[發(fā)明專利]甲基丙烯酸縮水甘油酯接枝二乙胺修飾瓊脂糖凝膠色譜介質(zhì)及制備方法與應(yīng)用

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201610137281.4
• 申請(qǐng)日: 2016-03-10
• 公開（公告）號(hào): CN105727911A
• 公開（公告）日: 2016-07-06
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 孫彥;王倩倩;余林玲
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 天津大學(xué)
• 主分類號(hào): B01J20/291
• 分類號(hào): B01J20/291;B01J20/285;B01J20/26;B01J20/30;C08F251/00;C08F220/32;C07K1/18
• 代理公司: 天津市北洋有限責(zé)任專利代理事務(wù)所 12201
• 代理人: 王麗

1.一種甲基丙烯酸縮水甘油酯接枝二乙胺修飾瓊脂糖凝膠色譜介質(zhì)，其特征是該色譜介質(zhì)是在瓊脂糖凝膠多孔介質(zhì)表面接枝帶有活性環(huán)氧基的聚甲基丙烯酸縮水甘油酯長(zhǎng)鏈，然后修飾二乙胺獲得陰離子交換色譜介質(zhì)。

2.按權(quán)利要求1所述的色譜介質(zhì)，其特征在于接枝鏈的重復(fù)單元為二乙胺修飾的甲基丙烯酸縮水甘油酯。

3.制備權(quán)利要求1所述的色譜介質(zhì)的方法，其特征在于包括以下過程：

1)介質(zhì)的溴化反應(yīng)

將平均粒徑為50-120μm的瓊脂糖凝膠多孔介質(zhì)經(jīng)溶劑替換再懸浮于N,N’-二甲基甲酰胺溶液中，N,N’-二甲基甲酰胺的體積用量為介質(zhì)體積的5-8倍，繼而向懸浮液中加入體積用量為介質(zhì)體積0.2-0.5倍的三乙胺混合，在冰浴條件下向混合懸浮液中滴加入體積用量為介質(zhì)體積0.025-0.33倍的α-溴異丁酰溴，置于25-40℃的恒溫水浴中反應(yīng)10-16h，之后依次用N,N’-二甲基甲酰胺、乙醇和去離子水清洗介質(zhì)，得到溴化介質(zhì)；

2)介質(zhì)的ATRP接枝反應(yīng)

將溴化介質(zhì)懸浮于N,N’-二甲基甲酰胺與水的混合溶液中，混合溶液的體積用量為溴化介質(zhì)體積的6-8倍；再向該懸浮液中加入單體甲基丙烯酸縮水甘油酯、溴化銅和2,2’-聯(lián)吡啶，通氮?dú)獬酰傧驊腋∫褐屑尤脘寤瘉嗐~，繼續(xù)通氮?dú)猓磻?yīng)60-120min；將反應(yīng)液暴露于空氣中使溴化亞銅被氧化以終止反應(yīng)，用EDTA清洗除去銅離子，用乙醇和大量去離子水清洗介質(zhì)，得到GMA接枝介質(zhì)；

3)介質(zhì)的胺基化修飾反應(yīng)

將GMA接枝介質(zhì)置于20％二乙胺水溶液中，體積用量為接枝介質(zhì)體積的7-12倍，20-30℃，170rpm反應(yīng)5-12h，使接枝鏈上的環(huán)氧基被DEA充分修飾，用去離子水反復(fù)沖洗，直到清洗液用酚酞檢測(cè)不變色，得到聚合物接枝型陰離子交換介質(zhì)。

4.如權(quán)利要求4所述的方法，其特征是步驟2中溴化介質(zhì)懸浮于N,N’-二甲基甲酰胺與水的混合溶液中，N,N’-二甲基甲酰胺與水的體積比為1:1。

5.如權(quán)利要求4所述的方法，其特征是步驟3中懸浮液中加入量以每毫升介質(zhì)計(jì)：?jiǎn)误w甲基丙烯酸縮水甘油酯量為0.15-1.5mmol/mL介質(zhì)；溴化亞銅加入量為0.02-0.06mmol/mL介質(zhì)；溴化亞銅、溴化銅與聯(lián)吡啶的摩爾比為1:0.1:5。

6.如權(quán)利要求2所述的色譜介質(zhì)，其特征是介質(zhì)的溴化密度為1-40mmol/L，接枝密度呈現(xiàn)梯度變化；介質(zhì)的離子交換容量為140-550mmol/L；同一接枝密度的介質(zhì)離子交換容量各不相同，即同一接枝密度的介質(zhì)接枝鏈長(zhǎng)不同。

7.權(quán)利要求3的甲基丙烯酸縮水甘油酯接枝二乙胺修飾的以瓊脂糖凝膠為基礎(chǔ)的色譜介質(zhì)應(yīng)用于蛋白質(zhì)分離純化中，提升蛋白質(zhì)的靜態(tài)吸附容量和動(dòng)態(tài)吸附容量。