[發明專利]一種苯酞類二聚體化合物的提取方法和用途

有效

• 申請號: 201610131491.2
• 申請日: 2016-03-08
• 公開（公告）號: CN105669692B
• 公開（公告）日: 2018-02-06
• 發明（設計）人: 周玉枝;宮文霞;秦雪梅;張麗增;杜冠華
• 申請（專利權）人: 山西大學
• 主分類號: C07D493/10
• 分類號: C07D493/10;A61K31/365;A61P35/00
• 代理公司: 山西五維專利事務所(有限公司)14105
• 代理人: 張福增

技術領域：

本發明涉及天然藥物的分離制備方法及應用，具體涉及從當歸中提取分離的三種苯酞類二聚體化合物及其用途。

背景技術：

當歸是最常用的中藥之一，來源于傘形科植物當歸Angelica sinensis(Oliv.)Diels的干燥根。當歸含有揮發油、有機酸、多糖、黃酮等多種類型的化學成分，其藥理作用廣泛，涉及機體多個系統。大量的藥理研究報道表明，當歸及其主要化學成分對機體的造血系統、循環系統、神經系統、免疫系統等多個系統具有藥理作用；其主要生物活性包括造血、抗血小板聚集、抗心律失常、抗輻射、抗腫瘤、鎮痛、調節平滑肌以及對臟器的保護作用。

苯酞類化合物作為一大類天然化合物主要存在于傘形科，目前進行的苯酞類的植物研究多數集中于芹菜，藁本(遼藁本，新疆藁本)，當歸(日本當歸，歐當歸)，川芎(茶芎，日本川芎)。該類化合物主要包括苯酞單體及苯酞二聚體類化合物，苯酞單體類化合物的結構母核為苯并呋喃內酯結構，具有12個碳，是藁本屬植物次生代謝產物的代表性成分之一；苯酞二聚體是苯酞單體經環加成得到的,單體結構、聚合方式及聚合位置的不同產生了其結構的多樣性。目前關于苯酞類單體活性的報道較多，卻罕見苯酞二聚體類化合物的活性報道。

具有抗腫瘤活性的天然植物已經成為人們開發新藥的重要來源，因此人們正在不斷尋找活性較好，結構新穎的新型天然化合物。本發明從當歸中分離得到三種苯酞類二聚體化合物，藥理試驗研究表明，該類化合物具有顯著的抗腫瘤活性，經文獻檢索，迄今為止未見該三種化合物在此方面的活性報道。

發明內容：

本發明的目的在于提供一種新的苯酞類二聚體化合物。

本發明的另一個目的在于提供一種苯酞類二聚體化合物的制備方法，以及所述方法制備得到的化合物的用途。

本發明提供的一種苯酞類二聚體化合物，其特征在于結構式為I、II或III：

本發明提供的一種苯酞類二聚體化合物的制備方法，其特征在于包括以下步驟：

(1)粗提物的制備

采用超臨界CO₂萃取當歸飲片，萃取條件：溫度：50℃；壓力：20MP；CO₂流量：15kg/h；物料粒度：20目；萃取時間：3h；

(2)化合物的分離純化

將上述粗提物用200～300目的硅膠拌樣，進行硅膠柱層析，以石油醚-乙酸乙酯系統梯度洗脫，根據薄層層析情況合并流分；

石油醚：乙酸乙酯＝1：9洗脫部位的組分經硅膠柱層析，凝膠柱層析分離，然后經制備高效液相分離，流動相為甲醇：水＝7：3，收集出峰時間為45.59min的物質，得到新化合物I(C₂₄H₂₈O₄),命名為Tokinolide C，收集出峰時間為61.15min的物質，得到化合物II(Tokinolide A)；

石油醚：乙酸乙酯＝2：8洗脫部位的組分經硅膠柱層析分離，然后經Sephadex LH-20層析純化，用氯仿：甲醇＝2：1(體積比)的溶劑洗脫，得到化合物III(Riligustilide)。

實驗結果顯示：所述方法制得的苯酞類二聚體化合物I、II或III在1～80μM濃度范圍內，對不同的腫瘤細胞均有一定的抑制作用，且存在明顯的濃度依賴性。因此，其可在制備抗腫瘤藥物中的應用。

本發明有益效果在于：

本發明提供的苯酞類二聚體化合物可從當歸等藥材中分離得到，也可經本領域技術人員熟知的化學方法合成得到，具有良好的開發前景；本發明苯酞類二聚體化合物對多種腫瘤細胞株的抑制作用也表明其可以進一步作為新的抗腫瘤藥物進行研究開發。

附圖說明：

圖1.化合物I的¹HNMR譜(氫譜)。

圖2.化合物I的¹³CNMR譜(碳譜)。

圖3.化合物I的HMQC譜。

圖4.化合物I的HMBC譜。

圖5.化合物I的NOESY譜。

圖6.化合物I的HR-ESI-MS譜。

圖7.ChemDraw3D模擬化合物I的優勢構型及NOESY譜主要的相關信號

圖8.分離流程圖

具體實施方式：

實施例1.三種苯酞類二聚體化合物的提取分離，具體步驟為：