[發明專利]白介素-12和鞭毛蛋白在制備治療慢性乙型肝炎藥物中的用途

在審

• 申請號: 201610136820.2
• 申請日: 2016-03-10
• 公開（公告）號: CN107149674A
• 公開（公告）日: 2017-09-12
• 發明（設計）人: 張宜俊;王翠玲;羅群方;葉倩君;粟寬源;夏書奇
• 申請（專利權）人: 廣東思峰生物科技有限責任公司
• 主分類號: A61K38/20
• 分類號: A61K38/20;A61P1/16;A61P31/20;A61K38/16
• 代理公司: 廣州市越秀區海心聯合專利代理事務所(普通合伙)44295
• 代理人: 黃為

技術領域

本發明公開了一種白介素-12和鞭毛蛋白的新用途，具體的說，是白介素-12和鞭毛蛋白在制備治療慢性乙型肝炎藥物中的用途。

背景技術

全球有20億人群感染乙肝病毒，其中2.4億是慢性乙肝病毒表面抗原(HBsAg)攜帶者。慢性乙肝(CHB)有一部分人是不活躍的，但有一部分人可導致肝硬化、肝癌。

近年來，應用干擾素及核苷類似物治療CHB，取得很大進展，大多數患者經過治療后，血清谷丙轉氨酸(ALT)、HBVDNA、HBeAg在外周血可以恢復正常或轉為陰性，但外周血中HBsAg仍持續陽性，很難達到血清轉換(呈現抗-HBs陽性)。這些年來，國內外學者已經提出慢性乙肝功能性治愈的概念，也就是說，治療慢性乙肝除了要求ALT、HBVDNA、HBeAg長期穩定正常以外，尚要求外周血HBsAg消除，并出現乙型肝炎表面抗體，即血清由HBsAg陽性轉換為陰性，并出現抗-HBs這也是對慢性乙肝治療的終點或目標。達到這個目標，就是CHB功能性治愈。慢性乙型肝炎患者由于HBV特異性免疫功能降低和CD8+T細胞耗竭，使其自身不能完全清除HBV，但其體內對HBV抗原產生應答的主要是Th1型細胞，因此，應用有效的免疫佐劑提高慢性乙肝患者的細胞免疫功能，誘導并維持以HBV特異性CTL為主的細胞免疫應答，對于HBV的徹底清除十分重要。

鞭毛蛋白(Piliated Pseudomonas aeruginosa，PPA)能調整人體體液免疫及 細胞免疫的不平衡狀態，增加巨噬細胞和NK細胞的活性，維持T細胞的數量與比例。鞭毛蛋白同時含有Ⅰ、Ⅱ、Ⅳ型菌毛及鞭毛蛋白，鞭毛蛋白啟動的先天固有免疫應答由TLR5介導，產生各種生物學反應，是先天性固有免疫應答和后天獲得性免疫應答中的關鍵蛋白。TLR5作為TLR家族的成員之一，已證明主要在肺臟和肝臟表達。

白細胞介素-12(IL-12)作為免疫網絡中的核心細胞因子，是連接先天固有免疫與后天獲得性免疫的橋梁，能夠顯著誘導Th1型細胞免疫，增強CD8+T細胞的細胞毒性，并抑制Th2型細胞免疫。這些特性使其在抑制HBV復制的過程中發揮重要作用。IL-12具有促進T細胞活化、增殖、裂解效應的功能，有望成為有效的免疫增強劑，以輔助CD8+T細胞的免疫應答。

現在慢性乙型肝炎治療中，HBsAg(+)(滴度＜1000IU/ml)、HBeAg(-)、HBV-DNA(-)難以清除表面抗原。

發明內容

針對上述問題，本發明的目的在于提供一種解決檢測指標為HBsAg(+)(滴度＜1000IU/ml)、HBeAg(-)、HBV-DNA(-)的慢性乙型肝炎HBsAg難以清除的問題，提供白介素-12和鞭毛蛋白作為制備治療慢性乙型肝炎藥物中的用途。

為解決上述技術問題，本發明提供的技術方案是這樣的：

一種白介素-12和鞭毛蛋白在制備治療慢性乙型肝炎藥物中的用途。

進一步的，上述的白介素-12和鞭毛蛋白在制備治療慢性乙型肝炎藥物中的用途，所述的慢性乙型肝炎的檢測指標為：HBsAg+，滴度＜1000IU/ml，HBeAg-，BV-DNA-。

進一步的，上述的白介素-12和鞭毛蛋白在制備治療慢性乙型肝炎藥物中的用途，所述的鞭毛蛋白劑量為每劑含菌1.0×10⁹-3.0×10⁹；所述的白細胞介素-12劑量為5-10μg/劑。

與現有相比，本發明提供色技術方案采用白細胞介素-12與鞭毛蛋白制劑聯合使用作為治療HBsAg(+)(滴度＜1000IU/ml)、HBeAg(-)、HBV-DNA(-)的慢性乙型肝炎的藥物；其中，鞭毛蛋白聯合rhIL-12能顯著提高健康人和慢性乙型肝炎患者PBMCs產生IFN-γ的水平，增強其細胞免疫應答，促進慢性乙型肝炎表面抗原的清除。

附圖說明

圖1是不同濃度鞭毛蛋白聯合rhIL-12誘導IFN-γ的水平；

圖2是鞭毛蛋白聯合不同濃度rhIL-12誘導IFN-γ的水平；

圖3鞭毛蛋白聯合rhIL-12誘導慢性乙肝患者和健康人PBMCs中IFN-γ的水平；

圖4鞭毛蛋白聯合rmIL-12對乙肝水動力模型小鼠血清HBsAg的作用。

具體實施方式

下面結合具體實施方式，對本發明的權利要求做進一步的詳細說明，但不構成對本發明的任何限制，任何在本發明權利要求保護范圍內所做的有限次的修改，仍在本發明的權利要求保護范圍之內。

實施例1