[發明專利]一種檢測人尿中CD80的試劑盒

在審

• 申請號: 201610116200.2
• 申請日: 2016-03-01
• 公開（公告）號: CN105628935A
• 公開（公告）日: 2016-06-01
• 發明（設計）人: 潘慶軍;劉華鋒;蔡珺;吳平;謝彤;楊陳;安寧;王淑君;陳錦霞;吳洪鑾;李尚妹;彭艷霞;張莉芳
• 申請（專利權）人: 廣東醫學院附屬醫院
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68;G01N33/545
• 代理公司: 廣州三環專利代理有限公司 44202
• 代理人: 宋靜娜;郝傳鑫

1.一種檢測人尿中CD80的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒包括包被有 抗人CD80抗體的固相載體、酶標二抗、CD80標準品、樣品稀釋液、洗滌液和 發光底物液。

2.根據權利要求1所述的檢測人尿中CD80的試劑盒，其特征在于，所述 人尿為晨尿。

3.根據權利要求1所述的檢測人尿中CD80的試劑盒，其特征在于，所述 固相載體是由聚苯乙烯制成的不透明微孔板。

4.根據權利要求1所述的檢測人尿中CD80的試劑盒，其特征在于，所述 包被有抗人CD80抗體的固相載體是由以下方法制備而成的：

將抗人CD80抗體按照比例(抗人CD80抗體：包被液＝2-10μg：1mL)的量加 入至包被液中，得到含有抗人CD80抗體的包被液，其中所述包被液為pH＝9.6、 0.05M的碳酸鹽；再將所述含有抗人CD80抗體的包被液按100μL/孔加入至微 孔板中，4℃放置24小時；去除包被液后，按150μL/孔加入封閉液至微孔板中， 37℃放置2～3小時，其中所述封閉液包括濃度為0.01mol/L、pH為7.2～7.4的PBS， 1％(w/v)的牛血清白蛋白，0.05％(v/v)的proclin300和5％(w/v)的蔗糖；甩掉封閉 液，拍干微孔板，室溫除濕干燥24～72小時，錫箔紙封袋，置2～8℃保存。

5.根據權利要求1所述的檢測人尿中CD80的試劑盒，其特征在于，所述 酶標二抗是辣根過氧化物酶標記的二抗。

6.根據權利要求5所述的檢測人尿中CD80的試劑盒，其特征在于，所述 酶標二抗是由以下方法制備而成：

用戊二醛偶聯法將二抗與辣根過氧化物酶偶聯，再用酶標抗體稀釋液稀釋 至工作濃度，其中酶標抗體稀釋液包括濃度為0.01mol/L、pH為7.2～7.4的PBS， 0.5％(w/v)的牛血清白蛋白和0.1％(v/v)的proclin300。

7.根據權利要求1所述的檢測人尿中CD80的試劑盒，其特征在于，所述 CD80標準品為CD80重組蛋白。

8.根據權利要求1所述的檢測人尿中CD80的試劑盒，其特征在于，所述 樣品稀釋液包括濃度為0.01～0.2mol/L、pH為5.7～7.0的PBS。

9.根據權利要求1所述的檢測人尿中CD80的試劑盒，其特征在于，所述 洗滌液包括濃度為0.01～0.2mol/L、pH為7.2～7.4的PBS，和體積濃度為 0.01％～0.05％(v/v)的TritonX-100。

10.根據權利要求1所述的檢測人尿中CD80的試劑盒，其特征在于，所述 發光底物液包括發光底物A液和發光底物B液，所述發光底物A液包括魯米諾 和異魯米諾中的至少一種以及發光增強劑，所述發光底物B液包括過氧化氫和 過氧化脲中的至少一種以及穩定劑。