[發明專利]一種用廢舊飲料瓶和量筒二級培養小新月菱形藻的方法

在審

• 申請號: 201610123808.8
• 申請日: 2016-03-07
• 公開（公告）號: CN105524837A
• 公開（公告）日: 2016-04-27
• 發明（設計）人: 王培磊;徐樹建;劉金民;劉笑天;陳玉倩
• 申請（專利權）人: 臨沂大學
• 主分類號: C12N1/12
• 分類號: C12N1/12;C12R1/89
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種用于廢舊飲料瓶和量筒二級培養小新月菱形藻的培養液，其特征在于，小新月菱形藻 培養液由以下重量份數的原料組成：工業氨水(含氨25％-28％)2-5份，過磷酸鈣0.4-0.8 份，磷酸二氫鉀0.05-0.08份，硅酸鈉0.1-0.3份，葡萄糖酸亞鐵0.2-0.5份，硬脂酸鎂 0.06-0.09份，阿斯巴甜0.001-0.004份，?；撬?.2-0.6份，鈦溶液0.5-0.8份，f/2微量 元素溶液0.4-0.7份，f/2維生素溶液0.8-1.4份，920植物生長刺激素0.004-0.008份，磁 化海水1000份；其中鈦溶液制備方法(重量份數比)：把0.7366份草酸鈦，溶解于100份蒸 餾水中，加入5份氫氧化銨，使之成堿性，發生沉淀，用離心法將沉淀集中，用20份0.05mol/L 的硫酸溶解即得；f/2微量元素溶液配方(重量份數比)：ZnSO₄·4H₂O0.02-0.04份，MnCl₂·4H₂O 0.04-0.08份，CuSO₄·5H₂O0.01-0.03份，FeC₆H₅O₇·5H₂O4-6份，Na₂MoO₄·2H₂O0.02-0.05 份，CoCl₂·6H₂O0.03-0.06份，Na₂EDTA3-5份，蒸餾水1000份；f/2維生素溶液配方(重 量份數比)：維生素B₁₂0.005-0.008份，維生素B₁0.1-0.3份，維生素H0.0005-0.0008 份，蒸餾水1000份。

2.根據權利要求1所述的一種用于廢舊飲料瓶和量筒二級培養小新月菱形藻的培養液二級培 養小新月菱形藻的方法，其特征在于：

小新月菱形藻的第一級培養方法：取一廢舊的飲料瓶，透明，容積在500-800毫升，撕 去標簽紙，去掉瓶蓋，洗刷干凈，用蒸餾水潤洗3遍，再采用消毒劑浸泡消毒20分鐘，所述 消毒劑為中草藥復合消毒劑；所述中草藥復合消毒劑組成成分(重量份數比)：紅背菜2-4份， 魚腥草6-9份，柴胡5-8份，連錢草7-12份，藿香10-15份，蒼術7-12份，地膚子8-15份， 紫花地丁5-7份，麥冬3-6份，板藍根0.5-0.9份，百部10-14份，穿心蓮5-8份，蒲公 英2-6份，桑黃1-3份；

加入步驟1所述的小新月菱形藻培養液300毫升，取處于指數生長期、干凈、無污染、 生長旺盛的小新月菱形藻藻種接種，接種密度3.5萬個細胞/毫升，輕輕搖勻，用消毒脫脂棉 外包一層紗布做成的棉塞塞住瓶口；把此飲料瓶連同其中的藻液一起放進光照培養箱中培養， 共培養7天，前4天，培養箱設置光照強度4500-5000lux，溫度23±1℃，光暗周期設為L16+D8， 即16小時光照，8小時黑暗，循環往復；后3天，設置光照強度7000-9000lux，溫度25±1 ℃，光暗周期設為L20+D4，即20小時光照，4小時黑暗，循環往復；到第4天，添加步驟1 所述的新鮮培養液35毫升，以補充因生長繁殖消耗掉的營養鹽，到第6天，添加蒸餾水25 毫升，補充揮發掉的水分并稀釋藻液；整個培養期間，每天手動搖瓶4次，即每隔6小時搖 動一次，每次45秒鐘；到第7天末，藻細胞密度可達180±20萬個細胞/毫升，停止培養， 拔出棉塞，將藻液從瓶口倒出，此藻液作為下一級培養的藻種。