[發(fā)明專利]一種生物法合成生產(chǎn)長鏈?zhǔn)级岬姆椒?/span>有效
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 201610139691.2 | 申請(qǐng)日： | 2016-03-11 |
| 公開（公告）號(hào)： | CN107177508B | 公開（公告）日： | 2020-05-19 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | 陳遠(yuǎn)童 | 申請(qǐng)（專利權(quán)）人： | 張艾琳 |
| 主分類號(hào)： | C12N1/14 | 分類號(hào)： | C12N1/14;C12P7/64;C12R1/74 |
| 代理公司： | 北京匯捷知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 11531 | 代理人： | 李宏偉 |
| 地址： | 266000 山*** | 國省代碼： | 山東;37 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 生物 合成 生產(chǎn) 十二 二元酸 方法 | ||
本產(chǎn)品涉及一種新發(fā)現(xiàn)的菌株熱帶假絲酵母(Candida tropicalis)C1201，該菌株一方面能保持現(xiàn)有高水平發(fā)酵生產(chǎn)DC12的能力，又具有高度專一的α，ω?氧化能力，使得產(chǎn)品一元酸的含量大大降低，本發(fā)明的DC12產(chǎn)品具有令人滿意的晶體狀形態(tài)，更容易滿足歐洲無塵化、低粉塵產(chǎn)品出口要求。
技術(shù)領(lǐng)域
本發(fā)明涉及一種生物法合成生產(chǎn)長鏈?zhǔn)级岬姆椒ㄅc菌株。
背景技術(shù)
長鏈二元酸是指碳原子數(shù)在十個(gè)以及以上的二元酸，一般指直鏈二元酸。十二碳二元酸(DC12)是合成高性能尼龍工程塑料尼龍1212和服裝用高檔尼龍熱熔膠和高級(jí)涂料的重要原料。
DC12可以通過微生物發(fā)酵或化學(xué)合成兩種方法制備生產(chǎn)。傳統(tǒng)的生產(chǎn)長鏈二酸的化學(xué)方法需要9個(gè)復(fù)雜的反應(yīng)步驟,高溫、高壓和催化劑；生產(chǎn)時(shí)需要防火、防爆和防毒裝置，收率低、成本高和環(huán)境污染嚴(yán)重。而生物發(fā)酵法合成工藝簡(jiǎn)單，常溫常壓下就能生產(chǎn)，無污染、收率高，具備成本優(yōu)勢(shì)。
然而，生物法合成十二碳二元酸的現(xiàn)有方法中，依然存在發(fā)酵水平不高，產(chǎn)品純度達(dá)不到制備長鏈二元酸酯的要求，特別是二元酸產(chǎn)品中由于發(fā)酵菌株α，ω-氧化位點(diǎn)的不同，會(huì)產(chǎn)生一定含量的一元酸雜質(zhì)，由于一元酸和二元酸不容易分離，這給后面合成尼龍1212的工藝帶來巨大不便。
發(fā)明內(nèi)容
令人意外地，本發(fā)明的發(fā)明人通過長期生產(chǎn)實(shí)踐過程中，意外地在發(fā)酵后廢液(即含有廢棄的生產(chǎn)菌株的發(fā)酵液中)篩選出一株熱帶假絲酵母(Candida tropicalis)C1201(保藏號(hào)CCTCC NO.M2014545，保藏日期為2014年11月4 日，保藏地點(diǎn)為武漢大學(xué)，中國典型培養(yǎng)物保藏中心，分類命名Candida tropicalis C1201)，其一方面能保持現(xiàn)有高水平發(fā)酵生產(chǎn)DC12的能力或略有提高，又具有高度專一的α，ω-氧化能力，使得產(chǎn)品一元酸的含量大大降低，即熱帶假絲酵母(Candida tropicalis)C1201為具有單一產(chǎn)品二元酸的高產(chǎn)菌株。此外，該菌株發(fā)酵獲得產(chǎn)品二元酸，具有更大晶形，使得產(chǎn)品更容易達(dá)到后續(xù)工藝無塵化和低塵化要求，更加符合歐美市場(chǎng)特別是歐盟市場(chǎng)對(duì)無塵化產(chǎn)品的要求
熱帶假絲酵母(Candida tropicalis)C1201的生理特征如下：
一、糖類的發(fā)酵：葡萄糖+，半乳糖+，蔗糖+，麥芽糖+，乳糖-。
二、同化：葡萄糖+，半乳糖+，山梨糖-，蔗糖+，麥芽糖+，纖維二糖+，海藻糖+，乳糖-，密二糖-，棉子糖-，松二糖+，菊芋糖-，可溶性淀粉+，木糖+， L-阿戊糖+，D-阿戊糖-，核糖-，鼠李糖-，α-甲基葡萄糖苷+，甘油+，乙醇+，赤鮮醇-，甘露醇+，肌醇-，核糠醇+，半乳糖醇-，葡萄糖醇+，檸檬酸鈉-，丁二酸鈉+，乳酸鈣-。
三、生長素的需要：生物素++，維生素B1++，維生素B2+，維生素B6+，維生素B12+，葉酸+，煙酸+，泛酸+，肌醇+，對(duì)氨基苯甲酸+。四、其它：硝酸鹽-，凍化牛奶-，熊果酸分解-，凝固牛奶-，油脂酶-。
形態(tài)特征：奶油白色，皺褶型，菌落為蛋糕狀和桃酥狀。
培養(yǎng)特征：在麥芽汁液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)時(shí)，假菌絲多而長；在烷烴種子培養(yǎng)基培養(yǎng)時(shí)，有一定數(shù)量的短假菌絲；而在發(fā)酵培養(yǎng)基中發(fā)酵時(shí)，大部分是單個(gè)橢圓細(xì)胞。
發(fā)明所述的發(fā)酵轉(zhuǎn)化正十二烷(nC12)生產(chǎn)十二碳二元酸(DC12)的方法是以熱帶假絲酵母(Candida tropicalis)C1201為發(fā)酵菌種，在以正十二烷為基質(zhì)的培養(yǎng)基混合液中同步發(fā)酵，生產(chǎn)α，ω-十二碳二元酸。
發(fā)明所述的發(fā)酵轉(zhuǎn)化正十二烷(nC12)生產(chǎn)十二碳二元酸(DC12)的方法的步驟為：
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