[發明專利]一種用于HBV疫苗的佐劑及其制備方法

在審

• 申請號: 201610139195.7
• 申請日: 2016-03-04
• 公開（公告）號: CN105770887A
• 公開（公告）日: 2016-07-20
• 發明（設計）人: 鄧招紅
• 申請（專利權）人: 鄧招紅
• 主分類號: A61K39/39
• 分類號: A61K39/39;A61K39/29;A61P31/20
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明涉及疫苗技術領域，具體涉及一種用于HBV疫苗的佐劑及其制備方 法。

背景技術

乙型肝炎病毒(HBV)屬嗜肝DNA病毒科，在人類間具有較強的傳染性和 潛伏性，因此該疾病對人類健康和經濟發展具有嚴重危害。HBV抗原易變，因 此防控工作具有較大難度，除了保證適當的衛生條件和隔離措施之外，接種疫苗 是控制乙肝流行的關鍵性措施。現有技術中，盡管乙肝疫苗早已形成產品，但仍 存在著諸如保護效力不足、需多次免疫才能起效、成本較高等技術缺陷，從而難 以滿足使用需求。

為了提升疫苗的免疫效果，現有技術的研究者從多方面進行了努力，例如開 發免疫效果更好的抗原物質、在接種疫苗的同時服用免疫促進劑等。佐劑 (adjuvant)是與抗原混合后注射于生物體內、能非特異性改變或增強機體對該 抗原的特異性免疫應答的物質，因此開發適宜的疫苗佐劑將有助于提升疫苗質量， 增強免疫效果。

現有技術中，免疫佐劑多選用白油佐劑、氫氧化鋁佐劑、類脂佐劑和蜂膠佐 劑等，其中白油佐劑被認為有助于強化疫苗免疫效力，目前應用較為廣泛。白油 佐劑常用劑型包括水包油、水包油包水、油包水三種，其中油包水型應用最為普 遍，但也存在一定的技術缺陷，例如其粘度較高、注射困難；同時由于疫苗中白 油含量相對較高，常常導致嚴重的接種副反應，形成無菌性化膿損害和接種部位 周圍的肉芽腫，可產生外部可見的浮腫、腫脹、硬結和壞死；此外有研究認為該 劑型的佐劑接種后可能在接種部位形成殘留，從而帶來安全隱患。

發明內容

本發明旨在針對現有技術的技術缺陷，提供一種用于HBV疫苗的佐劑及其 制備方法，以解決現有技術的佐劑對HBV疫苗免疫效力促進作用較低的技術問 題。

本發明要解決的另一技術問題是現有技術的油包水型佐劑易使得疫苗注射 后產生副作用。

本發明要解決的再一技術問題是現有技術的佐劑不穩定、易隨時間推移發生 性質改變。

為實現以上技術目的，本發明采用以下技術方案：

一種用于HBV疫苗的佐劑，該佐劑分為油相和ISCOM基質兩部分，其中 所述油相包括以下成分：注射級白油80～85％(w/w)，span806～8％(w/w)，吐溫 806～8％(w/w)；所述ISCOM基質中包括以下成分：QuilA0.2～5mg/ml，膽固醇 0.2～5mg/ml，左旋咪唑3～8mg/ml。

優選地，所述QuilA的含量是1～5mg/ml。

優選地，所述膽固醇的含量是1～5mg/ml。

本發明同時還提供了上述佐劑的制備方法，該方法包括以下步驟：

1)取配方量的QuilA、左旋咪唑、膽固醇溶于PBS緩沖液中得到ISCOM 基質；

2)取配方量的注射級白油，滅菌后向其中加入配方量的span80和吐溫80， 乳化后即得到油相。

在此方法基礎上優選地，步驟2)是：取配方量的注射級白油，滅菌后向其 中加入配方量的span80，以60～100r/min的轉速攪拌4～6min，而后在攪拌狀態 下向其中加入吐溫80，以60～100r/min的轉速攪拌4～6min，即得到油相；更優 的，上述兩次攪拌轉速均為80r/min、攪拌時間均為5min。

本發明的佐劑在疫苗的制備過程中可以是通過以下方法使用的：將疫苗抗原 溶液與本發明佐劑的ISCOM基質混合作為水相，將該水相與本發明佐劑的油相 按(1∶1)～(1∶3)(v/v)比例混合，即得到疫苗。

在以上技術方案中，ISCOM(immunostimulatingcomplex)基質是一種含有 抗原成分的免疫刺激復合物，稱為免疫刺激復合物基質，由QuilA(皂苷活性成分)、 膽固醇等制備得到，其特點在于能有效地活化輔助型T細胞和細胞毒性T細胞， 促進細胞免疫應答，尤其是Thl型細胞免疫應答，其次，ISCOM基質通常人們 將其應用到活疫苗中，本發明創造性地將其應用到疫苗中，實驗證實，能更有效 地激活免疫，顯著提高了全病毒的抗原呈遞及疫苗的持續性。左旋咪唑是一種廣 譜驅蟲藥，同時研究發現其具有明顯的免疫調節作用。