[發明專利]一種基因組DNA提取方法在審
| 申請號： | 201610122856.5 | 申請日： | 2016-03-04 |
| 公開（公告）號： | CN107151667A | 公開（公告）日： | 2017-09-12 |
| 發明（設計）人： | 邢紅兵 | 申請（專利權）人： | 江蘇華創生物科技有限公司 |
| 主分類號： | C12N15/10 | 分類號： | C12N15/10 |
| 代理公司： | 南京申云知識產權代理事務所(普通合伙)32274 | 代理人： | 邱興天 |
| 地址： | 212000 江蘇省*** | 國省代碼： | 江蘇;32 |
| 權利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 基因組 dna 提取 方法 | ||
1.一種基因組DNA提取方法，其特征在于，包括以下步驟
1）取新鮮材料剪碎，加液氮速凍，快速研磨，獲得低溫粉料；
2）將低溫粉料轉移到1.5mL 離心管中，加20%SDS 20mL，蛋白酶K（2mg/mL）20mL，混勻；
3）55℃水浴2-3h；
4）加等體積飽和酚至上述樣品處理液中，溫和、充分混勻4min；
5）離心5500g 12min，取上層水相到另一1.5mL 離心管中；
6）加等體積飽和酚，混勻，離心5300g 12min，取上層水相到另一管中；
7）加等體積酚/氯仿，輕輕混勻，離心5500g 12min，取上層水相到另一管中；如水相仍不澄清，可重復此步驟數次；
8）加等體積氯仿，輕輕混勻，離心5500g 12min，取上層水相到另一管中；
9）加1/10體積的3M醋酸鈉（pH5.2）和2.5倍體積的無水乙醇，輕輕倒置混勻；
10）待絮狀物出現后，離心5500g 6min，棄上清液；
11）沉淀用75%乙醇洗滌，離心5500g 2min，棄上清液；
12）室溫下揮發乙醇，待沉淀將近透明后加50-100mLTE溶解過夜；
13）取1uL DNA溶解液檢測DNA質量；
14）DNA質量符合要求后，將DNA溶解分裝到1.5mL離心管冷凍保藏。
2.根據權利要求1所述的基因組DNA提取方法，其特征在于：所述的TE：10mM Tris-HCl，1mM EDTA。
3.根據權利要求1所述的基因組DNA提取方法，其特征在于：所述的TBS：25mM Tris-HCl，200mM NaCl，5mM KCl。
4.根據權利要求1所述的基因組DNA提取方法，其特征在于：所述裂解緩沖液：250mM SDS，使用前加入蛋白酶K至100mg/mL。
該專利技術資料僅供研究查看技術是否侵權等信息，商用須獲得專利權人授權。該專利全部權利屬于江蘇華創生物科技有限公司，未經江蘇華創生物科技有限公司許可，擅自商用是侵權行為。如果您想購買此專利、獲得商業授權和技術合作，請聯系【客服】
本文鏈接：http://www.szxzyx.cn/pat/books/201610122856.5/1.html，轉載請聲明來源鉆瓜專利網。
