[發(fā)明專利]一種白色念珠菌特異性檢測試劑盒

在審

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• 申請日: 2016-02-25
• 公開（公告）號: CN105717304A
• 公開（公告）日: 2016-06-29
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 李齊宏;王姣;孫海燕;李霞;葛成;于開濤
• 申請（專利權(quán)）人: 中國人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院附屬醫(yī)院
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68;G01N33/569
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及微生物檢測領(lǐng)域，具體涉及一種白色念珠菌特異性檢測試劑盒及其檢測方法。

背景技術(shù)

念珠菌屬于真菌界——半知菌亞門——芽孢菌綱——隱球酵母目——隱球酵母科，是雙相型單細(xì)胞酵母菌。念珠菌是一種芽生的酵母狀真菌，一種典型的條件致病菌。已知可以致病的常見念珠菌有：白念(Candidaalbican)、熱帶(Candidatropicalis)、近平滑(Candida，parapsilosis)、克魯斯(Candidakrusei)、星狀(Candidastellatoidea)、李也蒙(Candidaguilliermondii)和光滑念珠菌(Candida，glabrata)等八種在人體中，無癥狀時常表現(xiàn)為酵母細(xì)胞型；侵犯組織和出現(xiàn)癥狀時常表現(xiàn)菌絲型。

念珠菌是一種腐物寄生菌，廣泛存在于自然界。是人體正常菌群之一，平時主要生存于人體的口腔、皮膚、粘膜、消化道、陰道及其他臟器中。正常人群白色的帶菌率可高達(dá)40％；從陰道粘膜分離出來的念珠菌85％～90％為白色，而白色念珠菌(Candidaalbican)的致病性最強(qiáng)。

白念珠菌，又稱白假絲酵母菌，常存在于人體口腔、咽喉、腸道、陰道粘膜等處，是重要的條件致病菌，在免疫功能明顯下降(如器官移植、糖尿病、惡性腫瘤、血液病、嚴(yán)重營養(yǎng)不良等)，或大量使用抗菌素導(dǎo)致菌群失調(diào)時，該菌可引起嚴(yán)重的全身侵襲性感染。白念珠菌侵襲性感染的實(shí)驗(yàn)室診斷難度比較大，由于該菌是條件致病菌，在人體多部位棲息，經(jīng)常引起淺表感染，臨床分離陽性時不易判斷是否致病：另外，許多深部標(biāo)本無法采集，不能用培養(yǎng)法分離，這些都降低了診斷率。白色念珠菌(簡稱白念，Candidaalbicans，CA)、熱帶假絲酵母菌(簡稱熱帶，Candidatropicalis，CT)和光滑假絲酵母菌(簡稱光滑，Candidaglabrata，CG)是其中的主要致病菌，其分布廣泛，感染類型多祥，已成為臨床抗感染治療的難點(diǎn)。

口腔念珠菌病是真菌一念珠菌屬感染所引起的口腔黏膜疾病。近年來，由于抗生素和免疫抑制劑在臨床上的廣泛應(yīng)用，發(fā)生菌群失調(diào)或免疫力降低，而使內(nèi)臟、皮膚、黏膜被真菌感染者日益增多，口腔黏膜念珠菌病的發(fā)生率也相應(yīng)增高。據(jù)報道，此種菌屬于隱球菌科的念珠菌、高里念珠菌、假熱帶念珠菌，其中白色念珠菌是最主要的病原菌。

口腔念珠菌病按其主要病變部位可分為：念珠菌口炎、念珠菌唇炎、念珠菌口角炎、慢性黏膜皮膚念珠菌病。和白念珠菌感染有關(guān)的口腔疾病還有：扁平苔蘚、毛舌和正中菱形舌炎。口腔念珠菌病如不加處理，可蔓延到咽喉、消化道及呼吸道，并可并發(fā)真菌性敗血癥、心內(nèi)膜炎、腦膜炎等嚴(yán)重并發(fā)癥。

口腔念珠菌病以局部治療為主，但嚴(yán)重病例及慢性念珠菌感染常需輔以全身治療才能奏效。目前，在治療中以抗真菌西藥藥物為主，但大多為抗生素類藥物，由于廣譜抗生素本身可造成菌群失調(diào)(如口服四環(huán)素20天以上可有2％～3％的患者發(fā)生菌群失調(diào))破壞人體消化道內(nèi)細(xì)菌和真菌的平衡狀態(tài)，能抑制有抗真菌作用的某些革蘭氏陰性菌和能合成維生素B族的細(xì)菌的生長；維生素B族的缺乏也可導(dǎo)致細(xì)胞氧化作用的輔酶受抑，使組織抵抗力降低，因而有利于真菌生長。因此，采用此類藥物治療往往只能治標(biāo)不能治本，并且甚至病情容易發(fā)生反復(fù)，而且抗生素類藥物的濫用也會對人體造成損害，容易出現(xiàn)頭痛、胃腸不適，長期用藥有肝損害等副作用。

因此，在口腔念珠菌發(fā)病之前，就能夠夠快速鑒定所述的菌株，在治療上具有重要的意義。

目前臨床應(yīng)用的念珠菌的檢測方法有以下幾種：

常規(guī)涂片鏡檢是最基本的細(xì)菌學(xué)檢查方法。其優(yōu)點(diǎn)是簡便、快速和價廉，當(dāng)天出結(jié)果；缺點(diǎn)是敏感性低，特異性差，無法辨別死菌與活菌。通常需用科瑪嘉念珠菌顯色培養(yǎng)基進(jìn)一步證實(shí)。

沙氏培養(yǎng)基是念珠菌感染診斷較為常用的培養(yǎng)基，但臨床上念珠菌感染癥有的為混合感染，不同的念珠菌在沙氏培養(yǎng)基上生長均呈現(xiàn)白色菌落，要進(jìn)一步鑒定不同的菌種，有時還必須要做念珠菌的發(fā)酵試驗(yàn)和芽管試驗(yàn)，給實(shí)驗(yàn)室的診斷帶來很大的不便。

科瑪嘉(CHROMagar)培養(yǎng)基培養(yǎng)法，該培養(yǎng)基含有特殊顯色物質(zhì)，無需通過任何儀器，僅通過觀察菌落顏色即能在24～48小時(大多為48小時，30～37℃)用肉眼對念珠菌等進(jìn)行定性和定量分析。但是培養(yǎng)所用的時間相對較長，不利于快速診斷。