)在以下幾點(diǎn)：

目前慢性萎縮性胃炎模型復(fù)制成功與否的判斷主要根據(jù)病理組織學(xué)檢查，胃組織形態(tài)的觀察結(jié)果作為輔助。胃蛋白酶、胃泌素、胃酸、表皮生長(zhǎng)因子、一氧化氮等機(jī)制相關(guān)檢測(cè)指標(biāo)也被大量研究者監(jiān)測(cè)。另外，新的可視化技術(shù)還可對(duì)胃黏膜損傷面積進(jìn)行評(píng)價(jià)，進(jìn)而清晰地顯示出胃黏膜受損情況。但長(zhǎng)期以來(lái)的實(shí)驗(yàn)研究中，慢性萎縮性胃炎模型評(píng)價(jià)仍存在不足之處。①主觀性：胃組織形態(tài)直接觀察觀察指標(biāo)包括胃部大小、胃壁厚度、皺襞數(shù)量、黏膜色澤及出血等，這種評(píng)價(jià)方法采取主觀人為評(píng)價(jià)，存在很大的主觀性和不確定性。②片面性：通過(guò)慢性萎縮性胃炎相關(guān)調(diào)控因子評(píng)價(jià)模型存在一定的片面性，只能反映個(gè)別的生化功能，器官/組織的狀態(tài)，缺乏整體的系統(tǒng)的評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)。③耗費(fèi)性：目前慢性萎縮性胃炎實(shí)驗(yàn)研究還處于探索階段，普遍造模時(shí)間較長(zhǎng)，病理檢測(cè)是其目前唯一的金標(biāo)準(zhǔn)，但該方法操作繁瑣且費(fèi)用昂貴，費(fèi)時(shí)費(fèi)力。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是解決現(xiàn)有慢性萎縮性胃炎模型的構(gòu)建及評(píng)價(jià)方法存在精確性低、成本高和費(fèi)時(shí)費(fèi)力的技術(shù)問(wèn)題，提供一種慢性萎縮性胃炎大鼠模型的構(gòu)建及評(píng)價(jià)方法。

為解決上述技術(shù)問(wèn)題，本發(fā)明采用的技術(shù)方案為：

一種慢性萎縮性胃炎大鼠模型的構(gòu)建方法，包括以下步驟：

用濃度為20mmo1/L的脫氧膽酸鈉溶液和濃度為0.1％的氨水溶液?jiǎn)稳针p日交替自由喂養(yǎng)大鼠，并保證足量；同時(shí)結(jié)合饑飽失常法：兩天足食，1天禁食，循環(huán)實(shí)施8周。

一種對(duì)上述方法構(gòu)建的慢性萎縮性胃炎大鼠模型的評(píng)價(jià)方法，包括以下步驟：

1)在大鼠模型構(gòu)建的第0周、第4周、第6周和第8周分別收集大鼠模型的尿液，首先對(duì)第0周、第4周、第6周和第8周收集大鼠模型的尿液分別進(jìn)行核磁共振分析，得出大鼠模型的¹H NMR譜圖；然后對(duì)大鼠模型的¹H NMR譜圖積分?jǐn)?shù)據(jù)矩陣進(jìn)行多元統(tǒng)計(jì)分析，得出大鼠模型的輪廓圖；進(jìn)而對(duì)大鼠模型的輪廓圖進(jìn)行輪廓?jiǎng)討B(tài)分析，得出大鼠模型的輪廓?jiǎng)討B(tài)變化趨勢(shì)圖；

2)對(duì)第8周收集大鼠模型的尿液進(jìn)行核磁共振分析得出大鼠模型的¹H NMR圖譜進(jìn)行積分，得出18個(gè)生物標(biāo)志物的含量變化；

3)首先分析步驟1)得出的輪廓?jiǎng)討B(tài)變化趨勢(shì)圖，與第0周相比，在模型構(gòu)建第8周時(shí)偏離程度最大；

然后，分析步驟2)得出18個(gè)生物標(biāo)志物的含量變化，與第0周相比，在模型構(gòu)建第8周時(shí)的18個(gè)生物標(biāo)志物的含量變化如下：

模型大鼠尿液中Isoleucine、Malonate、Sarcosine、Betaine、Glycine、Guanidinoacetate和Allantoin含量顯著下降，具體含量變化如下：

Isoleucine的積分面積均數(shù)從正常鼠的1.149±0.1303下降到0.8691±0.0519，p<0.01；

Malonate的積分面積均數(shù)從正常鼠的1.015±0.119下降0.7358±0.140，p<0.01；

Sarcosine的積分面積均數(shù)從正常鼠的1.127±0.309下降到0.8306±0.099，p<0.01；

Betaine的積分面積均數(shù)從正常鼠的2.053±0.890下降到1.034±0.253，p<0.05；

Glycine的積分面積均數(shù)從正常鼠的1.127±0.309下降到0.831±0.01，p<0.01；