[發明專利]一種甲基營養型芽孢桿菌、菌劑、菌劑的制備方法和菌劑的應用

有效

• 申請號: 201610140494.2
• 申請日: 2016-03-11
• 公開（公告）號: CN105670973B
• 公開（公告）日: 2019-04-30
• 發明（設計）人: 李元鑫;史盼盼;賈振宇;郭婧
• 申請（專利權）人: 山東京青農業科技有限公司
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;A01N63/00;A01P3/00;C12R1/07
• 代理公司: 濰坊正信致遠知識產權代理有限公司 37255
• 代理人: 石譽虎

1.一種甲基營養型芽孢桿菌，其特征在于：甲基營養型芽孢桿菌(Bacillus methylotrophicus)JQ-018，保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏單位地址：北京市朝陽區北辰西路1號院，保藏時間：2015年12月7日，保藏登記號為CGMCCNo.11838。

2.一種以甲基營養型芽孢桿菌為活性成分的菌劑，其特征在于：以權利要求1所述的甲基營養型芽孢桿菌JQ-018為菌種，經種子活化、種子培養、發酵培養得到的菌劑。

3.如權利要求2所述的以甲基營養型芽孢桿菌為活性成分的菌劑，其特征在于：所述菌劑為液體菌劑或固體菌劑。

4.一種權利要求2所述的以甲基營養型芽孢桿菌為活性成分的菌劑的制備方法，具體包括：

a.菌種活化：將低溫保存的甲基營養型芽孢桿菌JQ-018菌株接種于固體培養基上，于35-38℃培養34-38h；挑取單菌落轉接到斜面培養基上，于35-38℃ 培養16-24h，用無菌水洗下培養基表面菌體作為接種液；

b.一級種子液制備：按照5-10%的接種量向種子培養基中接入步驟a制備的接種液，轉速200-260rpm，溫度35-38℃，搖床培養 16-24h，作為一級種子液；

c.二級種子液制備：按照0.5-3%的接種量向種子培養基中接入步驟b制備的一級種子液，通氣量為0.4-1.5vvm，攪拌速度為180-260rpm，培養時間為18-24h，作為二級種子液；

d.發酵培養：按照5-10%的接種量向發酵培養基中接入步驟c制備的二級種子液，通氣量為0.4-1.5vvm，攪拌速度為180-260rpm，培養時間為24-30h，得到甲基營養型芽孢桿菌JQ-018菌株發酵液；

e.將上述發酵液進行過濾，得到所述甲基營養型芽孢桿菌液體菌劑。

5.如權利要求4所述的以甲基營養型芽孢桿菌為活性成分的菌劑的制備方法，其特征在于：所述步驟b和步驟c中的種子培養基的組成成分及其重量百分比為：葡萄糖1-2%、蛋白胨1-1.5%、酵母粉0.6-1%、牛肉膏0.5-0.7%、氯化鈉0.5%，其余為水。

6.如權利要求4所述的以甲基營養型芽孢桿菌為活性成分的菌劑的制備方法，其特征在于：將步驟d所述發酵液進行噴霧干燥，進口溫度150-200℃，出口溫度50-90℃，加入噴霧載體可溶性淀粉，得到甲基營養型芽孢桿菌粉劑。

7.如權利要求6所述的以甲基營養型芽孢桿菌為活性成分的菌劑的制備方法，其特征在于：按照重量百分比，將原料：甲基營養型芽孢桿菌粉劑10-30%、白炭黑10-30%、硅藻土10-30%、十二烷基磺酸鈉1-10%、萘磺酸鹽D-1002 2-10%、膨潤土10-30%和潤濕劑W-2001 2-10%混合均勻，然后粉碎至400目以上，得到甲基營養型芽孢桿菌可濕性粉劑。

8.如權利要求2所述的以甲基營養型芽孢桿菌為活性成分的菌劑的應用，其特征在于：所述菌劑在制備防治馬鈴薯早疫病藥物中的應用。