[發(fā)明專利]一種鄰菲羅啉釕配合物雙光子吸收材料及其制備方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201610136102.5
• 申請(qǐng)日: 2016-03-10
• 公開（公告）號(hào): CN105694852B
• 公開（公告）日: 2017-09-29
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 田肖和;王慧;吳杰穎;田玉鵬;周虹屏;李勝利;李飛;郁建華
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 安徽大學(xué)
• 主分類號(hào): C09K11/06
• 分類號(hào): C09K11/06;C07F15/00;G01N21/64;C12Q1/02
• 代理公司: 安徽省合肥新安專利代理有限責(zé)任公司34101
• 代理人: 喬恒婷

一、技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種雙光子吸收材料及其制備方法，具體地說(shuō)是一種鄰菲羅啉釕配合物雙光子吸收材料及其制備方法。本發(fā)明雙光子吸收材料具有低毒性、生物相容性、靶向線粒體DNA，能應(yīng)用于活體細(xì)胞的雙光子顯微成像的鄰菲羅啉釕配合物及其合成方法。

二、背景技術(shù)

細(xì)胞內(nèi)的脫氧核糖核酸(DNA)主要分布在細(xì)胞核和線粒體中，是染色體的主要組成成分，同時(shí)也是組成基因的材料，DNA主要是遺傳物質(zhì)。其中，線粒體是一種存在于大多數(shù)細(xì)胞中的由兩層膜包被的細(xì)胞器，是細(xì)胞中制造能量的結(jié)構(gòu)，是細(xì)胞進(jìn)行有氧呼吸的主要場(chǎng)所，是一種半自主性細(xì)胞器。線粒體DNA可以編碼多種RNA和多肽，參與蛋白質(zhì)的合成、轉(zhuǎn)錄和復(fù)制。研究表明線粒體的DNA與一些母系遺傳的病癥有著密切的聯(lián)系。

隨著雙光子吸收材料的發(fā)現(xiàn)，雙光子顯微成像技術(shù)在生物成像應(yīng)用領(lǐng)域已經(jīng)成為一個(gè)重要的工具，主要是由于雙光子技術(shù)使用的是長(zhǎng)波激發(fā)(近紅外)，具有激發(fā)能量低、波長(zhǎng)長(zhǎng)、穿透性強(qiáng)和光損傷小等特點(diǎn)。雙光子成像技術(shù)的快速發(fā)展，更加激發(fā)了人們對(duì)生物體內(nèi)各種遺傳信息的研究興趣。

近年來(lái)，重金屬配合物雙光子發(fā)光材料備受矚目，因?yàn)樗哂写蟮乃雇锌怂刮灰啤⑤^好的光穩(wěn)定性、長(zhǎng)的熒光壽命和多種激發(fā)態(tài)等特點(diǎn)。2009年，Barton(J.Am.Chem.Soc.,2009,131,8738-8739)等報(bào)道了一個(gè)具有膜穿透性的Ru配合物，該探針可以作用在細(xì)胞核。同年，Martin(Nat.Chem.,2009,662-667)等報(bào)道了一個(gè)雙核Ru配合物，它與DNA有很強(qiáng)的結(jié)合能力，可以很好地作用在細(xì)胞核，具有良好的生物親和性和低毒性。

申請(qǐng)人對(duì)本申請(qǐng)的主題進(jìn)行了如下的文獻(xiàn)檢索：

1、xueshu.baidu.com網(wǎng)檢索結(jié)果：(2016/2/19)

2、中國(guó)期刊網(wǎng)檢索結(jié)果：

檢索方式一：

篇名-靶向線粒體DNA探針：無(wú)相關(guān)文獻(xiàn)。

篇名-具有靶向線粒體DNA功能的鄰菲羅啉釕配合物雙光子吸收材料及其制備方法：無(wú)相關(guān)文獻(xiàn)。

檢索方式二：

全文-靶向線粒體DNA探針：無(wú)相關(guān)文獻(xiàn)。

全文-具有靶向線粒體DNA功能的鄰菲羅啉釕配合物雙光子吸收材料及其制備方法：無(wú)相關(guān)文獻(xiàn)。

三、發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明旨在提供一種鄰菲羅啉釕配合物雙光子吸收材料及其制備方法，所要解決的技術(shù)問(wèn)題是通過(guò)分子設(shè)計(jì)遴選合適的配體以合成可以靶向線粒體DNA的雙光子熒光探針。本發(fā)明雙光子吸收材料具有低毒性、生物相容性、靶向線粒體DNA，能應(yīng)用于活體細(xì)胞的雙光子顯微成像的鄰菲羅啉釕配合物及其合成方法。

本發(fā)明鄰菲羅啉釕配合物雙光子吸收材料的結(jié)構(gòu)式為：

本發(fā)明鄰菲羅啉釕配合物雙光子吸收材料的制備包括如下步驟：

1、配體HL的合成

稱取1.09g(3.5mmol)己基吩噻嗪?jiǎn)稳?.74g(3.5mmol)鄰菲羅啉雙酮，5.75g(74.5mmol)乙酸銨和75mL冰乙酸，放入250mL圓底燒瓶中，在120℃下回流反應(yīng)4h，反應(yīng)結(jié)束后冷卻至室溫，將反應(yīng)液倒入冰水混合物中，用飽和碳酸鉀水溶液調(diào)pH至7，二氯甲烷萃取，旋干二氯甲烷，甲醇和二氯甲烷重結(jié)晶(甲醇和二氯甲烷的體積比為20:1)，得黃色固體1.30g即為配體HL，產(chǎn)率74％。

2、目標(biāo)分子HLRu(phen)₂(PF₆)₂的合成

在50mL的圓底燒瓶中加入0.125g(0.25mmol)配體HL，加入15mL乙醇使配體HL溶解，隨后加入0.133g(0.25mmol)Ru(phen)₂Cl₂(溶解于少量乙醇中加入)，在N₂保護(hù)下回流攪拌反應(yīng)12h，然后冷卻至室溫，溶液呈透明的紅色溶液，蒸出大部分乙醇，隨后滴加飽和的六氟磷酸銨水溶液，有橘色固體析出，常溫?cái)嚢?h，抽濾，得橘紅色固體，烘干，用少量乙腈溶解，過(guò)濾，得紅色溶液，柱層析(二氯甲烷：甲醇＝50:1，v/v)分離，得紅色晶體0.11g即為目標(biāo)產(chǎn)物，產(chǎn)率37％。

合成路線如下所示：

3、目標(biāo)分子HLRu(phen)₂(PF₆)₂的生物學(xué)研究