[發明專利]水稻開花調節基因OsWRKY104在調節植物光周期和開花時間中的應用

有效

• 申請號: 201610121271.1
• 申請日: 2016-03-03
• 公開（公告）號: CN105671054B
• 公開（公告）日: 2019-04-26
• 發明（設計）人: 李宏宇;劉斌;趙濤;劉軍;林辰濤
• 申請（專利權）人: 中國農業科學院作物科學研究所
• 主分類號: C12N15/29
• 分類號: C12N15/29;C12N15/84;A01H5/00;A01H6/46
• 代理公司: 北京路浩知識產權代理有限公司 11002
• 代理人: 王文君

1.水稻開花調節基因OsWRKY104在調節水稻光周期和開花時間中的應用，其中基因OsWRKY104編碼蛋白的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示。

2.根據權利要求1所述的應用，其特征在于，調節水稻開花時間具體為推遲水稻開花時間。

3.根據權利要求2所述的應用，其特征在于，通過在水稻中過表達基因OsWRKY104的CDS序列，從而推遲轉基因水稻的開花時間及生育期。

4.根據權利要求3所述的應用，其特征在于，提取水稻總RNA，反轉錄成cDNA，以cDNA為模板進行PCR擴增獲得如SEQ ID No.2所示的基因OsWRKY104的CDS序列，并將所述CDS序列構建到植物雙元表達載體的Ubiquitin啟動子的下游，轉化水稻，篩選轉基因水稻植株。

5.根據權利要求4所述的應用，其特征在于，所述植物雙元表達載體的出發載體為pCAMBIA1390。

6.根據權利要求4所述的應用，其特征在于，PCR擴增所用引物為：

正向引物F 5'-TCTGCACTAGGTACCTGCAGATGAAAATTCTCGAATCTTTTGGTC-3'

反向引物R 5'-ATGGATCCGTCGACCTGCAG TCCCCATATGCATATTGGACTG-3'。

7.根據權利要求4-6任一項所述的應用，其特征在于，所述轉化水稻具體為：采用農桿菌介導的方法，將構建的表達載體轉入水稻愈傷組織中，用含誘導劑和農桿菌的AAM培養液進行轉化，轉化后的材料經過共培養-脫菌-篩選-分化-生根-轉基因苗的鍛煉和移栽，篩選轉基因水稻植株。

8.根據權利要求7所述的應用，其特征在于，構建的表達載體的全序列如SEQ ID No.3所示。

9.根據權利要求7所述的應用，其特征在于，利用潮霉素篩選轉基因水稻植株。